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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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遠(yuǎn)慕生物淺談樣品提取溶劑解析2022/05/20
大多數(shù)化學(xué)農(nóng)藥物理和化學(xué)性質(zhì)接近,相對(duì)分子質(zhì)量大多在150~450之間,常用農(nóng)藥具有C1、P、N等功能元素。含有這些元素的溶劑使用時(shí)應(yīng)特別注意,有些必須在儀器測(cè)定進(jìn)樣前去除。目前常用的提取溶劑主要有丙酮、乙腈、乙酸乙酯、石油醚或正己烷、甲醇和二氯甲烷等。為了適應(yīng)大量檢測(cè)樣品的挑戰(zhàn),近40多年來各國(guó)開發(fā)了多種農(nóng)藥多殘留分析方法,其目的就是在一次分析中能夠同時(shí)測(cè)定多種農(nóng)藥。如果不使用多殘留方法,殘留分析工作者要面臨數(shù)百種單個(gè)農(nóng)藥的殘留分析,而且有些方法還很相似。目前國(guó)內(nèi)外已經(jīng)開發(fā)出多種可以測(cè)定數(shù)百種
掃描電鏡的微生物樣品制備方法2022/05/20
微生物樣品的掃描電鏡觀察廣泛地應(yīng)用于微生物學(xué)研究的各領(lǐng)域。為微生物資源的利用,微生物生物技術(shù)、遺傳工程、環(huán)境保護(hù)等提供了大量直觀的,有科研價(jià)值的形態(tài)學(xué)依據(jù)。大多數(shù)微生物樣品體積微小,使樣品制備,尤其是臨界點(diǎn)干燥,離子濺射等難于操作。積多年微生物制樣的經(jīng)驗(yàn),遠(yuǎn)慕為大家介紹微生物中有代表性的細(xì)菌,霉菌的制樣技術(shù),其他微生物樣品均可參照處理。1、細(xì)菌取液體或固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)20h左右、旺盛生長(zhǎng)的菌體。(1)收集菌體:?液體培養(yǎng)基中的菌體,可取培養(yǎng)液8000rpm離心3~5min,棄上清,倒入215%戊
試劑瓶的使用方法和注意事項(xiàng)2022/05/19
通常有白色和棕色:棕色試劑瓶用于盛裝容易被光分離的試劑或溶液,如碘溶液、硝/酸銀、高錳/酸鉀、碘/化鉀等。試劑瓶有兩種,磨口和非磨口:一般來說,非研磨性試劑瓶用于盛裝堿液或濃鹽溶液等。橡膠塞或軟木塞用于防止試劑結(jié)晶或溶解玻璃,導(dǎo)致塞子和瓶口粘結(jié)在一起,不易打開。研磨瓶含有酸、非強(qiáng)堿性試劑或有機(jī)試劑溶液等。對(duì)玻璃的侵蝕較小。使用時(shí),原瓶應(yīng)裝上原瓶塞,瓶與瓶塞的數(shù)量應(yīng)一致,便于密封,以免溶液蒸發(fā),改變濃度。當(dāng)試劑玻璃瓶不使用時(shí),應(yīng)將其清洗干凈,并在瓶口和塞子之間襯一張紙,以防止它們?cè)陂L(zhǎng)期使用后粘在一
實(shí)驗(yàn)室常用有機(jī)試劑的回收利用2022/05/19
在環(huán)境監(jiān)測(cè)和實(shí)驗(yàn)室分析測(cè)定時(shí),常常使用三氯/甲烷、四氯化碳和石油醚等有機(jī)溶劑。這些試劑化學(xué)性質(zhì)不活潑、不助燃,與酸、堿不起作用,處理起來比較困難。其易揮發(fā),具有一定的毒性,污染環(huán)境。本文根據(jù)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)及使用試劑的要求,探討有機(jī)試劑的回收和循環(huán)利用。一、回收方法:1.活性碳吸附法活性碳吸附法回收有機(jī)廢液裝置,在長(zhǎng)吸附柱底部裝入一層脫脂棉,起過濾作用,防止活性/碳粉末隨廢液流入回收瓶中,同時(shí)可以進(jìn)一步除去廢液中剩余的水分;在吸附柱中部裝入顆粒狀活性碳(粉末狀活性碳過濾性能差,易堵塞吸附柱),除去廢液
核酸鑒定方法之濃度/純度及完整性鑒定2022/05/19
核酸純化在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)廣泛應(yīng)用。怎樣獲得高質(zhì)量、高純度的DNA或RNA樣品對(duì)下游實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行至關(guān)重要,因此,對(duì)純化后的核酸進(jìn)行鑒定也是必不/可少的步驟。本文簡(jiǎn)單的回顧學(xué)習(xí)一下核酸鑒定的方法。核酸鑒定包括:濃度/純度鑒定+完整性鑒定1.濃度/純度鑒定(1)紫外分光光度計(jì):原理:由于核酸中的堿基都具有共軛雙鍵,所以具有紫外光吸收性質(zhì)。核酸在紫外光譜區(qū)有一條典型的吸收曲線,其吸收高峰在260nm處,吸收低谷在230nm處。蛋白質(zhì)在紫外區(qū)的吸收高峰在280nm處,所以核酸的紫外吸收光譜數(shù)據(jù)是鑒
