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微生物檢測(cè)過(guò)程中的一些問(wèn)題及解答2023/02/09: 1.生化培養(yǎng)箱可以wan全替代霉菌培養(yǎng)箱么？答：可以。國(guó)外都是采用生化培養(yǎng)箱進(jìn)行霉菌培養(yǎng)的，只有中國(guó)才用霉菌培養(yǎng)箱，使用中也很麻煩。2.培養(yǎng)基和增菌液使用中pH不調(diào)整影響大嗎？答：當(dāng)然很大，比如說(shuō)沙門在酸性條件下不生長(zhǎng)，后面增菌等步驟就都白做了。3.SC肉湯和BGLB培養(yǎng)基需高壓滅菌后分再分裝么？答：這些不需要，這兩個(gè)都不是定量梯度稀釋用的，不需要先高壓滅菌再分裝，否則小導(dǎo)管內(nèi)的氣泡很難排出。4生產(chǎn)車間空氣落下菌和接觸面的菌的檢測(cè)xian量標(biāo)準(zhǔn)是多少？答：沒(méi)有辦法提供，因?yàn)椴煌纳a(chǎn)車間有不同的

霉菌培養(yǎng)容易污染原因與解決措施2023/02/09: 一、培養(yǎng)箱環(huán)境污染很多實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)霉菌采用的是專用的霉菌培養(yǎng)箱，所以培養(yǎng)箱空間里會(huì)有大量的霉菌孢子。而平皿的蓋和底是有一定縫隙的，尤其是玻璃平皿縫隙還是比較大的，正置培養(yǎng)中，孢子會(huì)向上飛揚(yáng)通過(guò)縫隙落到平板的培養(yǎng)基上，導(dǎo)致污染。細(xì)心地實(shí)驗(yàn)猿可能發(fā)現(xiàn)，污染的菌落大部分都是在平皿邊緣生長(zhǎng)的。用一次性塑料平皿來(lái)培養(yǎng)，污染的概率就會(huì)小很多，因?yàn)橐淮涡运芰掀矫蟮纳w和底之間的縫隙相比之下是比較小的。因此培養(yǎng)箱環(huán)境中的孢子可能會(huì)是主要污染源。這樣一來(lái)，解決的方法就應(yīng)該是對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行殺菌?？梢钥紤]用紫外線殺一下菌，

化學(xué)試劑變質(zhì)快？看下原因和預(yù)防措施2023/02/09: 化學(xué)試劑變質(zhì)的原因和措施1試劑變質(zhì)的原因引發(fā)和促使化學(xué)試劑發(fā)生變化的原因，大致可歸納如下。1、揮發(fā)2、升華3、潮解4、風(fēng)化5、濃縮和析晶6、水解7、分解8、氧化和還原9、非氧化——還原反應(yīng)10、聚合和縮合11、光化學(xué)反應(yīng)12、霉變2如何預(yù)防化學(xué)試劑變質(zhì)a.密封這是普遍通用的方法。試劑瓶的材料和密封程度應(yīng)根據(jù)試劑性質(zhì)而定。如：強(qiáng)腐蝕的“三酸”和液溴，可用帶磨口玻璃的試劑瓶，或是有塑料襯墊的螺旋蓋的玻璃瓶，氫氟酸則應(yīng)密封貯藏在銀制或塑料制容器內(nèi)，等等。密封適用于易揮發(fā)、升華、潮解、稀釋、風(fēng)化、水解和

實(shí)驗(yàn)室藥品貯藏溫度說(shuō)明2023/02/08: 《中國(guó)藥典》由一部、二部、三部、四部及其增補(bǔ)本組成。一部收載中藥，二部收載化學(xué)藥品，三部收載生物制品及相關(guān)通用技術(shù)要求，四部收載通用技術(shù)要求和藥用輔料。貯藏中，涼暗處是指啥，常溫是指啥。下面遠(yuǎn)慕生物來(lái)為大家介紹一下。一部凡例二十八、[貯藏]項(xiàng)下的規(guī)定，系對(duì)藥品貯藏與保管的基本要求，除礦物藥應(yīng)置干燥潔凈處不作具體規(guī)定外，一般以下列名詞術(shù)語(yǔ)表示：遮光系指用不透光的容器包裝，例如棕色容器或黑色包裝材料包裹的無(wú)色透明、半透明容器；避光系指避免日光直射；密閉系指將容器密閉，以防止塵土及異物進(jìn)入；密封系指將

