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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
初級會(huì)員 | 第8年
酶免疫試驗(yàn)的一些優(yōu)點(diǎn)及局限性2019/05/22
作為一項(xiàng)免疫檢驗(yàn)技術(shù),elisa酶免疫試驗(yàn)還是有其局限性的,不但所檢測的生物學(xué)體液樣本如血清中有可能存在各種干擾實(shí)驗(yàn)的因素,而且在實(shí)驗(yàn)過程中,影響結(jié)果的因素也很多,尤其是進(jìn)行手工的ELISA測定時(shí)。HBsAg的測定主要是弱陽性的問題,這與ELISA測定的“灰區(qū)”有關(guān)系,處于cut-off值周圍亦即“灰區(qū)”的結(jié)果的可靠性通常較差,陽性當(dāng)然需要確認(rèn),陰性卻也未必是真,這一點(diǎn)在血站篩檢獻(xiàn)血員血液時(shí)是非常重要的,必須引起注意,并采取適當(dāng)?shù)拇胧乐勾祟悋?yán)重影響人們健康的傳染性疾病經(jīng)輸血傳播,本書后面的有
上海研生為小鼠elisa試劑盒技術(shù)解答疑惑。2019/05/15
耳聞不如目見,目見不如足踐。收到了認(rèn)真挑選的【小鼠elisa試劑盒】之后,就需要準(zhǔn)備著實(shí)驗(yàn)的問題了,上海研生的客戶若是遇到了一些技術(shù)性(比如實(shí)驗(yàn)步驟、注意問題、計(jì)算、報(bào)告等等)的問題,可以我司業(yè)務(wù)員,會(huì)*時(shí)間為您安排技術(shù)人員解答疑惑。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的過程中,您需要將材料準(zhǔn)備齊全,下面上海恒遠(yuǎn)生物帶您一起來看一看實(shí)驗(yàn)室需備儀器與材料。1、酶標(biāo)儀經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分,防止濾光片霉變,ELISA試劑盒定期檢測校正,使其保持良好的工作性能。2、洗板機(jī)每個(gè)設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過2ul,人工扣板時(shí)
小鼠瘦素(LEP)elisa試劑盒保存簡介說明2019/05/08
小鼠瘦素(LEP)elisa試劑盒保存簡介在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時(shí)儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸
鴨細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)ELISA試劑盒操作步驟2019/04/29
鴨細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)ELISA試劑盒操作步驟1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去
ELISA實(shí)驗(yàn)過程中犯了幾個(gè)小錯(cuò)誤也會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差的哦!2019/04/24
ELISA試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測。ELISA試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。但是您知道嗎?如果您在實(shí)驗(yàn)過程中犯了以下幾個(gè)小錯(cuò)誤的話也會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差的哦!1.做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說話,防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。2.加入一抗二抗需要放入37°。3.如果同時(shí)做多個(gè)板子,多個(gè)板子別羅一起;盡量少用排槍。4.加樣時(shí),由低濃度向高濃度加
人心肌素-1(MCN-1)ELISA試劑盒幾項(xiàng)重要操作步驟2019/04/17
人心肌素-1(MCN-1)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2000ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1000ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液500ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液250ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液125ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2
外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的采集2019/04/12
ELISA試劑盒的外源性物質(zhì)外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的采集、貯存不當(dāng)?shù)仍蛩?。如?biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。(1)標(biāo)本溶血由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。(2)標(biāo)本受細(xì)菌污染因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血
大鼠ELISA試劑盒的購買要注意什么2019/04/04
