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上海創(chuàng)凌生物科技有限公司
中級會(huì)員 | 第7年
SILAC+IP-MS-蛋白質(zhì)互作定量分析整體服務(wù)2019/12/26
SILAC+IP-MS-蛋白質(zhì)互作定量分析整體服務(wù)簡介:利用IP純化蛋白質(zhì)復(fù)合物時(shí),除了能捕獲到Target蛋白及其互作蛋白之外,細(xì)胞中一些與抗體/抗體偶聯(lián)材料(agarose、magneticbeads等)高親和的蛋白質(zhì)也會(huì)被一起捕獲下來(非特異性粘附蛋白),并且這些蛋白都是高豐度的。故而,在后續(xù)的LC-MS鑒定時(shí),這些非特性的蛋白質(zhì)會(huì)被高頻率的檢測到。這就帶來了一個(gè)很困擾的問題:由于沒有定量信息,在眾多鑒定到的蛋白質(zhì)中,如何才能排除非特性的粘附蛋白,找出真正的、與target特異性互作的蛋白
IP-MS 蛋白質(zhì)互作/后修飾整體服務(wù)2019/12/26
IP-MS蛋白質(zhì)互作/后修飾整體服務(wù)簡介:蛋白質(zhì)相互作用(Protein-ProteinInteractions,PPIs)和翻譯后修飾(Post-TranslationalModifications,PTMs)的數(shù)據(jù)是能顯著提高基礎(chǔ)類研究文章檔次的*內(nèi)容。篩選和發(fā)現(xiàn)目的蛋白(target)在細(xì)胞中新的互作蛋白或者新的后修飾,免疫沉淀(IP,Immunoprecipitation)結(jié)合LC-MS(液相色譜-質(zhì)譜連用,蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心工具)是目前的主流技術(shù)方案(IP-MS)。通過一次IP-MS
Label-free-定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)2019/12/26
Label-free-定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù)簡介:與SILAC、iTRAQ/TMT等標(biāo)記技術(shù)不同,Label-free不需要對蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行任何標(biāo)記處理,只要將蛋白質(zhì)用trypsin酶解成肽段,進(jìn)行LC-MS測試分析即可。label-free能保持樣品的“真實(shí)性”;原則上,label-free能分析無限多個(gè)樣品,其通量要遠(yuǎn)高于SILAC、iTRAQ/TMT等標(biāo)記技術(shù),是真正的高通量蛋白質(zhì)分析技術(shù)。但是其也有本身的缺陷,即(1)對LC-MS的穩(wěn)定性要求*;(2)每個(gè)樣品至少要做3次技術(shù)重復(fù)或者生物
iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服務(wù)2019/12/26
一、iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服務(wù)簡介:iTRAQ(IsobaricTagforRelativeandAbsoluteQuantitation)和TMT(TandemMassTag)分別是由ABSCIEX和ThermoScientific公司分別開發(fā)的、對trypsin酶解肽段進(jìn)行標(biāo)記的試劑盒。標(biāo)記肽段通過LC-MS,能同時(shí)實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)的鑒定和對蛋白質(zhì)的相對定量分析。iTRAQ和TMT的技術(shù)原理*一樣,區(qū)別在于:(1)生產(chǎn)商不同;(2)分子結(jié)構(gòu)稍有差異;(3)標(biāo)記通量有差異。iTRAQ
SILAC-exosome定量分析服務(wù)2019/12/26
一、簡介:Exosome(外泌體)是具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)、直徑約為30-150nm、密度在1.13-1.21g/ml的膜性囊泡。在exosome的囊泡結(jié)構(gòu)中含有細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和小分子等物質(zhì),能作為信號分子傳遞給其他細(xì)胞以進(jìn)行細(xì)胞間通訊。研究發(fā)現(xiàn)exosome在眾多生理、病理過程中發(fā)揮著著重要作用。鑒于不同細(xì)胞分泌的exosome具有不用的組成成分和功能,故而exosome有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用,此外,基于exosome的膜性結(jié)構(gòu),亦可作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病治療。E
SILAC-細(xì)胞差異蛋白質(zhì)組分析服務(wù)2019/12/25
一、簡介SILAC(StableIsotopeLabelingwithAminoacidsinCellculture)是基于哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長對“必需氨基酸”的依賴原理,將穩(wěn)定同位素(13C、15N)標(biāo)記的Lys(K)和Arg(R)加入細(xì)胞培養(yǎng)基中對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。在細(xì)胞的增殖過程中,穩(wěn)定同位素標(biāo)記的K和R自然“摻入”到蛋白質(zhì)中,從而在細(xì)胞中所有的蛋白質(zhì)上引入了質(zhì)量標(biāo)簽(MassTag,3-10Da)。借助后續(xù)MS的高分辨率,在MS層面上,實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)水平進(jìn)行高精度定量的技術(shù)。SILAC技術(shù)基本的應(yīng)
蛋白質(zhì)LC-MS鑒定服務(wù)2019/12/25
技術(shù)服務(wù)簡介LC-MS(液相色譜-質(zhì)譜連用)技術(shù)是目前對未知蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行高通量鑒定分析的核心儀器。利用LC-MS實(shí)現(xiàn)對未知樣品中蛋白質(zhì)的定性分析,確定樣品中具體有那些蛋白質(zhì),從而便于研究者發(fā)現(xiàn)和篩選目標(biāo)分子。適用于Co-IP、pull-down(DNA、RNA、蛋白質(zhì))等方法純化的蛋白質(zhì)復(fù)合物,可以直接以液體的方式進(jìn)行后續(xù)LC-MS分析。適用SDS-PAGE分離的Co-IP、pull-down(DNA、RNA、蛋白質(zhì))等方法純化的蛋白質(zhì)復(fù)合物,切割膠條,進(jìn)行膠內(nèi)酶解,后進(jìn)行LC-MS分析。其他
多克隆抗體制備技術(shù)服務(wù)2019/12/25