實(shí)驗(yàn)室常用玻璃儀器使用說(shuō)明2023/02/08: 玻璃器皿在檢測(cè)工作中操作頻率高，也是實(shí)驗(yàn)室里常用常損的易耗品。在日常工作中，熟練各類玻璃儀器的操作規(guī)范及注意事項(xiàng)，不僅能有效保證工作效率，還能幫實(shí)驗(yàn)室規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)、降低損耗。一、常用玻璃儀器使用說(shuō)明表格名稱主要用途使用注意事項(xiàng)燒杯配制溶液、溶解樣品等加熱時(shí)應(yīng)置于石棉網(wǎng)上，使其受熱均勻，一般不可燒干錐形瓶加熱處理試樣和容量分析滴定除有與上相同的要求外，磨口錐形瓶加熱時(shí)要打開(kāi)瓶塞，非標(biāo)準(zhǔn)磨口要使用原配瓶塞碘瓶碘量法或其它生成揮發(fā)性物質(zhì)的定量分析同上圓（平）底燒瓶加熱及蒸餾液體一般避免直火加熱，隔石棉網(wǎng)或

培養(yǎng)基配制操作步驟一覽2023/02/08: 1、計(jì)算稱量根據(jù)待檢樣品屬性計(jì)算出所需的不同培養(yǎng)基的體積，根據(jù)說(shuō)明書進(jìn)行準(zhǔn)確稱量；電子天平需開(kāi)機(jī)預(yù)熱30min后使用，稱量過(guò)程中手要穩(wěn)，避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中，若灑落，應(yīng)立即停止稱量，使用潔凈布擦干粉末，重新調(diào)“0”后稱量。2、溶化對(duì)于可溶性淀粉,先用少量冷水調(diào)成糊狀,再放入沸水中；不易溶解的培養(yǎng)基，先加入少量純化水振搖溶解后，二次加水配制；需分裝的培養(yǎng)基，需wan全溶解，含瓊脂的培養(yǎng)基需加熱融化，wan全溶解后，分裝至不同容器中進(jìn)行滅菌。3、分裝如果要制作斜面培養(yǎng)基，須將培養(yǎng)基分裝于試

菌種使用的三個(gè)流程介紹2023/02/08: 1、菌種要求菌種試驗(yàn)用菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代(從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0代)，并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)行保存，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。金黃se/葡萄球菌(Staphylococcusaureus)〔CMCC(B)26003〕銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)〔CMCC(B)10104〕大腸埃希菌(Escherichiacoli)〔CMCC(B)44102〕白色念珠菌(Candidaalbicans)〔CMCC(F)98001〕生孢梭菌(Clostridi

實(shí)驗(yàn)室濃酸、濃堿的使用和保管2023/02/07: 濃酸、濃堿有很強(qiáng)的腐蝕性，容易對(duì)人體造成不同程度的傷害，如濺到皮膚上會(huì)引起腐蝕與燒傷，吸入濃酸蒸汽會(huì)強(qiáng)烈刺激呼吸道。因此在使用時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：①使用濃酸時(shí)，不得用鼻子嗅其氣味或?qū)⑵靠趯?duì)準(zhǔn)人的臉部。②使用過(guò)程中，要嚴(yán)防液體濺到皮膚上，以免被燒傷。③到庫(kù)房取用時(shí)，應(yīng)戴橡膠手套和防護(hù)眼鏡。如果瓶子較大，搬運(yùn)時(shí)必須一手托住瓶底，一手拿住瓶頸。④用移液管吸取液體時(shí)，必須用橡膠球操作。⑤不得放入烘箱內(nèi)烘烤。⑥稀釋H2SO4要在耐熱容器內(nèi)進(jìn)行，且只能將H2SO4沿器壁緩慢倒入水中，不得將水倒入H2SO4中，

