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2024
10-12

愛必信全景多標(biāo)記組織微環(huán)境染色分析
精準(zhǔn)成像，全面分析，深入探索細(xì)胞的微觀世界腫瘤區(qū)域周圍微環(huán)境免疫細(xì)胞距離分布實(shí)驗(yàn)原理：在石蠟包埋的甲狀腺癌組織切片上對(duì)切片進(jìn)行TSA酪胺信號(hào)方法技術(shù)，采用HRP標(biāo)記的二抗，HRP催化加入體系的熒光素底物，生成活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪氨酸共價(jià)結(jié)合，使樣品上穩(wěn)定地共價(jià)結(jié)合熒光素。之后用熱修復(fù)洗去非共價(jià)結(jié)合的抗體，避免交叉反應(yīng)，如此往復(fù)實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒鈽?biāo)記。gao端服務(wù)：使用Absin多重TSA染色技術(shù)同時(shí)標(biāo)記6-9種生物標(biāo)志物后，使用TissueFAXSSpectra系統(tǒng)進(jìn)行連續(xù)全光譜高倍率
2024
10-11

免疫衛(wèi)士-T細(xì)胞培養(yǎng)攻略
T細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的衛(wèi)士，肩負(fù)著適應(yīng)性免疫的重?fù)?dān)，在細(xì)胞免疫和體液免疫都有著關(guān)鍵性的作用。不僅如此，基于T細(xì)胞的三大免疫療法：CAR-T、TCRT、TILs也在“遍地開花”。截止目前，F(xiàn)DA共批準(zhǔn)了6款CAR-T產(chǎn)品，中國也上市了5款CAR-T產(chǎn)品，全球共有11款CAR-T產(chǎn)品獲批！2024年2月16日，TIL療法-lifileucel（LN-144）獲批上市，用于治療晚期黑色素瘤，成為有望攻克實(shí)體瘤的又一把利劍。類器官與T細(xì)胞的共培養(yǎng)也是一大研究“爆點(diǎn)”：T細(xì)胞與腫瘤類器官共培養(yǎng)，可為優(yōu)化個(gè)性
2024
10-10

免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之質(zhì)量優(yōu)化
概述免疫細(xì)胞培養(yǎng)的六個(gè)基本流程：樣本制備、細(xì)胞分選、分型鑒定、擴(kuò)增&培養(yǎng)、質(zhì)量優(yōu)化、后續(xù)研究。小愛已經(jīng)給大家詳細(xì)介紹了《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之樣本制備（一）》、《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之細(xì)胞分選（二）》、《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定（三）》、《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之?dāng)U增&培養(yǎng)（四）》今天我們繼續(xù)一起學(xué)習(xí)質(zhì)量優(yōu)化的相關(guān)知識(shí)。質(zhì)量優(yōu)化(QualityOptimization)：針對(duì)一些不良因素，如樣本制備成單細(xì)胞懸液時(shí)產(chǎn)生的細(xì)胞團(tuán)塊、碎片等；細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)時(shí)支原體和內(nèi)毒素的影響，并積極采取對(duì)應(yīng)的措施。質(zhì)量優(yōu)化支原體
2024
10-09

細(xì)胞活性氧（ROS）檢測攻略
活性氧（ROS）是細(xì)胞代謝的副產(chǎn)物，包括超氧陰離子自由基、過氧化氫、羥基自由基等。它們?cè)诩?xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中起作用，但過量產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷，并與多種疾病有關(guān)。目前針對(duì)ROS的檢測方法包括熒光染色法、化學(xué)發(fā)光法、電子順磁共振技術(shù)（EPR/ESR）、電化學(xué)生物傳感器、色譜法、分光光度法和基于熒光蛋白的方法（表1）。表1常用ROS的檢測方法ROS檢測方法方法描述熒光染色法使用特定的熒光探針如DCFH-DA，可以檢測多種ROS，探針本身無熒光，進(jìn)入細(xì)胞后被酯酶水解生成DCFH，隨后被ROS氧化生成具有熒光的
2024
09-30

WB疑難雜癥——膜蛋白
什么是膜蛋白？膜蛋白是細(xì)胞膜的重要組成部分，負(fù)責(zé)許多關(guān)鍵的生物學(xué)功能如物質(zhì)運(yùn)輸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞間識(shí)別等，人類基因組中編碼的膜蛋白約占總蛋白質(zhì)組的25%左右。它們可以根據(jù)其與膜的結(jié)合方式和功能特點(diǎn)被分為不同的類別。以下是膜蛋白的一些主要類型和功能：1、膜蛋白分類外在膜蛋白：這些蛋白分布在細(xì)胞膜的內(nèi)外表面，約占膜蛋白的20%-30%，主要在內(nèi)表面。它們通過離子鍵、氫鍵與膜脂分子的極性頭部相結(jié)合，或通過與內(nèi)在蛋白的相互作用，間接與膜結(jié)合，大多是親水性蛋白，主要的類型有酶類、受體蛋白、細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白、
2024
09-29

