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上海遠慕生物科技有限公司
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氧合血紅蛋白簡介與測定方法2023/03/06
血紅素鐵原子為二價與O2、卟啉的4個N,與珠蛋白的組an酸殘基(咪唑)結合,成為八面體的絡合物結構。它與游離的血紅蛋白不同,是低自旋(spin)物質,吸收光譜也類似細胞色素還原型。氧分壓和氧合血紅蛋白的生成百分率(%)的圖即結合曲線(解離曲線),由于血紅素間的相互作用的變構(alloste-ric)效應而呈S型。氧合血紅蛋白的酸性比血紅蛋白強,生成時放出H+,將此稱為庫效應。可以認為,它在肺中與氧結合并放出二氧化碳;在組織中在乳酸的生成與氧的游離的相互關系具有意義。血紅蛋白測定(一)檢測原理血液
輻照后的血清對細胞培養(yǎng)實驗有影響嗎2023/03/03
血清為細胞正常生長提供必要的營養(yǎng)成分,而血清也是很容易受到外界因素影響的,所以有些會對血清采取鈷60γ射線照射也就是我們所謂的輻照血清。那么血清被輻照后會對本身產(chǎn)品品質影響嗎?下面遠慕為大家解惑。輻照型血清是將正常血清經(jīng)過三次無菌過濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基,它具有促進細胞增殖和誘導細胞分化等的生物學功能其質量的好壞直接影響著生物制品的安全性。早在2004年之前,西北民族大學生命科學與工程學院的研究人員就用已知大腸桿菌噬菌體為陽性的同批新生牛血清進行
遠慕簡述蛋白凍干技術和凍干后的影響2023/03/03
第一:什么是蛋白?蛋白又名雞子白,異名雞卵白(《別錄》)、雞子清(《食療本草》)。為雉科動物家雞的蛋白,是常見的食品。營養(yǎng)優(yōu)良、潤肺利咽、清熱解毒。第二:蛋白為什么要凍干?蛋白質對熱敏感,凍干能使絕大部分蛋白質的活性保留下來,提高蛋白的穩(wěn)定性并延長保存時間,同時降低運費。第三:凍干對蛋白會有哪些影響?凍干有可能會造成蛋白的活性部分損失,聚集和其它變性問題。但可以通過添加保護劑(穩(wěn)定劑,添加劑,輔料)和控制凍干的各種條件來盡可能降低這些負面的影響。第四:凍干對蛋白前為什么向蛋白溶液中加保護劑?保護
多肽分析過程中常見問題解讀2023/03/03
小分子越來越難做,大分子發(fā)展很強勢,似乎成為了近年來藥物研發(fā)市場的重要表現(xiàn)之一,“多肽”類藥物正是其中的一大熱門。目前多肽藥物的質量監(jiān)管日趨漸嚴,在這種趨勢下,尋找能滿足更高分離度,靈敏度的分析方法就顯得尤為重要。很多小伙伴在在開發(fā)多肽類樣品分析方法中總是遇到各種的問題,無比煩惱。這里小編就總結了一些在多肽方法開發(fā)中常見的問題分享給各位小伙伴。1、多肽含量與多肽純度有什么區(qū)別?一條多肽產(chǎn)品中除了多肽本身還包括生產(chǎn)過程中帶入的水份及有機鹽分等雜質,多肽純度僅指多肽本身所含肽產(chǎn)品的含量及雜質的含量,
溶解多肽的方法及多肽應用的注意點2023/03/03
多肽的溶解度取決元計算的物理特性。氨基酸可分類為酸性,堿性,極性,非極性,疏水性。多肽有高含量的非極性疏水性氨基酸或極性不帶電荷的氨基酸。建議溶解在有機溶液中(例如:DMF,甲醇,丙醇,異丙醇,DMSO)??傊?,酸性多肽一般溶解于堿性溶液中,而堿性多肽溶解在酸性溶液中。氨基酸的屬性堿性:Arg,His(H),Lys(K)非極性疏水性:Ala(A),Ile(I),Len(L),Met(M),Phe(F),Pro(P),Trp(W),Val(V)極性不帶電荷:Asn(N),Cys(C),Glg(G)
常用標準pH標準液緩沖表一覽2023/03/02