不同分析工作的不同的儀器洗凈要求2023/02/07: 在分析工作中，洗滌玻璃儀器不僅是一項(xiàng)必須做的實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作，也是一項(xiàng)技術(shù)性的工作。實(shí)驗(yàn)室儀器的潔凈程度直接影響到實(shí)驗(yàn)效果，甚至決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。由于器皿的不清潔或被污染，往往造成較大的實(shí)驗(yàn)誤差，甚至?xí)霈F(xiàn)相反的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，對(duì)于學(xué)校、科研所、醫(yī)院和廠礦企業(yè)的各實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，儀器的洗滌都顯得非常重要。不同的分析工作有不同的儀器洗凈要求，我們以一般定量化學(xué)分析為主介紹儀器的洗滌方法。一、潔凈劑及使用范圍z常用的潔凈劑是肥皂，肥皂液（特制商品），洗衣粉，去污粉，洗液，有機(jī)溶劑等。肥皂，肥皂液，洗衣粉

實(shí)驗(yàn)室溫度控制在什么范圍才是合適的？2023/02/07: 一、確定實(shí)驗(yàn)室溫度控制范圍1、識(shí)別各項(xiàng)工作對(duì)環(huán)境溫濕度的要求。主要識(shí)別儀器的需要、試劑的需要、實(shí)驗(yàn)程序的需要，以及實(shí)驗(yàn)室員工的人性化考慮（人體在溫度18-25℃相對(duì)濕度在35-80%范圍內(nèi)總體感覺(jué)舒適，并且從醫(yī)學(xué)角度來(lái)看環(huán)境干燥和喉嚨的炎癥存在一定的因果關(guān)系）四個(gè)方面要素綜合考慮，列出對(duì)溫濕度控制范圍要求的清單。2、選擇并制定有效的環(huán)境溫濕度控制范圍。從以上各要素所有要求清單中摘取最窄范圍作為該實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制的允許范圍，制定環(huán)境條件控制方面的管理程序，并依據(jù)該科室實(shí)際情況制定合理有效的SOP。3

遠(yuǎn)慕教你快速構(gòu)建自己想要的目的質(zhì)粒2023/02/07: 載體構(gòu)建(vectorconstruction)是把連接好的DNA分子運(yùn)送到受體細(xì)胞中去。首先,必須尋找一種能進(jìn)入細(xì)胞、在裝載了外來(lái)的DNA段后仍能照樣復(fù)制的運(yùn)載體。理想的運(yùn)載體是質(zhì)粒(plasmid),在基因工程中，常用人工構(gòu)建的質(zhì)粒作為載體。當(dāng)給質(zhì)粒插入一段外源DNA段后，它依然能夠進(jìn)行自我復(fù)制。載體構(gòu)建是分子生物學(xué)研究常用的手段之一。1.載體構(gòu)建載體構(gòu)建(vectorconstruction)：載體構(gòu)建是分子生物學(xué)研究常用的手段之一。主要包括已有載體多克隆位點(diǎn)（MCS）的改造和已有載體啟動(dòng)

mRNA與蛋白質(zhì)的詳細(xì)介紹2023/02/06: 表達(dá)DNA轉(zhuǎn)錄為mRNA，再翻譯為蛋白質(zhì)。不可濫用。mRNA產(chǎn)生后不一定就能翻譯為蛋白質(zhì)，如卵母細(xì)胞母源信息mRNA，受精卵發(fā)育初期才表。由mRNA被一些蛋白質(zhì)結(jié)合，也可能其他原因如小分子RNA作用。mRNA的選擇性運(yùn)輸細(xì)胞不同情況下選擇地將不同hnRNA加工成mRNA運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)，--mRNA的選擇加工運(yùn)輸,一種通核孔的主動(dòng)運(yùn)輸方式，可能機(jī)制大：1.依賴核孔復(fù)合體上受體蛋白對(duì)RNA分子的特異性識(shí)別，缺少識(shí)別信號(hào)便保留在核內(nèi)；2.不需要識(shí)別信號(hào)，除被特別保留在核內(nèi)的RNA外：其余RNA自動(dòng)輸出細(xì)胞

