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2019
08-14

細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況及應(yīng)注意的小細(xì)節(jié)
污染是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中面臨的主要問題，某些污染的發(fā)生往往難以察覺及檢測，而且污染源能長期共存于培養(yǎng)體系中。常見污染情況有：1.細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力是否足夠，尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象?？稍谂囵B(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理2.霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下
2019
08-13

物生樣本常用冷凍儲存技術(shù)
儲存溫度生物樣本的長期儲存通常使用盡可能低的溫度來降低樣本內(nèi)的生化反應(yīng)提高樣本內(nèi)各種成分的穩(wěn)定性。生物大分子、細(xì)胞、組織和器官的常用儲存溫度有-80℃(超低溫冰箱),-140℃(液氮?dú)庀嗷蛏罾浔?以及-196℃(液氮液相)，溫度越低樣本的穩(wěn)定保存時間越長。0～-60℃是水的結(jié)晶溫度，容易對細(xì)胞和組織的微觀結(jié)構(gòu)造成傷害，一般不使用這一溫度來保存組織和細(xì)胞。部分經(jīng)過提純的生物大分子可以在0～-60℃穩(wěn)定保存一定時間，但在組織樣本內(nèi)生物大分子受到細(xì)胞組織內(nèi)多種因素的影響，穩(wěn)定性有可能明顯降低，所以通
2019
08-05

對細(xì)胞培養(yǎng)中一種黑色運(yùn)動顆粒物的說明
在細(xì)胞培養(yǎng)中?？梢姷郊?xì)胞及培養(yǎng)液中有一些大小不等、形態(tài)不同的黑色顆粒在運(yùn)動。如果鏡下檢查(100x)每視野計數(shù)在10個以上者就可能使細(xì)胞生長受到影響，如果其數(shù)量再增多細(xì)胞可停止增殖繼而死亡。人們常稱這種顆粒為黑膠蟲或中毒顆粒。?關(guān)于黑膠蟲的描述ü分類上的描述對于黑膠蟲的分類，學(xué)術(shù)界沒有明確給予說法。關(guān)于黑膠蟲的分類，目前大部分人認(rèn)為黑膠蟲污染是微生物感染。在一些文章論述上把黑膠蟲歸為生物污染類型，但是沒把它歸為確定的生物分類類型，只是把黑膠蟲獨(dú)立為一種未知生物。而根據(jù)中國病毒所和軍科院鑒定是一種
2019
08-05

科研新發(fā)現(xiàn)！重返青春不再是夢！
衰老（AgingorSenesence）這個詞意味著隨著年齡增加，機(jī)體逐漸出現(xiàn)的退行性變化。衰老的普遍性、內(nèi)因性、進(jìn)行性及有害性作為衰老的標(biāo)準(zhǔn)被普遍接受。自19世紀(jì)末應(yīng)用實(shí)驗(yàn)方法研究衰老以來，先后提出的學(xué)說不下20余種，很多學(xué)說并沒有得到實(shí)驗(yàn)研究的支持。目前的研究認(rèn)為，衰老由干細(xì)胞衰退、DNA退化、飲食精神因素、衰老基因活躍等是綜合因素的結(jié)果，仍未形成統(tǒng)一的衰老理論。衰老可以看作是身體機(jī)能的逐漸衰退，它與人類常患的大多數(shù)慢性疾病有關(guān)，比如癌癥、糖尿病和癡呆。大家都希望在自己的有生之年能見到科學(xué)家
2019
07-18

細(xì)胞培養(yǎng)小貼士，需要您拿走?。?！
總有一些細(xì)心、周到的人，在科研實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)小竅門和總結(jié)小經(jīng)驗(yàn)，很容易就能處理一些常見問題。關(guān)于關(guān)注細(xì)胞培養(yǎng)的小伙伴們，以下總結(jié)對您有或多或少的幫助！細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備在您帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺。這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險。細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。結(jié)束操作后,別忘了培養(yǎng)基對光敏感,應(yīng)盡可能避光保存。細(xì)胞培養(yǎng)的定期檢查定期檢查培養(yǎng)細(xì)
2019
07-18

細(xì)胞培養(yǎng)中常用培養(yǎng)基及基本特性
細(xì)胞培養(yǎng)中常用培養(yǎng)基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正?；驉盒栽錾陌准?xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱低必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞
2019
06-21