國內常用的標準pH緩沖溶液為標稱pH4,pH7和pH9的三種,它們的成分是;pH4:0.05M鄰苯二甲酸氫鉀溶液pH7:0.025M磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉混合鹽溶液pH9:0.01M硼砂溶液溫度(℃)05101520253035404550556070809095pH44.014.004.004.004.004.004.014.024.044.044.064.044.094.124.164.204.22pH76.986.956.926.906.886.866.856.846.846.836.83
PH標準液與PH緩沖液的區(qū)別2023/03/02
什么是pH標準緩沖溶液?pH緩沖溶液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿,或者在溶液中的化學反應產(chǎn)生少量的酸或堿,以及將溶液適當稀釋,這個溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變,這種能對抗少量酸堿或大或小稀釋,而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。pH標準緩沖溶有哪些特點?1、標準溶液的pH值是已知的,并達到規(guī)定的準確度。2、標準溶液的pH值有良好的復現(xiàn)性和穩(wěn)定性,具有較大的緩沖容量,較小的稀釋值和較小的溫度系數(shù)。3、溶液的制備方法簡單。如何配制pH標準緩沖溶液?對于一般pH測量
為什么pH測量一定要標定校準?2023/03/02
pH測量通常有比色法(pH試紙或比色皿)和電極法二種。比色法當然不要標定,而電極法就一定要標定,因為電極法pH測量就是將未知溶液與已知pHs值的標準溶液在測量電池中作用比較測定,這是電極法pH測量的“操作定義”所決定的。pH計因電計設計的不同而類型很多,其操作步驟各有不同,因而pH計的操作應嚴格按照其使用說明書正確進行。在具體操作中,校準是pH計使用操作中的一重要步驟。表1的數(shù)據(jù)是精度為0.01級、經(jīng)過計量檢定合格的pH計在未校準時與校準后的測量值,從中可以看出校準的重要性。盡管pH計種類很多,
pH緩沖液的使用方法和配制保存2023/03/02
pH緩沖液是確保pH測量值精確的重要因素。標準緩沖液用于校準pH傳感器和檢查其性能。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性。即使將外部物質加入緩沖液中,這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值。pH緩沖液使用方法:首先取少量校正液潤洗小量杯,然后加入適量校正液(液面高度沒過電極的感應探頭即可)。按照電子pH測試筆使用說明書進行校正。由于校正液是高精密的液體,是電子ph測試筆精確度的保障,因此用過的校正液不能再倒回瓶中,以免影響校正液精度,帶入細菌等,造成校正液無法繼續(xù)使用。pH緩沖液的配制及其保存:
這些微生物培養(yǎng)與分離的方法你知道嗎2023/03/01
接種與分離方法根據(jù)待檢標本的性質、培養(yǎng)目的和所用培養(yǎng)基的種類,采用不同的接種方法。1.平板劃線分離培養(yǎng)法對混有多種細菌,采用劃線分離和培養(yǎng),使原來混雜在一起的細菌沿劃線在瓊脂平板表面分離,得到分散的單個菌落,以獲得純種。平板劃線分離法通常有兩種方法:①分區(qū)劃線分離法:此法常用于含菌量較多的細菌的分離。先用接種環(huán)挑取標本涂布于瓊脂平板1區(qū)(占培養(yǎng)基總面積的?)并作數(shù)條劃線,再于2、3、4區(qū)依次劃線。每劃完一個區(qū)域,均將接種環(huán)燒灼滅菌1次,冷后再劃下一區(qū)域,每一區(qū)域的劃線均與上一區(qū)域的劃線交接1~3
微生物分類!遠慕整理不同類型總結2023/03/01