遠(yuǎn)慕淺談分析試劑的常用規(guī)格2022/05/19
優(yōu)級(jí)純或一級(jí)品(GR,精密分析和科學(xué)研究工作);分析純或二級(jí)品(AR,重要分析和一般研究工作);化學(xué)純或三級(jí)品(CP,工礦及學(xué)校一般化學(xué)實(shí)驗(yàn));實(shí)驗(yàn)試劑(L.P.)。基準(zhǔn)試劑含量應(yīng)該是99.9%~100.2%。隨著科學(xué)技術(shù)和新興工業(yè)的發(fā)展,對(duì)化學(xué)試劑的純度、凈度以及精密度要求愈加嚴(yán)格和專門化。在分析化學(xué)中應(yīng)用極為廣泛。試劑的品級(jí)與規(guī)格應(yīng)根據(jù)具體要求和使用情況加以選擇。定級(jí)的根據(jù)是試劑的純度(即含量)、雜質(zhì)含量、提純的難易,以及各項(xiàng)物理性質(zhì)。有時(shí)也根據(jù)用途來定級(jí),例如光譜純?cè)噭?、色譜純?cè)噭约皃
幾種常見的細(xì)胞因子抑制劑了解一下2022/05/18
1、抗細(xì)胞因子或其受體的抗體在正常人身上可以檢測(cè)到微量的抗細(xì)胞因子抗體。這些抗體的功能還有待進(jìn)一步探索。其中有些抗體可以起到抑制細(xì)胞因子的作用,有些抗體則可以延長(zhǎng)細(xì)胞因子的半衰期。用細(xì)胞因子或其受體作為免疫原對(duì)動(dòng)物進(jìn)行免疫而獲得的抗體,特別是某些單克隆抗體對(duì)細(xì)胞因子有很強(qiáng)的抑制作用,可用于治療由細(xì)胞因子引起的疾病。目前,一些抗細(xì)胞因子單克隆抗體已進(jìn)入人體試驗(yàn)階段,如治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的抗人IL-6單克隆抗體、治療急性移植物抗宿主反應(yīng)的抗人IL-2受體抗體或抗TNF抗體、治療多發(fā)性骨髓瘤的抗人IL-
遠(yuǎn)慕淺談細(xì)胞因子常見指標(biāo)2022/05/18
(一)根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞種類不同分類1.淋巴因子(lymphokine)于命名,主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生,包括T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等。重要的淋巴因子有IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IFN-γ、TNF-β、GM-CSF和神經(jīng)白細(xì)胞素等。2.單核因子(monokine)主要由單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、G-CSF和M-CSF等。3.非淋巴細(xì)胞、非單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子
peprotech細(xì)胞因子的溶解方法2022/05/18
PeproTech細(xì)胞因子中不含載體蛋白(CarrierProtein)或其他添加劑(如BSA、HAS或蔗糖等),并且通常以最少量的鹽來進(jìn)行凍干處理,因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會(huì)沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后,務(wù)必在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底(此時(shí)能否見到白色沉淀均屬正?,F(xiàn)象)。1.離心:高速離心(10,000rpm)20-30秒,或低速離心(2,000rpm)5分鐘。2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據(jù)
流式CBA法用于細(xì)胞因子檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)及缺點(diǎn)2022/05/18
