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細(xì)胞角蛋白7抗體穩(wěn)定性良好的主要原因2022/02/15: 細(xì)胞角蛋白7抗體在室溫、37℃保存與-20℃保存具有一樣的活性與穩(wěn)定性。之所以具有這樣良好的穩(wěn)定性，主要原因有四個方面：1.抗體濃度高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失。撫生抗體產(chǎn)品中，93%的濃度大于0.5mg/ml?？贵w產(chǎn)品濃度普遍大于業(yè)內(nèi)水平。2、抗體分子的高Tm值有數(shù)據(jù)表明，在70℃時抗體分子才開始明顯地去折疊（unfold），而這一過程之前的變化也具有相當(dāng)?shù)目赡嫘?。也就是說，在室溫下，甚至短時間溫度達(dá)到50-60度，抗體分子都能維持正確折疊，保持應(yīng)有的活性。3.抗體純度高純

穩(wěn)定細(xì)胞株篩選的主要三類方法2022/01/27: 主要有三類方法：1、單克隆環(huán)法：此類方法多用于整合率低的轉(zhuǎn)染方法或者需要得到單克隆細(xì)胞株的實(shí)驗(yàn)。其優(yōu)點(diǎn)在于工作量小，只需將轉(zhuǎn)染或者病毒載體感染后的細(xì)胞按照一定的細(xì)胞密度轉(zhuǎn)移至新皿中，并使用合適的藥物進(jìn)行篩選，最后在克隆環(huán)的幫助下對單克隆細(xì)胞株進(jìn)行挑選，并在新皿中完成擴(kuò)增。缺點(diǎn)在于需要對細(xì)胞密度和藥物濃度繪制致死曲線并選取合適的細(xì)胞密度和藥物濃度進(jìn)行篩選，一些細(xì)小的密度和濃度差別都會導(dǎo)致難以獲取均一的單克隆，結(jié)果導(dǎo)致獲取的克隆不純，含有非整合的細(xì)胞。穩(wěn)定整合的細(xì)胞在這樣一類混合細(xì)胞中，很快會失去生

總結(jié)RM細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)2022/01/05: 細(xì)胞培養(yǎng)是指將細(xì)胞從動物或植物體內(nèi)取出，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細(xì)胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離，也可以來源于已建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。RM細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)有一下幾點(diǎn)：1.研究的對象是活細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條

有關(guān)PCR反應(yīng)污染幾個原因2021/12/22: PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與*的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。一、標(biāo)本間交叉污染標(biāo)本污染主要有收集標(biāo)本的容器被污染，或標(biāo)本放置時，由于密封不嚴(yán)溢于容器外，或容器外粘有標(biāo)本而造成相互間交叉污染;標(biāo)本核酸模板在提取過程中，由于吸樣槍污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染;有些微生物標(biāo)本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴(kuò)散，導(dǎo)致彼此間的污染.二、PCR試劑的污染主要是由于在PCR試劑配制過程中，由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染.三、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物

歸納化學(xué)試劑發(fā)生變化的原因2021/12/15: 化學(xué)試劑在貯存過程中是否會發(fā)生變質(zhì)，取決于內(nèi)外兩個方面的因素，內(nèi)因是試劑本身化學(xué)結(jié)構(gòu)所決定的理化性質(zhì)；外因則是試劑所處的環(huán)境條件。要做到合理保管，一要了解試劑結(jié)構(gòu)與性質(zhì)間關(guān)系，二要創(chuàng)造適應(yīng)試劑貯存的外部環(huán)境?；瘜W(xué)試劑變質(zhì)的原因：環(huán)境主要是指貯存的溫度、光照和介質(zhì)。介質(zhì)一般是指空氣和混有的雜質(zhì)。貯存室里除空氣中含有的氧、二氧化碳和水蒸氣以外，還往往含有存放的各種揮發(fā)性試劑擴(kuò)散到空氣中的蒸氣，常見的有氯化氫、硝酸、硫化氫、二氧化硫、溴、dian、乙烯、甲醛等蒸氣；另外還有飄混在空氣中的塵埃，其中有無