要做大鼠的實(shí)驗(yàn),用elisa試劑盒來檢驗(yàn)血清內(nèi)毒素含量、血漿酶DAO、血漿D-乳酸這三個(gè)數(shù)值,請問應(yīng)該怎么做呢要做大鼠的實(shí)驗(yàn),用elisa試劑盒來檢驗(yàn)血清內(nèi)毒素含量、血漿酶DAO、血漿D-乳酸這三個(gè)數(shù)值,請問應(yīng)該怎么做呢?步驟?取多少大鼠的血清?這三個(gè)指標(biāo)ELISA都是可以測的,血清,血漿理論上來說還是有一定的影響的,雙抗體夾心法;一般有150微升就差不多了,但是現(xiàn)假貨較多,價(jià)格又高,也不一定做出理想的效果;可以試試化學(xué)法,DAO和D-乳酸是肯定可以測的我zui近要做大鼠TNF-a的ELISA,
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的原理似乎很簡單2019/03/27
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的原理似乎很簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個(gè)實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。背景噪音會(huì)影響您對結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景,下面有一些tips。洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊,其實(shí)很重要,因?yàn)槿绻唇Y(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會(huì)增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特
ELISA試劑盒怎樣提高檢測的特異性2019/03/21
作為記錄測定結(jié)果的儀器,酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。首先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進(jìn)行保養(yǎng),對濾光片要定期校正;其次酶標(biāo)儀波長設(shè)置要正確,使用雙波長,一個(gè)檢測波長,一個(gè)參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。每種試劑都有其反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長,會(huì)造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。此外,ELISA試劑盒在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)先擦試微
原代細(xì)胞熒光標(biāo)記檢測法2019/03/15
DNA的新組裝合成是原代細(xì)胞生長的必要條件,因此經(jīng)常被用來檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞活力及凋亡??墒褂梅欠派湫缘暮塑账犷愃莆?-bromo-2'-deoxy-uridine(BrdU),其能摻入增殖細(xì)胞的DNA。后續(xù)使用抗BRdU的單克隆抗體,利用免疫化學(xué)或流式檢測摻入的BRdU,從而達(dá)到檢測細(xì)胞增殖的目的。CellularDNAFragmentationELISA(11585045001)可使用ELISA法在細(xì)胞群落中檢測細(xì)胞凋亡、壞死或細(xì)胞毒性。PKH熒光細(xì)胞標(biāo)記試劑盒,如:PKH26RedFluo
酶標(biāo)記物方法注意事項(xiàng)有哪些2019/03/13
酶標(biāo)記物包括酶標(biāo)記抗原、酶標(biāo)記抗體和酶標(biāo)記SPA等。酶標(biāo)記物質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到免疫酶技術(shù)的成功與否,因此被稱為關(guān)鍵的試劑。酶標(biāo)記物中常用的是酶標(biāo)記抗體,它是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成。酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量主要取決于純度好、活性強(qiáng)及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前,高質(zhì)量的酶(如辣根過氧化物酶,簡稱HRP)國內(nèi)已有商品供應(yīng)。高質(zhì)量的抗體則可通過提取純化而獲得。在制備方法上,宜選用產(chǎn)率高、不影響結(jié)合物的活性和不混雜干擾性物質(zhì)且操作簡便易行的方法。注意事項(xiàng)1.在具備高質(zhì)量HRP的
ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測4個(gè)要點(diǎn)分享2019/03/07
ELISA中,標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算是整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程的必要步驟,也是關(guān)鍵步驟之一。今天為大家?guī)砹?ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測要點(diǎn)分享,一起來看下吧:1.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從談起。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對于呈s型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線
elisa酶聯(lián)免疫吸附的原理與方法2019/02/22