抗體/蛋白標(biāo)記染料選擇指南及常見問題解答
在當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，精準(zhǔn)、高效地識(shí)別和追蹤目標(biāo)分子是解鎖疾病機(jī)制、開發(fā)新型藥物以及推動(dòng)個(gè)性化醫(yī)療的關(guān)鍵?？贵w/蛋白標(biāo)記技術(shù)作為一種強(qiáng)大的工具，在這一過程中發(fā)揮著不可替代的作用。通過將特定的化學(xué)標(biāo)簽（如熒光染料、酶或放射性同位素）與抗體或蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合，研究人員能夠以更高的靈敏度和特異性對(duì)復(fù)雜生物系統(tǒng)中的目標(biāo)分子進(jìn)行可視化和定量分析。常見抗體/蛋白標(biāo)記技術(shù)熒光素標(biāo)記：使用熒光素如AlexaFluor系列（AF488\AF594\AF647等）、Cy系列（Cy3\Cy5\Cy7等）、FITC等與
2024
09-27

答應(yīng)我，看完再做ELISA（下）
小伙伴們?cè)谏掀獙W(xué)習(xí)了ELISA實(shí)驗(yàn)的原理、類型，并且根據(jù)自己的需求選擇了適合自己的試劑盒，那接下來就是ELISA的實(shí)操了，包括哪些實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)呢？快來和小愛一探究竟吧！ELISA實(shí)驗(yàn)步驟圖1ELISA標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程1、樣本采集：a）血漿：采集血漿時(shí)可使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝血?jiǎng)?。采集?0min內(nèi)，1000xg離心15min。立即檢測或分裝后于≤-20℃儲(chǔ)存。避免反復(fù)凍融。b）細(xì)胞培養(yǎng)上清液：通過離心去除顆粒，立即檢測或分裝后將樣品于≤-20°C儲(chǔ)存。避免反復(fù)凍融。c）細(xì)胞裂解液
2024
09-26

答應(yīng)我，看完再做ELISA（上）
作為常見實(shí)驗(yàn)技能之一的ELISA已經(jīng)成功逼瘋了一大批研究生：加樣加到手抽筋，拍板拍到人發(fā)瘋。為此，小愛嘔心瀝血寫了一份ELISA實(shí)驗(yàn)詳解，原理、步驟、注意事項(xiàng)一網(wǎng)打盡，幫助各位小伙伴快速入門并精通ELISA（分為上下兩篇噢）。ELISA實(shí)驗(yàn)原理酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，簡稱ELISA)，是一種利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法，是免疫學(xué)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法。ELISA可適用多種樣本類型，主要包括血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清液、細(xì)胞
2024
09-25

細(xì)胞凋亡常見7種檢測方法大匯合
提到細(xì)胞凋亡，想必大家都不陌生，咱們這個(gè)領(lǐng)域的，先不說本科的時(shí)候?qū)W過，考研的時(shí)候怎么說它也是重要考點(diǎn)之一。或許此時(shí)您的腦袋瓜子里立馬浮現(xiàn)出課本上那個(gè)經(jīng)典的凋亡信號(hào)通路圖......額，還有點(diǎn)記不清......沒關(guān)系，今天小編帶您回顧一下經(jīng)典的細(xì)胞凋亡信號(hào)通路，再看看它常見的檢測方法。☆細(xì)胞凋亡1）細(xì)胞凋亡是一種細(xì)胞主動(dòng)有序的死亡，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等作用，它并不是病理?xiàng)l件下自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為了更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭取的一種死亡。2）細(xì)胞凋亡相關(guān)信號(hào)通路。凋亡信號(hào)通路
2024
09-24

一文了解TR-FRET技術(shù)
什么是TR-FRET？TR-FRET（Time-ResolvedFluorescenceResonanceEnergyTransfer，時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）是一種用于研究分子間相互作用的生物物理技術(shù)。它結(jié)合了兩種技術(shù)：熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)和時(shí)間分辨熒光(TRF，Time-ResolvedFluorescence)。熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理圖熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)是一種物理現(xiàn)象，其中一個(gè)熒光分子（供體）在吸收光能后，可以將激發(fā)能量非放射性地傳遞給另一個(gè)分子（受體），如果受體在空間上
2024
09-23