腫瘤細(xì)胞系在各研究中被廣泛使用
腫瘤細(xì)胞系作為一種重要實(shí)驗(yàn)材料，在各研究中被廣泛使用。"腫瘤細(xì)胞系篩選檢測平臺"服務(wù)部在建立的STR準(zhǔn)確和支原體陰性的高可信度的基礎(chǔ)上，已經(jīng)建立起對細(xì)胞增殖和體外生物學(xué)表型的多種檢測方法,以滿足客戶在新藥開發(fā)不同階段和基礎(chǔ)研究的不同需求。其中包括：提供臨床試驗(yàn)前腫瘤類型的判斷;提供臨床前病人亞群的選擇和生物標(biāo)記物研究的依據(jù);提供體內(nèi)腫瘤模型的選擇、新靶點(diǎn)鑒定和研究命題的論證；以及作為高通量的新藥篩選平臺等等。人源惡性腫瘤細(xì)胞系是一種強(qiáng)大有效的模型系統(tǒng)。它可以被無限培養(yǎng)增殖,而且可以通過進(jìn)行各種操
2019
06-04

胎牛血清要怎么喝才能裝成我經(jīng)常喝的樣子？
好緊張，在線等！不過FBS能不能喝還是個問題，我們來認(rèn)真分析一下哈。FBS都包含了什么？首先是蛋白質(zhì)，F(xiàn)BS里有大量的蛋白質(zhì)，白蛋白、球蛋白。這些蛋白里，比如胎球蛋白促進(jìn)細(xì)胞的附著，巨球蛋白可以抑制胰酶。FBS的蛋白含量比較高，所以會很粘牙，喝完可能能把牙粘住……當(dāng)你假裝經(jīng)常喝胎牛血清的時候，需要不停地咂嘴，表示很黏才能顯得經(jīng)常喝……其次是多肽，多肽一般會起到促細(xì)胞增殖的做用，比如什么成纖維細(xì)胞生長因子，表皮細(xì)胞生長因子等等，不過多肽的含量并不是特別多。所以如果喝了FBS的話，容易變胖。沒錯，只
2019
06-03

特級胎牛血清滿足用戶的需求
特級胎牛血清保存和使用須注意：血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時，應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。特級胎牛血清在動物細(xì)胞培養(yǎng)中起著多方面的作用可以概括為:①提供細(xì)胞生存和增殖所必需的生長調(diào)節(jié)因子。②補(bǔ)充基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量不足的營養(yǎng)成分。③含有一些可供貼壁細(xì)胞型細(xì)胞貼壁
2019
05-28

Sigma D2650 DMSO注意事項(xiàng)
DMSO是一種用于化學(xué)反應(yīng)（如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR））的極性非質(zhì)子溶劑，也可作為冷凍保護(hù)玻璃化劑用于保存細(xì)胞、組織和器官。DMSO可在細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基中用于保護(hù)細(xì)胞免受冰晶導(dǎo)致的機(jī)械損傷。它可用于原代、繼代培養(yǎng)和重組的異倍體和雜交瘤細(xì)胞系、胚胎干細(xì)胞（ESC）以及造血干細(xì)胞的凍存。DMSO常與BSA或胎牛血清（FBS）一同使用。應(yīng)用：一種氫鍵破壞劑。因其抗凍作用，可用于細(xì)胞的凍存；因其對大分子的變性作用，用于變性凝膠電泳等。儲存方式：1．該品應(yīng)密封于陰涼干燥處避光保存。2．該品采用鋁桶、塑料桶或
2019
05-23

從這幾個方面去判斷Hyclone胎牛血清質(zhì)量的好壞
HyClone胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。如何儲存和解凍Hyclone胎牛血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時間儲存
2019
05-21

BD Matrigel 基質(zhì)膠選購指南
BDMatrigel基質(zhì)膠選購指南原屬于BD生命科學(xué)部DiscoveryLabware，2012年被Corning/康寧收購。BioCoat品牌專業(yè)提供各種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白、粘附分子、細(xì)胞因子和血清添加劑，為細(xì)胞培養(yǎng)耗材預(yù)包被不同成分的細(xì)胞外基質(zhì)和粘附分子，為細(xì)胞提供更接近體內(nèi)的生長環(huán)境。主要產(chǎn)品有Matrigel基質(zhì)膠，collagenI,collagenII,collagenIII,collagenIV,collagenV,collagenVI,collagenI,Fibronectin,La
2019
05-20

轉(zhuǎn)染試劑選購指南
研究人員可通過多種基因傳遞技術(shù)將質(zhì)粒DNA、sirna或者雙鏈RNAi、寡核苷酸和RNA轉(zhuǎn)入真核細(xì)胞中，應(yīng)用于各種研究和藥物開發(fā)領(lǐng)域。如欲詳細(xì)了解那種轉(zhuǎn)染技術(shù)適合您的細(xì)胞系和應(yīng)用領(lǐng)域，請參閱我們的《轉(zhuǎn)染選擇指南》。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染ThermoFisher可提供種類齊全的陽離子脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑，產(chǎn)品性能出眾，可將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入多種細(xì)胞中。RNAi轉(zhuǎn)染RNA干擾（rnai）技術(shù)在生物學(xué)發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證領(lǐng)域掀起了一場革命。通過RNAI技術(shù)，可以“關(guān)閉”或降低基因表達(dá)，從而更好地了解該基因的功能及其在疾病中的作用。轉(zhuǎn)染是進(jìn)行有
2019
05-17

