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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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核酸分子大小與瓊脂糖濃度的關(guān)系介紹2023/02/16
核酸分子大小與瓊脂糖濃度的關(guān)系(1)DNA分子的大小在凝膠中,DNA片段遷移距離(遷移率)與堿基對的對數(shù)成反比,因此通過已知大小的標(biāo)準(zhǔn)物移動的距離與未知片段的移動距離時行比較,便可測出未知片段的大小。但是當(dāng)DNA分子大小超過20kb時,普通瓊脂糖凝膠就很難將它們分開。此時電泳的遷移率不再依賴于分子大小,因此,就用瓊脂糖凝膠電泳分離DNA時,分子大小不宜超過此值。(2)瓊脂脂糖的濃度如下所示,不同大小的DNA需要用不同濃度的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。瓊脂糖濃度與DNA分離范圍瓊脂糖濃度/%0.30.
你知道凝膠層析分離物質(zhì),有什么優(yōu)缺點嗎2023/02/16
1.凝膠層析操作簡便,所需設(shè)備簡單。有時只要有一根層析柱便可進(jìn)行工作。分離介質(zhì)—凝膠wan全不需要像離子交換劑那樣復(fù)雜的再生過程便可重復(fù)使用。2.分離效果較好,重復(fù)性高。突出的是樣品回收率高,接近100%。3.分離條件緩和。凝膠骨架親水,分離過程又不涉及化學(xué)鍵的變化,所以對分離物的活性沒有不良影響。4.應(yīng)用廣泛。適用于各種生化物質(zhì),如肽類、激素、蛋白質(zhì)、多糖、核酸的分離純化、脫鹽、濃縮以及分析測定等。分離的分子量范圍也很寬,如SephadexG類為102~105d;Sepharose類為105~
電泳后的凝膠染色方法介紹2023/02/16
實驗概要本文介紹了電泳后主要的凝膠染色方法,包括:標(biāo)準(zhǔn)考馬斯亮藍(lán)染色法、快速考馬斯亮藍(lán)染色法、凝膠銨銀染色法、凝膠中性銀染色法及凝膠銅染色法。實驗步驟1.標(biāo)準(zhǔn)考馬斯亮藍(lán)染色法1)電泳后,將凝膠轉(zhuǎn)入一潔凈的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝膠體積的0.25%考馬斯亮藍(lán)R-250(溶解于50%甲醇和10%乙酸中);2)室溫下振搖溫育4h至過夜;3)去除染色液,收集保存可重復(fù)使用20-40次;4)依次在25%甲醇和7.5%乙酸中室溫振搖下脫色。靈敏度為0.1-0.5ug蛋白/每條帶。注:使用加熱的染色液或
各種類抗體的主要特性和功能介紹2023/02/16
一、IgGIgG于出生后3個月開始合成,3~5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量最高的抗體,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個亞類,根據(jù)其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,其親和力高,在體內(nèi)分布廣泛,具有重要的免疫效應(yīng),是機(jī)體抗感染的“主力軍”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,在新生兒抗感染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑活化補體,并可與巨噬細(xì)
細(xì)胞因子中全血的標(biāo)本處理方法2023/02/15
細(xì)胞因子中全血的標(biāo)本處理方法分析:我們針對全血:使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血,不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑,血樣在8小時內(nèi)分析,超過8小時會導(dǎo)致活性的損失,一般細(xì)胞因子陽性細(xì)胞會減少5%。如不能在8小時之內(nèi)檢測,應(yīng)將真空采血管水平室溫放置。自身血漿中外周血單個核細(xì)胞(PBMCs):使用肝素鈉抗凝的采血后,分離PBMCs,24小時內(nèi)分析。組織培養(yǎng)基中的外周血單個核細(xì)胞(PBMCs):用Ficoll分離PBMCs,將細(xì)胞重懸于含10%熱滅活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培養(yǎng)基中,
細(xì)菌胞外蛋白含量的測定方法2023/02/15
一、實驗原理這種蛋白質(zhì)測定法是的方法之一.過去此法是應(yīng)用泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代.此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質(zhì)的靈敏度.這兩種顯色反應(yīng)產(chǎn)生深蘭色的原因是:在堿性條件下,蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅結(jié)合生成復(fù)合物.Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質(zhì)中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產(chǎn)生深蘭色(鉬蘭和鎢蘭的混合物).在一定的條件下,蘭色深度與蛋白的量成正比。Folin
細(xì)胞培養(yǎng)為何要先裂解紅細(xì)胞?2023/02/15
一、基本介紹紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞z簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細(xì)胞,它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞,可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。二、使用說明①組織細(xì)胞樣品1、新鮮組織經(jīng)yi酶或膠原酶等消化分散成單個細(xì)胞懸液,離心棄去上清液。2、從4℃冰箱中
簡述牛血清白蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中的用途2023/02/15
牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用。主要成分:1.蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。2.多肽——血小板促生長因子能促細(xì)胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細(xì)胞增殖因子;成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,血清中含量雖很少,但對細(xì)胞生長也有一定作用。3.激素——胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄
菌種保藏中心是怎么進(jìn)行細(xì)菌鑒定的?2023/02/14
傳統(tǒng)方法常規(guī)宏觀菌落形態(tài)學(xué)觀察,主要觀察菌落在其適合的培養(yǎng)基上的生長狀況:細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長形態(tài)、大小、顏色是否均勻一致,菌落個體表面及邊緣的生長狀況;在液體培養(yǎng)基上的渾濁狀況、沉淀狀況、液面菌膜狀況;半固體上穿刺接種后,觀察細(xì)菌是否沿著接種線生長以及其生長狀態(tài)是呈毛刷樣生長還是均勻生長,上下生長是否一致.在鑒別培養(yǎng)基上培養(yǎng),觀察結(jié)果是否跟預(yù)期結(jié)果相同。細(xì)菌的個體形態(tài)學(xué)觀察,即通過顯微鏡觀察.觀察前細(xì)菌需要著色,要根據(jù)預(yù)先確定的觀察項目選擇與之相對應(yīng)的染色方法,目前常用的染色方法包括革蘭氏
遠(yuǎn)慕生物簡述固體培養(yǎng)基的原理2023/02/14
固體培養(yǎng)基的凝固劑一般不是微生物的營養(yǎng)成分,只起固化作用。理想的凝固劑應(yīng)具備以下條件:不會被微生物分解利用;不會因高溫滅菌而受到破壞;在微生物生長的溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài);對微生物及操作人員均無毒害作用;透明度好、凝固力強;價格低廉,配制方便。常用的凝固劑是瓊脂。瓊脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,絕大多數(shù)微生物都不能分解利用它。瓊脂的熔點為96℃,凝固點為40℃,因此,在一般的培養(yǎng)條件下都呈固體狀態(tài),而且透明度強。正是這些優(yōu)良特性,使瓊脂取代了早期使用的明膠而成為常用的凝固劑。呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基,叫
分子生物學(xué)檢驗技術(shù)的分析對象是什么?2023/02/14
分子生物學(xué)是在生物化學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,以研究核酸和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能等生命本質(zhì)的學(xué)科,在核酸、蛋白質(zhì)分子水平研究發(fā)病、診斷、治療和預(yù)后的機(jī)制。其中基因工程(基因技術(shù),基因重組)是目前分子生物學(xué)研究熱點,這些技術(shù)可以改造或擴(kuò)增基因和基因產(chǎn)物,使微量的研究對象達(dá)到分析水平,是研究基因調(diào)控和表達(dá)的方法,也是分子水平研究疾病發(fā)生機(jī)制、基因診斷和基因治療的方法。轉(zhuǎn)化(transformation)、轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)位等是自然界基因重組存在的方式,也是人工基因重組常采用的手段?;蛑亟M的目的之一是基因克(ge
如何鑒定發(fā)酵罐中的菌種種類2023/02/14
好多人對菌種的鑒定方法不了解,尤其是發(fā)酵罐的。下面遠(yuǎn)慕就來給大家介紹如何鑒定發(fā)酵罐中的菌種種類:1.糖發(fā)酵試驗糖發(fā)酵實驗是常用的生化反應(yīng),在腸道細(xì)菌鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們在分解糖的能力上有很大差異,有些細(xì)菌能分解糖并產(chǎn)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣;傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不能分解乳糖;普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能分解乳糖。酸的產(chǎn)生可以利用指示劑來
微生物無菌操作注意事項!2023/02/13
無菌技術(shù)主要包括1、對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒;2、將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種的用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌;3、為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行,4、實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸一、倒平板1.培養(yǎng)基滅菌后,需冷卻至50℃左右時才能倒平板。2.左手拿培養(yǎng)皿,右手拿錐形瓶,左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不要wan全打開。3.整個操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行,避免雜菌污染。4.平板冷卻后要倒置的原因:防止皿蓋上的
pH計和pH試紙測試結(jié)果差距很大,那個能信?2023/02/13
在pH測量中常常會遇到這樣的情況:同一個溶液用pH試紙測得的值與pH計測得的值相差很大,甚至可相差好幾個pH單位!曾經(jīng)有人做過這樣一些實驗:實驗一:強電解質(zhì)溶液的pH試驗——在50mL。去離子水中加入1.6g的Na2SO4,用NaOH和H2SO4調(diào)節(jié)pH,結(jié)果……實驗二:中濃度緩沖渡pH的試驗——250mL去離子水中加入pH6.86標(biāo)準(zhǔn)混合磷酸鹽2.5g,用NaOH和H2S04調(diào)節(jié)pH,結(jié)果……實驗三:多種緩沖劑混合溶液的pH試驗——250mL去離子水中加入pH4.008標(biāo)準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀1.2