ELISA試驗(yàn)檢測結(jié)果應(yīng)具備的三條件2021/12/09: 1、標(biāo)本因素血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)留意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個操縱步驟的留意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，嚴(yán)格遵照劃定操縱，必能得出正確的結(jié)果。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不可濺出，不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定需用稀的血清，可在

了解進(jìn)行細(xì)胞系鑒定必要性2021/11/29: 1.什么是細(xì)胞系鑒定？所謂細(xì)胞系鑒定即通過STR（短串聯(lián)重復(fù)）圖譜所建立細(xì)胞系的遺傳特征。一株細(xì)胞系的遺傳特征確立后，細(xì)胞系可以通過定期的檢測，以防止出現(xiàn)細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染的情況。2.為什么要進(jìn)行細(xì)胞系鑒定？首先進(jìn)行細(xì)胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫(yī)藥的研究都采用培養(yǎng)細(xì)胞來進(jìn)行，這些細(xì)胞可能是受贈于其它研究人員,也可能是從細(xì)胞庫(如美國ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得來。據(jù)估計(jì)，15-20%的實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)中所使用的細(xì)胞已經(jīng)不是原來的細(xì)胞系，或者與其

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)制備測定要點(diǎn)2021/11/17: 科研實(shí)驗(yàn)中要使ELISA試劑盒測定得到準(zhǔn)確的結(jié)果，不論是定性的還是定量的，必須嚴(yán)格按照規(guī)定的方法制備試劑和實(shí)施測定。一般性試劑，如包被緩沖液、洗滌液、標(biāo)本稀釋液、結(jié)合物稀釋液、底物工作液和酶反應(yīng)終止液等，配制時不可掉以輕心。(一)加樣在ELISA試劑盒中除了包被外，一般需進(jìn)行45加樣。在定性測定中有時不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性，例如規(guī)定為加樣一滴。此時應(yīng)該使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時應(yīng)將液體加

?講解細(xì)胞凍存需要注意的幾個細(xì)節(jié)2021/11/08: 我們都知道，細(xì)胞如果要長期保存，需要凍存起來放液氮保存。那怎么樣凍存細(xì)胞才能保證細(xì)胞能正常復(fù)蘇，不至于凍存死亡呢？下面我們就來講講細(xì)胞凍存應(yīng)該注意的一些地方。1.保持凍存前細(xì)胞狀態(tài)良好凍存前一定要保證細(xì)胞狀態(tài)良好，細(xì)胞處于對數(shù)生長期，否則不管后面怎么處理，凍存后的細(xì)胞狀態(tài)必然有影響。若細(xì)胞密度偏高，培養(yǎng)基已經(jīng)略微變黃，細(xì)胞狀態(tài)正常，需要換液培養(yǎng)2h以上再凍存細(xì)胞；若已*變黃，細(xì)胞死亡超過20%，需要傳代后再重新培養(yǎng)至狀態(tài)正常后再凍存細(xì)胞。2.消化、吹打細(xì)胞按盡量輕柔如何正確消化、吹打細(xì)胞在前面已

一起來比較一抗和二坑2021/11/03: 第一抗體就是平常所說的抗體，即能和抗原特異性結(jié)合。第二抗體是能和抗體結(jié)合的，即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。一抗是針對抗原的抗體，二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說，抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán)，而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)（底物和二抗）。一抗：可以特異結(jié)合底物，就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。二抗：可以和一

小鼠白介素24elisa檢測試劑盒特點(diǎn)與樣品收集2021/10/27: 小鼠白介素24elisa檢測試劑盒特點(diǎn)：1.即開即用，用戶只需要提供DNA模板。2.引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增巴戟天，與其他植物沒有交叉反應(yīng)。3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。4.PCRmix中含上樣染料，PCR后可以直接上樣電泳。5.本大鼠elisa試劑盒足夠做40μL體系的PCR50次，但只能用于科研。小鼠白介素24elisa檢測試劑盒樣品收集:1.血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管