懸浮細(xì)胞的傳代與培養(yǎng)
懸浮細(xì)胞的傳代懸浮細(xì)胞傳代比貼壁細(xì)胞傳代稍微簡單一些。由于細(xì)胞已經(jīng)在生長培養(yǎng)基中的懸浮，因此無需通過酶的作用使其從培養(yǎng)容器表面脫離，整個過程較為迅速，對細(xì)胞的損傷也較小。懸浮培養(yǎng)時不進(jìn)行生長培養(yǎng)基的更換；而是每2到3天加料一次，直到細(xì)胞匯合?？梢灾苯釉谂囵B(yǎng)瓶中稀釋細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增，或者也可以從培養(yǎng)瓶中取出一部分細(xì)胞，將余下的細(xì)胞稀釋到該細(xì)胞系適宜的接種密度。懸浮細(xì)胞的傳代后的延滯期一般比貼壁細(xì)胞要短。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)容器懸浮培養(yǎng)可采用未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的無菌培養(yǎng)瓶（例如：不嗲折流板的搖瓶）進(jìn)行；
2019
05-17

貼壁培養(yǎng)哺乳動物細(xì)胞傳代的一般流程
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了貼壁培養(yǎng)哺乳動物細(xì)胞傳代的一般流程。請注意昆蟲細(xì)胞與哺乳動物細(xì)胞傳代的一些關(guān)鍵步驟有所不同。更多信息請參閱下一頁的“昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項(xiàng)”部分。為自己所用的細(xì)胞系傳代時，建議您嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)中所有產(chǎn)品附帶的操作說明。偏離某種細(xì)胞所需的培養(yǎng)條件會導(dǎo)致細(xì)胞表型異常，甚至培養(yǎng)*失敗。所需材料：裝有貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)容器：經(jīng)過組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿：*生長培養(yǎng)基，預(yù)熱至37℃：一次性無菌15-ml試管：37℃培養(yǎng)箱，充有二氧化碳濃度為5％的濕化空氣：平衡鹽溶液，例如：杜爾貝科
2019
05-08

GIBCO10099-141胎牛血清的品質(zhì)是很重要的
GIBCO10099-141胎牛血清常儲存在-20℃，避光（因?yàn)楣饩€可造成維生素的損失），避免反復(fù)凍融，尤其不要放在有自動除霜功能的冰箱中。如果一次用不完，應(yīng)分裝在15ml或50ml大離心管或其他小瓶中，一次使用一管，較為方便。GIBCO10099-141胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識別維生素
2019
04-23

進(jìn)口胎牛血清需要熱滅活嗎？
進(jìn)口胎牛血清需要熱滅活嗎？何謂熱滅活？一般是以56C，30分鐘來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。我需要滅活血清嗎？–實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些
2019
04-23

澳洲進(jìn)口胎牛血清里有大片沉淀，這個正常嗎?
澳洲進(jìn)口胎牛血清里有大片沉淀，這個正常嗎??說明1:血清非人工產(chǎn)品，有些東西沉淀出來系自然現(xiàn)象–纖維蛋白原–鹽析出。如磷酸鈣等–膽固醇和脂肪酸–蛋白析出?說明2:沉淀在下列情況下還會增加:–熱滅活–37℃培養(yǎng)(常常由此引發(fā)歧異)–反復(fù)凍融–熔化中沒有搖勻–gamma照射–長期存放在2-8°C?另外我們還發(fā)現(xiàn)：－血清加入到RPMI1640中時，沉淀往往會發(fā)生或增加–pH升高時，沉淀會增加–在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中，因?yàn)榕囵B(yǎng)基的蒸發(fā)也會導(dǎo)致沉淀的增加?說明3:沉淀不會影響其對細(xì)胞的促生長作用–我們的技術(shù)人
2019
04-15

總結(jié)胎牛血清的相關(guān)知識點(diǎn)
胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時，將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可較大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比，胎牛血清顯然產(chǎn)量低，成本高。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中；因此，胎牛血清應(yīng)用很廣泛。比如，胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中；因此，胎牛血清應(yīng)用很廣泛。比如，胎牛血清能夠用在人獸疫苗及生物技術(shù)藥物的科研、工業(yè)生產(chǎn)和質(zhì)量控制領(lǐng)域。胎牛血清通常用于人
2019
04-03

優(yōu)等胎牛血清的使用是有自己的一套方法的
優(yōu)等胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。更多的信息下面小編為大家介紹：分析關(guān)于優(yōu)等胎牛血清的使用方法：1、血清必須貯存-20℃，如存放于4℃，請勿超過兩周，對于某些單位一次無法用完一瓶，可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中，由于血清解凍時體積會增加10％，必須預(yù)留此膨脹體積的空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。2、一般公司所提供的血清一般為100ml和500ml裝量，因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清：-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小

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