細(xì)胞因子在體內(nèi)具有重要的病理作用,在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態(tài)下,部分細(xì)胞因子會(huì)明顯變化,根據(jù)這些指標(biāo)可以判斷機(jī)體的免疫功能。血清、血漿或組織液中細(xì)胞因子檢測(cè)可以對(duì)疾病診斷和治療做出相應(yīng)評(píng)價(jià),具有重要的應(yīng)用價(jià)值。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)以及腫瘤學(xué)等領(lǐng)域的流式細(xì)胞術(shù)是細(xì)胞因子檢測(cè)的一種方法。由于血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清、積液中的細(xì)胞因子含量低,不容易檢測(cè),加上樣本數(shù)量少,傳統(tǒng)的方法無法滿足多因子檢測(cè)。流式微球捕獲芯片技術(shù)(CBA)微量樣本多重蛋白定量技術(shù),是用流式細(xì)胞儀對(duì)多重蛋白進(jìn)行
細(xì)胞因子溶解操作方法及注意事項(xiàng)2022/05/17
1.離心:高速離心(10,000rpm)20-30秒,或低速離心(2,000rpm)5分鐘。2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據(jù)說明書要求進(jìn)行選擇)溶解至說明書要求的濃度(一般為0.1-1.0mg/mL,如10ug的產(chǎn)品,需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。溶解時(shí)不可振蕩,避免因化學(xué)鍵的斷裂造成蛋白失活,可加入適當(dāng)?shù)娜軇┹p搖并靜置一段時(shí)間,待細(xì)胞因子*溶解后使用。溶劑的選擇:1)要求用去離子水溶解的產(chǎn)品,務(wù)必不可用鹽溶液,避免過高的鹽濃度造成蛋白不
TRIZOL提取RNA的詳細(xì)步驟2022/05/17
1、在提取組織RNA時(shí),每50~100mg組織用1mlTrizol試劑對(duì)組織進(jìn)行裂解;提取細(xì)胞RNA時(shí),先離心沉淀細(xì)胞,每5-10╳106個(gè)細(xì)胞加1mlTrizol后,反復(fù)用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細(xì)胞。2、將組織或細(xì)胞的Trizol裂解液轉(zhuǎn)入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘;在EP管中,按照每1mlTRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,蓋上EP管蓋子,在手中用力震蕩15秒,在室溫下(15℃~30℃)放置2~3分鐘后,12000g(2℃~8℃)離心15分鐘。3、取上層水相置于新EP管中
如何選擇牛血清白蛋白種類?2022/05/17
牛血清白蛋白(BSA)產(chǎn)品種類繁多,可滿足不同種的應(yīng)用。但是該怎么選擇呢,目前BSA大致分為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)BSA、BSA第五組分、無IgG試劑級(jí)BSA、無蛋白酶BSA、無脂肪酸BSA、低內(nèi)毒素BSA、無蛋白酶/IgGBSA、診斷級(jí)BSA。我們一起來看一下他們的區(qū)別:標(biāo)準(zhǔn)級(jí)BSA經(jīng)熱處理的普通BSA產(chǎn)品,可作為組織細(xì)胞(微生物、動(dòng)物及昆蟲細(xì)胞等)培養(yǎng)養(yǎng)料和培養(yǎng)成分以及蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)組份,為性價(jià)比較高的BSA產(chǎn)品,BSA第五組分BSA第五組分較普通的BSA純度更高。BSA第五組分使用Cohn方法純化而來,是
牛血清白蛋白的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)!2022/05/17
牛血清白蛋白,稱牛血清蛋白,又稱第五組分,英文名稱為BovineSerumAlbumin,也稱Bovinealbumin,或CohnFractionV,簡(jiǎn)稱BSA。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性。狀態(tài):白色結(jié)晶或類白色冷凍干燥粉末;溶解性:溶于水,難
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液標(biāo)本的選擇及處理2022/05/16
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液標(biāo)本的處理-----系列一血液標(biāo)本的選擇一般血液標(biāo)本分為全血、血漿和血清。1、全血全血一般加入適當(dāng)?shù)目鼓齽?,使血液不產(chǎn)生凝固含有形成分的標(biāo)本,常用于碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白、硫血紅蛋白、細(xì)胞培養(yǎng)等的測(cè)定,及制備血中各種細(xì)胞和全血分析用。2、血漿血漿是全血去除細(xì)胞成分后剩余部分的標(biāo)本,比血清分離快且量多。多用于血液凝固機(jī)制等方面的檢驗(yàn)。3、血清血清是血漿除去凝血因子纖維蛋白原的標(biāo)本。血液離體后由于激活一系列凝血因子,最終形成纖維蛋白而使血液凝固,析出的澄清黃色透明液體就是血清。血清成