敘述細(xì)胞因子的六種類2021/10/20: 細(xì)胞因子(Cytokine,CK)是細(xì)胞間相互作用的一種化學(xué)物質(zhì)，由免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞合成分泌的一類有多種生物活性的小分子多肽或糖蛋白。細(xì)胞因子最早是從淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，因此曾被稱為淋巴因子或單核因子，隨后研究發(fā)現(xiàn)機(jī)體中的多種細(xì)胞都具有分泌這些蛋白的功能。細(xì)菌、病毒等微生物與物理或化學(xué)因素對機(jī)體的損傷都可以激發(fā)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，而細(xì)胞因子又能殺滅細(xì)菌和抑制病毒，達(dá)到保護(hù)機(jī)體的目的。細(xì)胞因子的六種類：（1）白細(xì)胞介素(Interleukin,IL-s)：由白細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞分泌的，在白

?細(xì)胞培養(yǎng)五個基本條件2021/10/11: 細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)也稱細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)必要的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)基本條件：1、合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的最重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中最重要的成分之一，含有細(xì)胞生長

培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程2021/10/08: 培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程：(1)將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。(4)用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。(5)打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負(fù)壓，開蓋時可能會有少量溢出，這是正?，F(xiàn)象）。(6)用多聚賴氨酸（或參照說明書）包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細(xì)胞。(7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞

細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別2021/09/27: 細(xì)胞株(CellStrain):也就是說，細(xì)細(xì)胞群胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)第一次傳代成功后即為細(xì)胞系(cellline)細(xì)胞株：動物細(xì)胞培養(yǎng)中，原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長就會出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳40-50代，這種傳代細(xì)胞叫作細(xì)胞株。細(xì)胞系：細(xì)胞株細(xì)胞的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，當(dāng)細(xì)胞株

載脂蛋白ELISA檢測試劑盒操作步驟與注意事項(xiàng)2021/09/24: 操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。36ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液18ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液9ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4.5ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.25ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150µl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑

ELISA實(shí)驗(yàn)操作五個要點(diǎn) ?2021/09/15: 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。ELISA實(shí)驗(yàn)操作五個要點(diǎn)如下：1.試劑的準(zhǔn)備按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。2.標(biāo)本的

講解質(zhì)粒抽提步驟2021/09/02: 質(zhì)粒抽提（PlasmidExtraction）方法即去除RNA，將質(zhì)粒與細(xì)菌基因組DNA分開，去除蛋白質(zhì)及其它雜質(zhì)，以得到相對純凈的質(zhì)粒。提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種，從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取，從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取，從具體操作方法分可以分為堿裂解法、煮沸法、牙簽法等，各種不同的方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)，根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目梢圆捎煤线m的提取方法。Ⅰ.使用質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒時請參考具體試劑盒的操作說明。如Omega公司的E.Z.N.A.®PlasmidMi

講解對照品與標(biāo)準(zhǔn)品知識課堂2021/08/25: 對照品和標(biāo)準(zhǔn)品一樣是指國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)不可分割的組成部分。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它是用來檢查藥品質(zhì)量的一種特殊的專用量具;是測量藥品質(zhì)量的基準(zhǔn);也是作為校正測試儀器與方法的物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。在藥品檢驗(yàn)中，它是確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的對照，是控制藥品質(zhì)量必須用的工具。一、概念：對照品與標(biāo)準(zhǔn)品是2個不同的概念，中國藥典凡例中已有明確的定義:文獻(xiàn)中常將2種概念混淆，認(rèn)為對照品就是標(biāo)準(zhǔn)品，是1種物質(zhì)2種提法而已[1，2]，造成錯

實(shí)驗(yàn)中免疫組化結(jié)果評判的三種方法2021/08/11: 免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)，是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理，組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素（如鏈霉親和素）結(jié)合，最后通過呈色反應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)物，從而原位確定特定蛋白質(zhì)的分布和含量。免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶

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