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甘油激酶5抗體的制備過程2022/05/05
甘油激酶5抗體的制備過程:1.免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。4.
小鼠組織蛋白去乙?;福℉D)ELISA免費代測試劑盒操作步驟2022/04/28
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA免費代測試劑盒操作步驟:1.取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。2.分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。3.加樣:依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中加入50ul的待測樣本。4.加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入100ul的
旋毛蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒實驗過程2022/04/26
旋毛蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒實驗過程:一、試劑準備1.DNA模板2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)3.10×PCRBuffer4.2mMdNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM5.Taq酶二、操作步驟1.在冰浴中,按以下次序將
紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白ELISA試劑盒實驗通用規(guī)則2022/04/20
紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白ELISA試劑盒實驗通用規(guī)則:1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。5、實驗時,要使底物避光保存。6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有
小鼠雜交瘤細胞;EphA1細胞處理2022/04/13
小鼠雜交瘤細胞;EphA1細胞處理:1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2)加2ml消化液
倍贊氏金蠅探針法熒光定量PCR試劑盒操作流程2022/03/31
倍贊氏金蠅探針法熒光定量PCR試劑盒操作流程:1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充
磷酸化轉錄因子SOX9蛋白抗體?結構2022/03/24
磷酸化轉錄因子SOX9蛋白抗體結構:抗體是具有4條多肽鏈的對稱結構,其中2條較長、相對分子量較大的相同的重鏈(H鏈);2條較短、相對分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結形成一個由4條多肽鏈構成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列??勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內有一小部分氨基酸殘基變化特別強烈,這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異
保加利亞乳桿菌菌種保藏方法2022/03/22
保加利亞乳桿菌菌種保藏方法:1.傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。3.載體保藏法是將微生物吸附在適當?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。4.寄主保藏法用于目前尚不
黃魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒通用原則2022/03/17
黃魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒通用原則:1,先選擇好探針,然后設計引物使其盡可能的靠近于探針。2,擴增子的長度應不超過400bp,理想的*能在100-150bp內,擴增片斷約短,有效的擴增反應就越容易獲得。較短的擴增片斷也容易保證分析的一致性3,保持GC含量在20%和80%之間,GC富含區(qū)容易產生非特異反應,從而會導致擴增效率的降低,及在SG分析中非特異信號。4,為了保證效率和重復性,應避免重復的核苷酸序列,尤其是G(不能有4個連續(xù)的G)5,將引物和探針互相進行配對檢測,以避免二聚體和發(fā)
閃爍交替單胞菌作步驟概念2022/03/14
閃爍交替單胞菌作步驟概念:一,菌種的概念原意是指孢子(相當于植物的種子),但在實際中,常將經(jīng)過人工培養(yǎng)的純菌絲體連同培養(yǎng)基質一同叫做菌種。二,菌種的類型在中根據(jù)菌種的來源,繁殖代數(shù)及目的,把菌種分為母種,原種和栽培種.分別叫一級種,二級種,三級種.母種:將純菌絲體或孢子在試管培養(yǎng)基中繁殖而成.可以繁殖原種,也適宜菌種保藏.原種:母種菌絲在固體培養(yǎng)基上繁殖而成.這一過程增強菌絲對培養(yǎng)環(huán)境的適應性,又起到擴繁的作用.原種可以直接出菇。低溫保存法:1.簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由
四角瑞氏絳蟲PCR試劑盒?使用方法2022/03/07
四角瑞氏絳蟲PCR試劑盒使用方法:注:四角瑞氏絳蟲PCR試劑盒功能所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。1.樣本處理(樣本處理區(qū))待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。2.擴增試劑準備(PCR前準備區(qū))取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMDRT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMDRT
大鼠糖原合成酶激酶ELISA檢測試劑盒?操作注意事項2022/03/03
大鼠糖原合成酶激酶ELISA檢測試劑盒操作注意事項:1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7)底物
小鼠血管/內皮成纖維抑制劑培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程2022/03/01
小鼠血管/內皮成纖維抑制劑培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。二.細胞處理:1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15
倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)elisa試劑盒?注意事項2022/02/24
倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)elisa試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(
人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)elisa試劑盒?操作步驟2022/02/22
人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)elisa試劑盒操作步驟:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板
小鼠解脲脲原體抗體免費代測ELISA實驗樣品收集、處理及保存2022/02/21
小鼠解脲脲原體抗體免費代測ELISA實驗樣品收集、處理及保存:1.細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。2.細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。3.血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。4.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20分鐘后,以1
小鼠Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa檢測試劑盒?注意事項2022/02/17
小鼠Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa檢測試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品
HLA II類組織相容性抗原DQalpha1檢測試劑盒的保存技巧2022/02/15
HLAII類組織相容性抗原DQalpha1檢測試劑盒的保存技巧:對于abcam大部分抗體,比較適宜的保存方法是分裝后保存在-20℃or-80℃。1.對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20℃是*足夠了,沒有任何證據(jù)顯現(xiàn)保存在-80℃會有更多的優(yōu)點。2.分裝能夠程度的下降重復凍融對抗體活性的危害,同時也下降了由于屢次從同一管中汲取抗體形成的污染可能性。3.分裝的量以一次試驗用完為好,zui少不能少于10ul每份,由于分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸騰以及管壁吸附的影響4.復融后的分裝抗體如果一次用不
猴β淀粉樣蛋白1-42酶聯(lián)免疫試劑盒備試劑與收集血樣2022/02/10
Aβ1-42猴β淀粉樣蛋白1-42酶聯(lián)免疫試劑盒備試劑與收集血樣:1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成1200ng/ml的溶液。設標準管8管,管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在管中加入1200ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對
貝類碳酸酐酶ELISA檢測試劑盒操作步驟2022/02/08
貝類碳酸酐酶ELISA檢測試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第
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