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細胞凍存液的配方你知道嗎2022/06/06

伴隨著科技進步持續(xù)的發(fā)展趨勢，醫(yī)學技術也在持續(xù)提高。前兩年冷凍人的惡性事件讓眼前一亮，原先不僅是食材能夠冷藏儲存，就連身體也可以冷藏儲存。假如要想做到那樣的目地，那麼就需要體細胞冷凍液，這類東西如何配備呢?下邊就來實際的了解一下，細胞凍存液的秘方是啥？細胞凍存液的配方是什么？(一)細胞凍存1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細胞培養(yǎng)液;2.取對數(shù)成長期的體細胞，除去舊細胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長發(fā)育的體細胞消化吸

重點分析：實驗試劑應用的常見問題2022/06/02

1.測定范圍每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結果若超過此范圍，分析儀將顯示結果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì)，應更換合格試劑。2.底物耗盡使用連續(xù)監(jiān)測法、兩點法測定酶活性時，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍，監(jiān)測期的吸光度將偏離線性，使測定結果不可靠。3.試劑空白每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì)。而試劑空白吸光度限值，常作為程序參數(shù)輸入儀器，如經(jīng)核查超限，儀器會自動報警，提示更換試劑。需要指出的是，

使用分光光度計測定蔗糖含量2022/06/02

使用分光光度計測定蔗糖含量酶是非常有用的助手，憑借其*的專一性和重現(xiàn)性能夠檢測到所需的分子。正是因為有此特性，他們可制作成檢測試劑盒，用來檢測果汁、紅酒、啤酒、雞蛋和肉類等各類食品的各種底物如糖和其它碳水化合物、酸和醇等。酶試劑盒受歡迎還因為它有如下優(yōu)點：首先，和其它測試方法比起來它的樣品制備快速且簡單。其次，每次測試的成本非常低測試不需要任何危險試劑。酶試劑盒的原理是基于輔酶系統(tǒng)煙/酰胺-腺嘌呤二核苷酸（NAD/NADH）的顏色變化進行檢測–還原態(tài)(NADH)在340nm有光譜吸收。我們通過檢

遠慕教你如何合理存放化學試劑2022/06/02

要進行任何實驗都離不了試劑，試劑不僅有各種狀態(tài)，而且不同的試劑其性能差異很大。有的常溫非常安定、有的通常就很活潑，有的受高溫也不變質(zhì)、有的卻易燃易爆，有的香氣濃烈，有的則劇毒……。如果不能合理的存放實驗室化學試劑，不僅使實驗室人員工作起來增添了很多繁瑣的程序，在一定程度上也造成了對實驗室環(huán)境的污染，從而影響實驗人員的身心健康。只有合理的存放實驗室化學試劑，才能安全、順利進行各項實驗。既可保證達到預期實驗目的，又可消除對環(huán)境的污染。合理的存放試劑，能夠有效的減少揮發(fā)性氣體，去除實驗室內(nèi)彌散的揮發(fā)性

實驗室溶液、溶劑的有效期到底是多少？2022/06/02

化學試劑不像食品和藥品有著嚴格的保質(zhì)期，化學試劑一般沒有保質(zhì)期的具體要求和界限，這化學試劑的保質(zhì)期受到多方面因素影響有關；要根據(jù)化學性質(zhì)、保存條件等，在結合工作的實際情況判斷試劑是否出現(xiàn)變質(zhì)、能否繼續(xù)使用。不同化學溶液使用期限的不同：1.磷酸鹽標準緩沖液3個月2.標準緩沖液3個月3.醋酸鹽緩沖液3個月4.磷酸鹽緩沖液3個月5.醋酸--醋酸銨緩沖液3個月6.磷酸鹽緩沖液3個月7.草酸氰鉀緩沖液3個月8.氫氧化鈉試液6個月9.碘試液6個月10.硝/酸銀試液6個月11.硝/酸汞試液本液應置棕色瓶內(nèi)，密

你了解生物大分子的類型嗎?2022/06/01

什么是生物大分子（biomacromolecules）？有的教科書認為生物大分子包括核酸、蛋白質(zhì)、糖類和脂質(zhì)等4類物質(zhì)，而有的教科書上只提到核酸、蛋白質(zhì)和糖類等3類物質(zhì)。那么究竟如何界定生物大分子的涵義呢？大分子（Macromolecule）這一術語最先是由德國化學家、諾貝爾獎獲得HermannStaudinger在1920年首先提出的，專指超過1000個原子組成的化合物稱為大分子。不同的學科中，對大分子的理解也存在差異，根據(jù)國際理論與應用化學聯(lián)合會(InternationalUnionofPu