酶聯(lián)免疫吸附的原理與方法1.1原理酶聯(lián)免疫吸附測定的基本原理是把抗原或抗體在不損壞其免疫活性的條件下預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面;測定時(shí),將受檢樣品(含待測抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體起反應(yīng)形成抗原或抗體復(fù)合物;反應(yīng)終止時(shí),固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量(免疫復(fù)合物)即與標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量成一定比例;經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì),加入酶反應(yīng)底物后,底物即被固相載體上的酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,zui后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測物質(zhì)含量[2
ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法的比較2019/02/15
ELISA試劑盒在實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。方法一用于檢測未知抗體的間接法:1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的
為大家總結(jié)ELISA試劑盒的五大種類2019/01/30
elisa試劑盒有很多種類,以下是我司為大家總結(jié)的ELISA試劑盒的五大種類。一、食品安全檢驗(yàn)ELISA試劑盒指食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測產(chǎn)品。包括植物病毒、細(xì)菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒,以及動(dòng)植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測試劑盒。二、生物原裝ELISA試劑盒以及各類國產(chǎn)ELISA試劑盒、細(xì)胞因子檢測試劑盒如白介素、選擇素、集落刺激因子,腫瘤壞死因子,干擾素,轉(zhuǎn)化生長因子,趨化因子,細(xì)
選對了ELISA試劑盒用對了試驗(yàn)技巧,就會(huì)讓您的試驗(yàn)功率事半功倍2019/01/25
說到ELISAKit,信任大家都不會(huì)陌生。ELISAKit的誕生,是為了幫助科研作業(yè)者省掉繁瑣的試驗(yàn)過程,進(jìn)步科研功率。假如選對了試劑盒,用對了試驗(yàn)技巧,就會(huì)讓您的試驗(yàn)功率事半功倍。一.如何選購ELISAKit市面上任意品牌的一個(gè)ELISAKit售價(jià)都在1000元以上假如選錯(cuò)了試劑盒輕則丟失一筆科研經(jīng)費(fèi)重則毀掉整個(gè)試驗(yàn)課題所以選個(gè)對的,很有必要!市面上的ELISAKit質(zhì)量良莠不齊,想要挑選到適宜的試劑盒還真不是一件很容易的事情。真真假假,難以區(qū)分。1查找待測樣本的蛋白濃度:能夠通過NCBI的文
elisa試劑盒加樣后分批操作2019/01/09
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。為防止樣品蒸騰,實(shí)驗(yàn)時(shí)將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。很多不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地閑暇,然后架空ELISA試劑盒后的過程中干擾物質(zhì)的再吸附。在ELISA試劑盒查看實(shí)驗(yàn)中,包被原的性質(zhì)很首要,蛋白濃度,是不是降解,這到你做出的抗體可不可以被其辨認(rèn)。加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。合理安排查看量,防止反響板過多構(gòu)成洗板等待時(shí)間長。保存抗原很首要,做重組蛋白時(shí),要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。防止孵育時(shí)間
進(jìn)口elisa試劑盒相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存2018/12/18
多客戶因?yàn)閷ζ放频男湃味葐栴},主要還是選擇國外*,但是國內(nèi)進(jìn)口分裝比較成熟的公司仍然是一個(gè)非常好的選擇。進(jìn)口elisa試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短,操作越便利,越容易受到用戶歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個(gè)指標(biāo)。進(jìn)口分裝試劑盒因?yàn)槭∪ゲ簧傥锪骱蛨?bào)關(guān)費(fèi)用,與國外*試劑相比價(jià)格上有比較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格。進(jìn)口ELISA試劑盒酶免疫技術(shù)是利用酶催化底物反應(yīng)的生物放大作用,提高特異性抗原-抗體免疫學(xué)反應(yīng)檢測敏感性的一種標(biāo)記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)
間接法中如何提高進(jìn)口elisa試劑盒陽性值2018/12/13
近日有客戶進(jìn)口elisa試劑盒間接法中,如何提高陽性值,在抗原濃度不變的情況下?他用自己的抗原包被的板子,用自己的酶標(biāo)二抗和顯色液做,陽性值很低,為OD0.5。但是試劑盒中的酶標(biāo)二抗和顯色液做,陽性值卻很高OD1.4,這樣看來我的抗原應(yīng)該沒問題,好像問題出在酶標(biāo)二抗上,請勁馬技術(shù)幫忙分析。根據(jù)客戶留言在網(wǎng)上問題解答如下:先要確定兩種酶標(biāo)二抗使用的是不是同一批包被的板,因?yàn)殡m然是相同的抗原,可能兩次包被不一樣。如果是同一批板,出現(xiàn)這種情況只能說明你的酶標(biāo)二抗失活了,買新的二抗,按說明書上的稀釋倍數(shù)
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