【知識點名稱】微生物分類【進階攻略】微生物分為不同類型,不同類型中的微生物是考查的方向?!局R點詳情】微生物的分類按照微生物細胞結構和組成不同將其分成三種類型:(1)原核細胞型微生物:僅有原始核,無核膜、無核仁,染色體僅為單個裸露的DNA分子,無有絲分裂,缺乏完整的細胞器。屬于這類微生物的有細菌、放線菌、螺旋體、支原體、衣原體、立克次體。(2)真核細胞型微生物:細胞核分化程度較高,有典型的核結構(有核膜、核仁、多個染色體,由DNA和組蛋白組成),通過有絲分裂進行繁殖。胞漿內有多種完整的細胞器。屬
遠慕教你制作微生物培養(yǎng)皿2023/03/01
一、如何制作:分離培養(yǎng)微生物,離不開固體培養(yǎng)基。在微生物實驗室里,固體培養(yǎng)基的使用是如此地頻繁和常規(guī),以至于這一方法看起來也理所當然。然而,回溯至1881年固體培養(yǎng)基出現(xiàn)以前,微生物的培養(yǎng)還只能在液體培養(yǎng)基中進行。為了能直接觀察培養(yǎng)物的形態(tài)及生長情況,科學家希望能將微生物培養(yǎng)在固體表面上,就像微生物生長在橘子皮或土豆上一樣。德國醫(yī)生羅伯特·科赫(Robert·Koch,1843—1910)曾用煮沸消毒的土豆來培養(yǎng)細菌。此后,他試著用明膠作培養(yǎng)基的凝固劑。他將明膠加入液體培養(yǎng)基中進行融化,然后將混
淺析微生物培養(yǎng)皿接種后倒置培養(yǎng)的原因2023/03/01
什么是培養(yǎng)皿?培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細胞培養(yǎng)的實驗室器皿,由一個平面圓盤狀的底和一個蓋組成,一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。培養(yǎng)皿接種后為什么要倒置培養(yǎng)?1、利于菌種的生長和繁殖培養(yǎng)條件為必須通風時,倒置的平板可以減少培養(yǎng)基表面的空氣流動,減慢培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)的速度,保持瓊脂等固體培
細胞培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)選擇及pH變化問題2023/02/28
由于大多數(shù)細胞適宜的pH為7.0~7.4,偏離此范圍可能對細胞生長產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不wan全相同,原代培養(yǎng)的細胞一般對pH變動耐受力差,無限細胞系耐受力強。因此,原代培養(yǎng)時,培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng),但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同,如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。MEM低血清培養(yǎng)
培養(yǎng)基配制前后的質量控制了解一下2023/02/28
培養(yǎng)基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質。所用的化學藥品必須純凈,稱取的份量務必準確。酸堿度應符合細菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準確測定調節(jié)pH值。多數(shù)細菌生長的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。營養(yǎng)均衡:六大營養(yǎng)物缺一不可。部分生物還有特殊的要求;營養(yǎng)物質的配比;酸堿度。培養(yǎng)基配制時的質量控制容器:配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶,平皿或試管等器材應為中性,無酸,堿抑制物殘留,平皿底部要平,以免瓊脂厚薄不一,影響藥敏試驗結果。成分來源:各種成分來源可靠,不含對目的菌生長有抑制的物質。特殊要o/f試