蛋白死活不表達(dá)，用對(duì)方法轉(zhuǎn)錄翻譯一天搞定！2023/02/06: 蛋白難以表達(dá)、表達(dá)產(chǎn)量低、蛋白折疊或者修飾不正確等問(wèn)題，一直是大家的心頭痛。一般會(huì)通過(guò)增加可溶性標(biāo)簽、重新構(gòu)建載體或者更換表達(dá)系統(tǒng)來(lái)解決。但高昂的費(fèi)用及過(guò)長(zhǎng)的表達(dá)時(shí)間也讓蛋白表達(dá)成了科研路上一座無(wú)法跨越的大山。在此遠(yuǎn)慕為大家推薦一款無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)，它廣泛適用于多物種；不需要培養(yǎng)細(xì)胞，配好體系就能表達(dá)蛋白；對(duì)于一些困難蛋白也很有效！Cell-FreeSystem（CFS）無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)CFS利用麥胚提取物，人工提供蛋白表達(dá)所需的酶、輔助因子，并模擬表達(dá)環(huán)境，僅使用PCR片段或載體為模板，即

慢病毒感染后熒光表達(dá)較弱的原因2023/02/06: 熒光蛋白的亮度與啟動(dòng)子、表達(dá)方式和連接原件等有關(guān)，不同啟動(dòng)子誘導(dǎo)熒光蛋白表達(dá)的強(qiáng)弱不同，如UBC相對(duì)于EF1α、CAG、CMV等強(qiáng)啟動(dòng)子表達(dá)較弱。融合或非融合表達(dá)與熒光強(qiáng)度也有很大關(guān)系，融合表達(dá)時(shí)熒光蛋白可能出現(xiàn)錯(cuò)誤折疊等現(xiàn)象，導(dǎo)致檢測(cè)不到熒光信號(hào)或熒光較弱。非融合表達(dá)時(shí)一般選擇連接肽作為連接原件，如2A肽或IRES將ORF分隔開(kāi)；選擇IRES，下游ORF的表達(dá)明顯弱于上游，2A肽可以避免上下游ORF表達(dá)強(qiáng)弱不一致的問(wèn)題，因此更為常用，如P2A和T2A不過(guò)2A肽切割后容易有殘留氨基酸。帶熒光的慢

慢病毒包裝流程、材料選擇及注意事項(xiàng)2023/02/06: 在做慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)中，大家是不是經(jīng)常遇到：用同樣的病毒載體系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，為什么有人做的很好，次次成功，有人卻是時(shí)常做不出來(lái)，穩(wěn)定性很差，不是滴度低就是根本不出毒？今天遠(yuǎn)慕生物就把10年的病毒包裝經(jīng)驗(yàn)總結(jié)給大家，首先我們來(lái)簡(jiǎn)要介紹下慢病毒包裝的流程：影響慢病毒包裝是否成功的因素有很多，例如：細(xì)胞狀態(tài)、質(zhì)粒比例、質(zhì)粒抽提純化情況、轉(zhuǎn)染試劑和條件、目的基因本身的影響等等。我們?cè)敿?xì)列出了如下幾點(diǎn)。1.實(shí)驗(yàn)材料的選擇我們進(jìn)行慢病毒包裝時(shí)要重視實(shí)驗(yàn)材料——建議使用商品化的成熟毒載體系統(tǒng)，遠(yuǎn)慕生物慢病毒包裝三

顯色培養(yǎng)基滅菌方式可直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)2023/02/03: 顯色培養(yǎng)基滅菌方式的正確與否，直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，以下是顯色培養(yǎng)基滅菌方式，話不多說(shuō)一起看看吧。1.首先將顯色培養(yǎng)基內(nèi)層滅菌筒取出，再向外層鍋加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。2.放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。三角瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞，3.加蓋，將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對(duì)稱的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓。4.通電加熱，并同時(shí)打開(kāi)排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣*排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上