遠慕實驗：細胞制備流程及轉化方法2022/06/01

細胞制備流程及轉化方法1.轉移0.2-1ml培養(yǎng)物至裝有500mlLB(或其他營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基)的1-2升搖瓶2.37°C下劇烈振蕩培養(yǎng)2-6小時3.定時監(jiān)控OD600值(培養(yǎng)1小時后每半小時測定一次)4。當OD600值達到0.5-1.0時，從搖床中取出搖瓶，置于冰上冷卻至少15分鐘(需要的話這種方式可以存放培養(yǎng)液數(shù)小時)5.細胞在4°C5000g下離心15分鐘，棄上清液(如需要，沉淀可在4°C的10%甘油中保存一兩天)6.用滅菌的冰水重懸浮細胞。先用渦旋儀或吸液管重懸浮細胞于少量體積中(幾毫升

新生牛血清蛋白檢測指標有哪些？2022/06/01

新生牛血清(NewbornCalfSerum)是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。經(jīng)大規(guī)?；旌虾蟪^濾制成成品，主要用于動物細胞培養(yǎng)，是醫(yī)藥生物技術產(chǎn)品的重要原材料之一，其質(zhì)量好壞直接影響細胞生長情況?？偟鞍缀渴切律Ｑ逍枰獧z查的指標。它屬于化學成分的初步分析。有人統(tǒng)計過國產(chǎn)新生牛血清的蛋白含量1，在比較各產(chǎn)區(qū)各年份后，發(fā)現(xiàn)其含量在3.7%~4.4%之間。進口新生牛血清并不與之*一致。因為國內(nèi)的血清常采自奶牛，而國外的血清常采自肉牛。蛋白質(zhì)是新生牛血清的主要成分，在細胞培養(yǎng)中起著維

分子生物學技術都包括這些技術！2022/06/01

分子生物學技術都包括這些技術：PCR、分子克隆、核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳測序、DNA，RNA提取、轉化外源DNA、體外轉錄、逆轉錄、cDNA文庫構建、原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交、藍白斑篩選、抗生素篩選基因工程技術大部分都是依據(jù)分子生物學原理設計出來的。分子生物學的基本含義分子生物學是從分子水平研究生命本質(zhì)為目的的一門新興邊緣學科，它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結構及其在遺傳信息和細胞信息傳遞中的作用為研究對象，是當前生命科學中發(fā)展最快并正在與其它學科廣泛交叉與滲透的重要前沿領域。分

細菌對于蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗2022/05/31

細菌對于蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝原理為：不同種類的細菌分解蛋白質(zhì)的能力不同。細菌對蛋白質(zhì)的分解，一般先由胞外酶將復雜的蛋白質(zhì)分解為短肽（或氨基酸），滲入菌體內(nèi)，然后再由胞內(nèi)酶將肽類分解為氨基酸。具體試驗方法有：①明膠液化試驗；②吲哚試驗（靛基質(zhì)試驗）；③硫化氫試驗；④尿素酶試驗；⑤苯丙/氨酸脫氨酶試驗；⑥氨基酸脫羧酶試驗。1.明膠液化試驗（1）原理：某些細菌可產(chǎn)生一種胞外酶-明膠酶，能使明膠分解為氨基酸，從而失去凝固力，半固體的明膠培養(yǎng)基成為流動的液體。（2）方法：將被檢菌穿刺接種于明膠培養(yǎng)基，于2

20種標準氨基酸（Standard amino acids）簡介2022/05/31

標準氨基酸（英語：Standardaminoacids）或稱蛋白氨基酸（proteinogenicaminoacids），是生物細胞中用來合成蛋白質(zhì)的共20種抗原肽氨基酸。下表中顯示抗原肽各中文名稱與英文名稱、三字母符號與單字母符號。除了以下標示之外，有一些符號可用來表示未明確定義的縮寫，例如：Asx與B可同時代表天冬氨酸（Asp、D）或天冬酰胺（Asn、N）。Glx與Z可同時代表谷氨/酸（Glu、E）或谷氨/酰胺（Gln、Q）。Xle與J可同時代表亮氨/酸（Leu、L）或異亮氨/酸（Ile、I

為什么要用磷酸鹽校正pH計？2022/05/31

一、酸度計的一點校準任何一種pH計都必須經(jīng)過pH標準溶液的校準后才可測量樣品的pH值，對于測量精度在0.lpH以下的樣品，可以采用一點極準方法調(diào)整儀器，一般選用pH6.86或pH7.00標準緩沖液。有些儀器本身精度只有0.2pH或0.lpH，因此儀器只設有一個¨定位¨調(diào)節(jié)旋鈕。具體操作步驟如下：(1)測量標準緩沖液溫度，查表確定該溫度下的pHs值，將溫度補償旋鈕調(diào)節(jié)到該溫度下。(2)用純水沖洗電極并甩干。(3)將電極浸入緩沖溶液晃動后靜止放置，待讀數(shù)穩(wěn)定后，調(diào)節(jié)定位旋鈕使儀器顯示該標準溶液的pH