培養(yǎng)皿高壓蒸汽滅菌的方法教程2023/02/28
培養(yǎng)皿最初由在德國生物學家羅伯特·科赫手下工作的細菌學家朱利斯·理查德·佩特里于1887年設計,故又稱為“佩特里皿”。培養(yǎng)皿質地脆弱、易碎,故在清洗及拿放時應小心謹慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿比較好及時清洗干凈,存放在安全、固定的位置,防止損壞、摔壞。一、培養(yǎng)皿如何滅菌1、加水:將高壓蒸汽滅菌鍋的內層鍋取出,再往外層鍋中加入適量的水,比較好水位是使水的平面與鍋內三角擱架相平。2、裝鍋:放回內層鍋,并將培養(yǎng)皿放入鍋內。3、加蓋:將鍋蓋上用于排氣的軟管插入到內層鍋的排氣槽中。再以兩兩相對的方式同時
化學分析檢驗造成誤差的原因以及處理方法2023/02/28
在化學檢驗中,往往存在各種誤差,為了精密而準確地進行化學分析,必須有效地消除或減少多樣的誤差。一、系統(tǒng)誤差又叫可測誤差,是由測量過程中的某些經(jīng)常原因造成的。是要分析條件不變,重復測量時它會重復表現(xiàn)出來,其大小、符號都不變,對測量的結果影響較為固定。1、儀器誤差是由儀器本身不夠準確而精密或未經(jīng)校準所引起的。如天平?jīng)]校正,砝碼沒校正,儀器受摩擦產(chǎn)生靜電干擾,容量瓶、滴定管和移液管、量杯等刻度不夠準確等。如在滴定分析中,滴定管讀數(shù)誤差為±0.01ml,為了使測量時的相對誤差小于0.01%,消耗滴定劑的
搞定蛋白表達,只需弄清這幾點!2023/02/24
蛋白表達問題一直備受關注,如何實現(xiàn)蛋白高效表達這個老生常談的話題,今天遠慕來探討一下。影響蛋白表達的因素主要有:1.載體構建錯誤這個是很多克隆新人常犯的錯誤,在克隆時弄錯讀碼框,從而導致蛋白不表達。蛋白表達載體構建正確是蛋白表達實驗的基礎,構建載體時要考慮啟動子、多克隆位點、終止子、融合標簽、復制子等多種因素。2.宿主菌選擇不當不同宿主菌的基因型不同,選擇合適的宿主菌對某些特殊的載體進行蛋白表達至關重要。有時表達重組的毒素蛋白,對宿主細胞也有毒性,會造成質粒丟失。3.GC含量不同物種間基因組的G
細胞凍存指南,這些關鍵點必看!2023/02/24
細胞凍存是細胞實驗中的一個常規(guī)步驟,是細胞保存的重要方法之一。將細胞低溫保存在-196℃液氮中,使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而進入休眠階段,以便日后復蘇重新培養(yǎng)擴增。保姆級細胞凍存方法:看似簡單的實驗,仍有一些關鍵點需要格外留意,切莫踩到“雷區(qū)”,造成“實驗大翻車”。凍存操作前:選擇長勢良好、存活率高,且生長密度在80%—90%的細胞進行凍存。需對細胞進行雜質檢測:是否有雜細胞或者支原體等雜質。這里推薦使用遠慕生物MB支原體常規(guī)法PCR檢測試劑盒,非定量檢測,常規(guī)PCR即可滿足需求,方便快捷,靈敏度高
遠慕簡述細胞凍存史,了解細胞凍存那些事兒2023/02/24
我們的身體是一個巨大的精密儀器,每一個器官都是其中重要的組成零件,細胞就是其中最基本也最重要的元件。如同機器需要定期維修.更換,人體也有自我修復機制,但每一次細胞的自我修復與更新,除了端粒酶保護能力下降外,基因突變的發(fā)生也不可避免,而此現(xiàn)象是會隨著年齡的增長而不斷在身體里累積,細胞的自我再生能力亦會隨著年齡的增加而衰退。如今很多人都為自己的健康做好了長遠規(guī)劃,選擇新型的個人健康管理方式——凍存免疫細胞。但是也有很多疑問:細胞凍存可以凍存多長時間?細胞復蘇后活性如何?什么時候凍存細胞的質量zui高
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