怎么才能分清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR“四胞胎”呢？
它們的概念分別是什么？PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR這四種技術(shù)都是基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的技術(shù)，但是它們之間存在一些區(qū)別。PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外擴(kuò)增DNA分子的技術(shù)，利用DNA聚合酶和多個(gè)引物在所需溫度下擴(kuò)增目標(biāo)DNA分子。PCR反應(yīng)分為三個(gè)階段：預(yù)變性、變性-退火-延伸和延伸。PCR技術(shù)主要用于DNA序列的擴(kuò)增和檢測，應(yīng)用廣泛，如基因克隆、DNA序列測定等。qPCR：實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qPCR）是一種實(shí)時(shí)檢測PCR過程中熒光信號(hào)變化的技術(shù)，可以定
2024
09-20

HRP酶標(biāo)二抗和熒光二抗有什么區(qū)別？分別在什么時(shí)候用？
在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，二抗的選擇至關(guān)重要。其中，HRP酶標(biāo)二抗和熒光二抗是兩種常見的二抗類型，它們各具特色，并在不同的實(shí)驗(yàn)場景下發(fā)揮著關(guān)鍵作用。一、HRP酶標(biāo)二抗1.定義及特性HRP酶標(biāo)二抗，即辣根過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)標(biāo)記的二抗，是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常規(guī)用的二抗。其特點(diǎn)包括比活性高、穩(wěn)定性好、分子量小、純酶容易制備等，因此在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。2.應(yīng)用場景HRP酶標(biāo)二抗常用于如免疫印跡(WB)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)以及免疫組織化學(xué)(IHC)等實(shí)驗(yàn)。在這些
2024
09-19

從零開始-細(xì)胞培養(yǎng)入門指南
細(xì)胞是生命的基本單位，是生物學(xué)研究中非常有用的工具。細(xì)胞培養(yǎng)的過程就是人工模擬細(xì)胞體內(nèi)生長環(huán)境，置于無菌、適宜溫度及酸堿度的環(huán)境中，保證充足的營養(yǎng)使其不斷生長繁殖，并維持其結(jié)構(gòu)和功能。作為基礎(chǔ)又常規(guī)的實(shí)驗(yàn)技能，自然頗受關(guān)注。后續(xù)會(huì)創(chuàng)建《常見細(xì)胞培養(yǎng)攻略》系列，會(huì)為大家介紹一些常見細(xì)胞的培養(yǎng)方案，包括但不限于T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、干細(xì)胞培養(yǎng)等。今天主要是細(xì)胞培養(yǎng)入門指南的相關(guān)內(nèi)容，其他的內(nèi)容大家可以持續(xù)關(guān)注追更。1.細(xì)胞類型1)原代細(xì)胞(primarycell)：是指從機(jī)體的組織經(jīng)蛋
2024
09-19

精準(zhǔn)成像，多色揭密：深度優(yōu)化mIHC染料搭配
在當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)技術(shù)正變得越來越重要。這項(xiàng)技術(shù)能夠在單一組織切片上同時(shí)檢測多種蛋白質(zhì)，為我們提供了一個(gè)強(qiáng)大的工具，以揭示細(xì)胞和組織內(nèi)部復(fù)雜的生物學(xué)信息。隨著多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的不斷發(fā)展，越來越多老師希望在自己的片子上看到更豐富的靶標(biāo)信息，意味著我們需要用到更多種熒光染料去完成染色，但由于熒光染料產(chǎn)生的信號(hào)不是單純的線性，而是呈現(xiàn)山峰狀的分布，在最高點(diǎn)信號(hào)固然最好，但在最高點(diǎn)左右的一段范圍內(nèi)都能夠捕獲到它的信號(hào)，那么相鄰的染料之間，難免會(huì)有信號(hào)的重疊，導(dǎo)致最后
2024
09-18

人正常皮膚類器官培養(yǎng)攻略
流程類器官原代培養(yǎng)流程準(zhǔn)備工作1、儀器設(shè)備CO2培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、臺(tái)式冷凍離心機(jī)、水浴鍋(abs72023)或水浴搖床，醫(yī)用冰箱、-80℃冰箱、移液器（一套）、眼科剪刀、眼科鑷。2、試劑耗材貨號(hào)品名規(guī)格儲(chǔ)存條件abs9932人正常皮膚類器官培養(yǎng)基100mL2-8℃，3個(gè)月abs9931類器官人正常皮膚原代組織消化液10mL-20℃，避免反復(fù)凍融，6個(gè)月；2-8℃,避光保存，6個(gè)月abs9751PBS-BSA潤洗液100mL-20℃，有效期12個(gè)月abs9731類器官原代培養(yǎng)緩沖
2024
09-14