淺談各種血液樣品的保存方法和保存期2022/05/31

1、全血儲存溫度：2℃～6℃。保存期：含ACD-B、CPD血液保存液的全血保存期為21d；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液保存液的全血保存期35d。使用其他血液保存液時，按其說明書規(guī)定的保存期執(zhí)行。2、去白細胞全血儲存溫度：2℃～6℃。保存期：同1去白細胞全血應在血液采集后48h內(nèi)去除白細胞。3、濃縮紅細胞儲存溫度：2℃～6℃。存期：同14、去白細胞濃縮紅細胞儲存溫度：2℃～6℃。保存期：同15、懸浮紅細胞儲存溫度：2℃～6℃。保存期：紅細胞保存液為ACD-B、CPD的懸浮紅細胞保存期為21d。紅

ELISA載體的形狀主要有三種2022/05/30

固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器，不參與化學反應。可作ELISA中載體的材料很多，*常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能，抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性，加之它的價格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料，可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板最為常用，專用于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板，上標準的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標本的檢測，有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的，放入座架后，大小與

TLC顯色試劑及配方大全2022/05/30

顯色劑可以分成兩大類：一類是檢查一般有機化合物的通用顯色劑；另一類是根據(jù)化合物分類或特殊官能團設計的專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多，本文只能列舉一些常用的顯色劑。l．通用顯色劑①硫酸常用的有四種溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液與0.5-1.5mol／L硫酸銨溶液，噴后110oC烤15min，不同有機化合物顯不同顏色。②0.5％碘的氯仿溶液對很多化合物顯黃棕色。③中性0.05％高錳/酸鉀溶液易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。④堿性高錳/酸鉀試劑還

滴定液配制時有哪些注意事項2022/05/30

一、滴定液的配制注意事項1.所用溶劑“水”，系指蒸餾水或去離子水，在未注明有其他要求時，應符合中國藥典“純化水”項下的規(guī)定；2.采用間接配制法時，溶質(zhì)與溶劑的取用量均應根據(jù)規(guī)定量進行稱取或量取，并使制成后滴定液的濃度值應為其名義值的0.95～1.05；3.采用直接配制法時，其溶質(zhì)應采用“基準試劑”，并按規(guī)定條件干燥至恒重后稱取，取用量應精確至4～5位有效數(shù)字的精密稱定，并置1000mL量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻；4.配制濃度等于或低于0.02mol/L的滴定液時，除另有規(guī)定外，應于臨用

分析工作試劑的提純方法2022/05/30

在分析工作中遇到所用試劑純度和雜質(zhì)含量達不到要求時,要采取對試劑進行提純,尤其是用量較多的試劑如各種酸的提純。本節(jié)只介紹蒸餾法提純。①鹽酸的提純用硬質(zhì)玻璃或石英蒸餾器,用高純水(電阻率〉3MΩ?cm)將優(yōu)級純鹽酸(或分析純)按鹽酸:水=1:1的比例將1.5L放入2L蒸餾器中,用可調(diào)變壓器調(diào)節(jié)加熱,流速200mL/h,棄去前段150mL左右餾出液,取中段餾出液1L,蒸餾出鹽酸的濃度為6mol/L,雜質(zhì)含量很低,能滿足微量分析的要求,如需要更高純度,可進行二次蒸餾。如果鹽酸中碑雜質(zhì)含量高,可以在蒸餾

細胞周期流式檢測步驟詳解2022/05/27

材料與試劑：PBS乙醇，70-80%,提前放置-20°C預冷固定劑BDPharmingen™stainbuffer,orequivalent,1XPBS,2%FBS,0.1%NaN3(pH7.1–7.4)染色液BDPharmingen™PI/RNasestainingbuffer(forPI/Rnasestaining)PI/RNase染色液BDPharmingen™7-AAD(7-Amino-ActinomycinD)stainingsolution(for7-AADstaining)7-AA

什么是PBS緩沖液？遠慕淺談一下PBS緩沖液！2022/05/27

PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na?HPO?、KH?PO?、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。由于Na?HPO?和KH?PO?它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣；而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1mmol/LCaCl?和0.5mmol/LMgCl?，以提供雙價陽離子。pbs緩沖液的配制方法含0.05%吐溫－20的pH7

PBS的清洗方式選擇、次數(shù)和時間的選擇2022/05/27

（1）單獨沖洗，防止交叉反應造成污染。臨床上每天檢測的病例很多，所用的抗體種類及項目也多，如果在加入一抗孵育完后，將它們在一個缸內(nèi)洗，這樣就會造成交叉污染，影響最后的結果。正確的做法是單獨地進行沖洗，沖洗的PBS為一次性，保證切片沒有相互交叉污染的機會。（2）溫柔沖洗，防止切片的脫落。沖洗切片，取出切片，將PBS從上輕輕地沖洗，讓PBS自上而下流下來，不要拿起切片將PBS對準切片沖洗，這樣由于沖出的PBS有一定的沖擊力，很容易使切片周邊引起松動，導致切片的脫落。（3）沖洗的時間要足夠，才能*洗去