實驗室玻璃量器校準(zhǔn)方法2023/02/13
我們?yōu)槭裁匆?zhǔn)?校正使其表面容量(儀器上所標(biāo)示的容量)和真實容量一致,保證實驗用量器的準(zhǔn)確性。校準(zhǔn)范圍常用的需校準(zhǔn)的玻璃量器有滴定管、移液管(分度吸量管和單標(biāo)線吸量管)、容量瓶、量筒量杯四種。校準(zhǔn)條件1、容量瓶,滴定管校正前應(yīng)對其進(jìn)行檢漏。2、新購入的玻璃儀器加入適量的鉻酸鉀洗液浸泡4-6小時或過夜,在倒出洗液用自來水沖洗干凈,在用純化水沖洗3次。在通風(fēng)干燥處自然風(fēng)干。待儀器內(nèi)壁不掛水珠為清潔干凈。3、校正用的水應(yīng)用新沸過冷水,放一溫度計(盡量選用量程小的減少誤差),用于測定水的溫度;應(yīng)提前1
實驗室質(zhì)量控制常用方法,不會的趕緊學(xué)!2023/02/13
一、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)監(jiān)控質(zhì)控過程通常的做法是實驗室直接用合適的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)樣品作為監(jiān)控樣品,定期或不定期將監(jiān)控樣品以比對樣或密碼樣的形式,與樣品檢測以相同的流程和方法同時進(jìn)行,檢測室完成后上報檢測結(jié)果給相關(guān)質(zhì)量控制人員,也可由檢測人員自行安排在樣品檢測時同時插人標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),驗證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。適用范圍一般可用于:儀器狀態(tài)的控制、樣品檢測過程的控制、實驗室內(nèi)部的儀器比對、人員比對、方法比對以及實驗室間比對等。這種方法的特點是可靠性高,但成本高。二、人員比對質(zhì)控過程由實驗室內(nèi)部的檢測人員在合理的時
實驗室有害微生物這樣管理2023/02/10
國家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度,將病原微生物分為四類:第一類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。第三類病原微生物,是指能夠引起人類或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險有限,實驗室感染后很少引起嚴(yán)重疾病,并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類病原微生物,是
如何管理檢驗檢測行業(yè)的“量具”----標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)2023/02/10
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可以說是檢驗檢測行業(yè)的“量具”,主要用于確定樣品的特性值、方法驗證、期間核查、質(zhì)量控制以及人員技能考核等用途。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理是設(shè)備管理的重要組成部分,與儀器設(shè)備管理相比又有其特殊性,主要應(yīng)做好以下工作:(1)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采購。實驗室使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)種類繁多,選擇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可從如下幾個方面考慮:a)優(yōu)先選用質(zhì)量管理體系完備的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)生產(chǎn)者提供的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì);b)優(yōu)先選用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),主要有國家計量管理部門批準(zhǔn)發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和國家標(biāo)準(zhǔn)化管理部門批準(zhǔn)發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)樣品;c)當(dāng)無法選擇到相同基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時,可
檢測報告中數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確的一系列原因2023/02/10
1.檢測和計算粗心大意檢測是一個需要專注的過程,稍有疏忽,就容易出現(xiàn)差錯。而隨著手機(jī)的普及,檢測過程中,檢測人員在檢測后的數(shù)據(jù)計算過程中接聽手機(jī)的現(xiàn)象非常普遍,如此以及其他的粗心造成檢測失誤的案例也時有發(fā)生。檢測和計算過程中粗心大意造成的檢測失誤雖不常見,但一旦出現(xiàn)這種情況,將直接導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)差錯。2.對可疑數(shù)據(jù)不敏感一般而言,每一種物質(zhì)都有其自身特性,其檢測數(shù)據(jù)應(yīng)在一定范圍,如,苯板的導(dǎo)熱系數(shù)不可能為0,采用不同鋁合金建筑型材和普通單層玻璃的建筑外窗不可能達(dá)到保溫窗的要求等等。當(dāng)檢測人員或
遠(yuǎn)慕教你看懂培養(yǎng)基檢驗報告單2023/02/09
干粉類培養(yǎng)基的檢驗報告單主要包括以下內(nèi)容,建議拿一份CoA結(jié)合本文閱讀。1.感官一般包括色澤、氣味、形態(tài)、雜質(zhì)等,屬于主觀評價。不同廠家產(chǎn)品會有不同。2.理化a)干燥失重或水分一般控制在5%-6%以內(nèi),不同廠家會有不同。結(jié)合水活度來說,這是控制培養(yǎng)基干粉微生物污染的重要手段。同時要關(guān)注密封情況,不能破壞水活度的環(huán)境。b)凝膠強度這條僅限于是瓊脂類干粉培養(yǎng)基,一般描述為適宜或適中。因為瓊脂平板一般要倒置培養(yǎng),所以凝膠強度非常重要。而凝膠強度的高低也直接來源于瓊脂的質(zhì)量。瓊脂是一種來源于海藻中,具有
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