ELISA檢測(cè)血清的詳細(xì)事項(xiàng)2022/05/16
大部分elisa檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)添加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)生假陽性反應(yīng)。一般說來,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃。超越一周測(cè)定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡?;鞚峄蛴谐练e的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,弄清后再檢測(cè)。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌,所
ELISA實(shí)驗(yàn)怎么判斷結(jié)果的準(zhǔn)確性?2022/05/16
ELISA實(shí)驗(yàn)已經(jīng)做完,做出來的數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確,有沒有達(dá)到自己的預(yù)期,這些都是有很多條件決定的,具體有哪些條件呢,今天就讓遠(yuǎn)慕生物為您介紹!首先要選擇優(yōu)質(zhì)的試劑優(yōu)質(zhì)的試劑是良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述
血清或(血漿)標(biāo)本的處理方法2022/05/16
檢驗(yàn)科收到臨床標(biāo)本后,應(yīng)盡快低速離心分離血清或血漿進(jìn)行測(cè)定。45℃水浴10分鐘,再3000r/min離心5分鐘,即可使LDH、K等顯著升高。對(duì)血液標(biāo)本外觀觀察是判斷標(biāo)本質(zhì)量的最直觀的方法,外觀異常有溶血、黃疸、脂血等情形,是引起測(cè)定誤差最常見的因素。(1)標(biāo)本的離心離心分離血清應(yīng)選擇相對(duì)離心力(RCF)為1000g~1200g,離心時(shí)間為5~10分鐘。增加相對(duì)離心力或增加離心時(shí)間,都易引起溶血。(2)溶血標(biāo)本的處理溶血可導(dǎo)致RBC內(nèi)多種成分的釋出,引起對(duì)測(cè)定方法的干擾,Hb≥0.2g/L,肉眼可
抗生素類藥物殘留介紹2022/05/13
1、β-內(nèi)酰胺類(β-lactams)內(nèi)酰胺類抗生素族包括了種類繁多的天然和半合成化合物,所有的這些物質(zhì)都含有基本的具抗生素活性的內(nèi)酰胺環(huán)。內(nèi)酰胺類抗生素(青/霉/素和頭孢/菌素類)主要是用于抗革蘭氏陽性細(xì)菌感染。然而,該類藥物中部分也能有效抑制革蘭氏陰性菌。至今已有9類β-內(nèi)酰胺類抗生素被認(rèn)可。盡管僅有少數(shù)的這類化合物被用來治療養(yǎng)殖動(dòng)物,然而,這就有可能以殘留物形式出現(xiàn)在食品中。青/霉/素G因其價(jià)廉和廣譜,盡管它僅對(duì)革蘭氏陽性菌有效,仍被廣泛地用于治療養(yǎng)殖動(dòng)物,并頻繁地超標(biāo)示劑量使用。在牛養(yǎng)殖
細(xì)胞培養(yǎng)中抗生素如何使用?2022/05/13
抗生素1.細(xì)胞庫(kù)之細(xì)胞培養(yǎng)基不加抗生素1.1.培養(yǎng)自ATCC引進(jìn)之細(xì)胞株,培養(yǎng)基中不加抗生素1.2.培養(yǎng)自其它實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)之細(xì)胞株,制作tokenfreeze前培養(yǎng)基須添加抗生素,待tokenfreeze通過污染測(cè)試后,大量培養(yǎng)時(shí)則不加抗生素。2.寄送活細(xì)胞時(shí),須將培養(yǎng)液充滿整個(gè)flask時(shí),則須添加抗生素(penicillin100units/ml+streptomycin100ug/ml)。3.若要檢測(cè)mycoplasma,則培養(yǎng)基內(nèi)不可添加gentamicin,因gentamicin會(huì)抑制m
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