干粉培養(yǎng)基使用滅菌處理方式介紹2023/02/03: 干粉培養(yǎng)基在使用之前必須進(jìn)行滅菌處理，將其所含活菌全部殺死或全部除去。常用的滅菌方法有過(guò)濾除菌、干熱滅菌、濕熱滅菌及輻照滅菌等。其中，濕熱滅菌法又包括四種方式：煮沸法、流動(dòng)蒸汽滅菌法、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法。通常來(lái)說(shuō)，使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法。但是對(duì)于有些培養(yǎng)基來(lái)說(shuō)，高壓條件會(huì)損壞培養(yǎng)基中的某些成分，不利于培養(yǎng)基的使用，所以只能采用煮沸滅菌的處理方法。接下來(lái)遠(yuǎn)慕生物主要就煮沸滅菌方法進(jìn)行討論，話不多說(shuō)一起看看吧。一、煮沸滅菌的常見(jiàn)表述有關(guān)煮沸滅菌的描述，通常有如下幾種方式：a、稱取本品4

關(guān)于粉劑培養(yǎng)基的保存條件說(shuō)明2023/02/03: 干粉培養(yǎng)基的保存只要擰緊蓋子，防止吸潮，觀察一下沒(méi)有吸水結(jié)塊變潮，在常溫下存放即可，這個(gè)沒(méi)有特殊的要求。里面就是些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但是應(yīng)該做一下對(duì)比實(shí)驗(yàn)。其實(shí)每購(gòu)入一批新的培養(yǎng)基，也是要做對(duì)比實(shí)驗(yàn)的。干粉培養(yǎng)基沒(méi)有必要放在冰箱里，含水量很低，微生物是不易繁殖的，放冰箱里反而容易受潮，用時(shí)開(kāi)開(kāi)關(guān)關(guān)的忽冷忽熱，更糟糕。培養(yǎng)基的質(zhì)量與水分含量關(guān)系很大，因?yàn)榈鞍纂说瘸煞秩菀孜?，只要包裝容器密封性好就沒(méi)必要放冰箱，一般干燥培養(yǎng)基的保質(zhì)期常溫貯存都是一到三年。有些不常用的培養(yǎng)基開(kāi)封后不要扔掉內(nèi)蓋，去掉內(nèi)蓋容易吸

成品培養(yǎng)基能放多久？過(guò)期了還能用嗎？2023/02/03: 配好的培養(yǎng)基能放多久？培養(yǎng)基過(guò)期了還能用嗎？成品培養(yǎng)基配制后保質(zhì)期是多少？今天遠(yuǎn)慕為大家解答！普通的液體培養(yǎng)基，密封滅菌后放置在2-8℃冰箱內(nèi)可以保存三個(gè)月，普通的培養(yǎng)基平板可以保存一個(gè)月或更久。但是如果培養(yǎng)基中含有易分解的物質(zhì)，那么保留的時(shí)間就很短甚至需要現(xiàn)配現(xiàn)用。如果培養(yǎng)基中沒(méi)有容易分解或者不穩(wěn)定的成分，配置好之后密封放在冰箱中，一般可以保存三個(gè)月左右。同時(shí)在取用培養(yǎng)基的時(shí)候，需要檢查培養(yǎng)基中是否有雜菌生長(zhǎng)，顏色質(zhì)地是否有改變，是否出現(xiàn)了干燥，如果出現(xiàn)了這些異常，就不要繼續(xù)使用了。當(dāng)然，有些

遠(yuǎn)慕生物教你準(zhǔn)確測(cè)定菌液濃度，收藏起來(lái)！2023/02/02: 在微生物相關(guān)的實(shí)驗(yàn)中，大腸桿菌是最chang用的菌株。關(guān)于大腸桿菌濃度的測(cè)定以及計(jì)算有許多方法。今天遠(yuǎn)慕生物就給大家介紹以分光光度計(jì)以及熒光光度計(jì)連續(xù)監(jiān)測(cè)的方法，通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)液吸光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度隨時(shí)間的變化并建立微生物生長(zhǎng)曲線，確定吸光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度檢測(cè)閾值。據(jù)此測(cè)定達(dá)到閾值吸光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度所需時(shí)間，推導(dǎo)并驗(yàn)證了檢測(cè)時(shí)間與菌初始濃度之間的線性關(guān)系，建立閾值檢測(cè)曲線。利用定時(shí)培養(yǎng)檢測(cè)方法建立定時(shí)檢測(cè)曲線。采用上述兩種定量方法所有微生物檢測(cè)約10h可完成。1、將菌種接種于斜面培養(yǎng)24h，用接種環(huán)挑

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