HEK293細(xì)胞系培養(yǎng)攻略
HEK293細(xì)胞系家族歷史概覽1973年科學(xué)家從一個(gè)父母譜系不祥的人類流產(chǎn)胚胎的腎臟中分離出最原始的人胚腎細(xì)胞，即293細(xì)胞（humanembryonickidney(HEK)293cellline），該細(xì)胞被轉(zhuǎn)入修改后的5型腺病毒DNA片段，一開始轉(zhuǎn)化非常困難，一直到幾個(gè)月后，科學(xué)家得到一個(gè)穩(wěn)定的可以快速生長的293單克隆細(xì)胞株，自此HEK293誕生。HEK293細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)和生物技術(shù)中的應(yīng)用頻率僅次于第一個(gè)人類細(xì)胞系HeLa，并衍生出數(shù)百種克隆細(xì)胞系。SV40largeT抗原穩(wěn)轉(zhuǎn)入HEK
2024
09-13

細(xì)胞消化液：原理、配方與實(shí)驗(yàn)操作指南
細(xì)胞消化液是細(xì)胞培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵工具，其原理主要通過酶解作用破壞細(xì)胞間的連接，使細(xì)胞從組織或培養(yǎng)基質(zhì)上分離成單個(gè)細(xì)胞，以便進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。常用的細(xì)胞消化液包括胰蛋白酶、EDTA和膠原酶等，它們能夠特異性地水解細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)，包括細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、纖維連接蛋白等，從而改變細(xì)胞間的連接狀態(tài)。配方方面，細(xì)胞消化液的配制需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求精確稱取適量的酶粉，并加入適當(dāng)?shù)木彌_液（如D-Hanks液）中，調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍（通常為7.2-7.4），以確保酶的最佳活性。同時(shí)，還需注意無菌操作，避免細(xì)菌污
2024
09-13

免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之?dāng)U增&培養(yǎng)（四）
概述免疫細(xì)胞培養(yǎng)的六個(gè)基本流程：樣本制備、細(xì)胞分選、分型鑒定、擴(kuò)增&培養(yǎng)、質(zhì)量優(yōu)化、后續(xù)研究。小愛已經(jīng)給大家詳細(xì)介紹了《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之樣本制備（一）》和《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之細(xì)胞分選（二）》，《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定（三）》今天我們繼續(xù)一起學(xué)習(xí)擴(kuò)增&培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。從樣本制備到細(xì)胞分選、分型鑒定，我們終于獲得了純度高、活性好的目的細(xì)胞之后，便需要在體外人工模擬其在體內(nèi)的生長環(huán)境，同時(shí)保證無菌、適宜的溫度和pH，給予免疫細(xì)胞充足的營養(yǎng)使其不斷生長繁殖，這個(gè)過程便是擴(kuò)增&培養(yǎng)，主要可分為培養(yǎng)體
2024
09-11

細(xì)胞活性檢測 | 揭秘細(xì)胞活力的六大常用方法
在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中，細(xì)胞活性檢測扮演著至關(guān)重要的角色。它不僅幫助科學(xué)家們?cè)u(píng)估細(xì)胞的生存狀態(tài)，還能深入了解細(xì)胞對(duì)藥物、環(huán)境變化或病理過程的響應(yīng)。細(xì)胞活性檢測通常包括測量細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和細(xì)胞死亡等方面。今天，小愛向大家介紹細(xì)胞活性檢測的六大常用方法：ATP生物發(fā)光法、LDH檢測法、MTT比色法、CCK-8法、熒光染料法和細(xì)胞凋亡檢測法，一起揭秘細(xì)胞活力的科學(xué)奧秘。1、ATP生物發(fā)光法細(xì)胞內(nèi)ATP（腺苷三磷酸）的含量是細(xì)胞能量代謝的直接指標(biāo)。ATP生物發(fā)光法通過測量細(xì)胞內(nèi)ATP的水平來評(píng)估
2024
09-10

三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)TLS在癌癥中的應(yīng)用
TLS三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)作為現(xiàn)在很熱門的研究領(lǐng)域，小愛今天來解讀一篇發(fā)表在Science的綜述；三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)在癌癥的研究《Tertiarylymphoidstructuresincancer》這張圖片提供了一個(gè)關(guān)于三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)（TertiaryLymphoidStructures,TLS）在癌癥中的不同狀態(tài)的概覽。它從幾個(gè)關(guān)鍵方面對(duì)TLS進(jìn)行了分類和描述：1、位置(Localization)：-Peritumoral：指腫瘤周圍的TLS，它們位于腫瘤邊緣。-Intratumoral：指腫瘤內(nèi)部的TLS

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