技術(shù)服務(wù)介紹多克隆抗體是多個(gè)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的多個(gè)免疫球蛋白的集合,可利用抗原免疫宿主得到。多克隆抗體可以識別同-抗原上的多個(gè)表位,與單克隆抗體相比有更好的親和力和更快的結(jié)合能力。創(chuàng)凌生物提供多克隆抗體生產(chǎn)服務(wù)。服務(wù)內(nèi)容包括抗原生產(chǎn)(多肽或蛋白抗原),抗體制備,抗體標(biāo)記等,可根據(jù)自己的需求選擇適合自己的實(shí)驗(yàn)方案。技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)流程:多抗制備實(shí)驗(yàn)方案(3-4個(gè)月)合成抗原多肽并進(jìn)行偶聯(lián)得到抗原:根據(jù)客戶需要量定期配佐劑(*和不*福氏佐劑)各免疫2只新西蘭白兔(皮下多點(diǎn)注射四次)頸動(dòng)脈放血收集血清;Pr
單克隆抗體定制服務(wù)2019/12/25
技術(shù)服務(wù)介紹上海創(chuàng)凌生物為您提供專業(yè)的單克隆抗體制備服務(wù),包括抗原制備,細(xì)胞融合篩選,亞克隆,單抗制備等。我們根據(jù)抗原性質(zhì)、數(shù)量純度,選擇佳的免疫方案;并通過HAT選擇培養(yǎng)基篩選融合細(xì)胞,并對融合細(xì)胞進(jìn)行ELISA陽性篩選及亞克隆;篩選出的陽性單克隆,取腹水,用ProteinAG抗體純化柱純化抗體。創(chuàng)凌會(huì)為您定制適用您下游應(yīng)用的方案并交付高質(zhì)量的單克隆抗體,交付的單抗可以用于免疫組化、ELISA、體外診斷檢測等下游實(shí)驗(yàn)。技術(shù)服務(wù)流程:抗原制備(可選)免疫;雜交瘤細(xì)胞株構(gòu)建;亞克?。桓顾囵B(yǎng);抗體
免疫共沉淀生物技術(shù)服務(wù)2019/12/25
服務(wù)簡介免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究兩種蛋白質(zhì)相互作用的有效方法。這種方法常用于測定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合,也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔,已成為研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。當(dāng)用預(yù)先固化在argarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來。再通過
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)2019/12/23
染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)服務(wù)簡介染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)(ChromatinImmunoprecipitation,簡稱ChIP)是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的一種技術(shù)。在生理狀態(tài)下把細(xì)胞內(nèi)的DNA與蛋白質(zhì)交聯(lián)在一起,通過超聲或酶處理將染色質(zhì)切為小片段后,利用抗原抗體的特異性識別反應(yīng),將與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段沉淀下來。染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)服務(wù)價(jià)格與周期服務(wù)項(xiàng)目內(nèi)容價(jià)格(元)服務(wù)周期ChIP樣品進(jìn)行破碎裂解,進(jìn)行免疫沉淀和DNA的熒光定量PCR詢價(jià)4-5周染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)服務(wù)內(nèi)容獨(dú)立交聯(lián)的染色質(zhì),超
WB蛋白免疫印跡技術(shù)服務(wù)2019/12/23
服務(wù)簡介蛋白免疫印跡(WesternBlot)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)。是將經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后的細(xì)胞或組織總蛋白從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物(NC膜或PVDF膜)上,用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。WesternBlot服務(wù)價(jià)格與周期服務(wù)編號服務(wù)項(xiàng)目內(nèi)容周期LC1037蛋白質(zhì)抽提50/樣1周蛋白含量測定10/樣3-5天SDS-PAGE檢測200/樣1周WesternBlot檢測(含
ELISA酶聯(lián)免疫反應(yīng)檢測服務(wù)2019/12/23
ELISA服務(wù)簡介ELISA是指以酶作為標(biāo)記物、以抗原和抗體之間免疫結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的固相吸附測定方法。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物
Tunel凋亡檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù)2019/12/23
技術(shù)原理晚期凋亡細(xì)胞中染色體DNA雙鏈或單鏈斷裂產(chǎn)生粘性3'-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化下,將帶有熒光素分子的dUTP標(biāo)記到DNA的3'-末端,然后通過熒光顯微鏡觀察、或進(jìn)而用帶有HRP的一抗染色后DAB顯色,可以進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測,該實(shí)驗(yàn)稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling,TUNEL)。Tunel檢測可以標(biāo)記組織細(xì)胞中發(fā)生凋亡的細(xì)胞,通
免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)服務(wù)2019/12/23
服務(wù)介紹免疫熒光細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素制成熒光標(biāo)記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細(xì)胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量。實(shí)驗(yàn)原理及流程將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微
免疫組化技術(shù)與原理2019/12/20
技術(shù)原理抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理,利用特異性的抗體探測組織或細(xì)胞中的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來,以其達(dá)到對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,定位或定量的研究。免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性的研究。服務(wù)內(nèi)容提供免疫組織化學(xué)(IHC
油紅O染色技術(shù)服務(wù)2019/12/20
技術(shù)服務(wù)介紹油紅O對脂滴的染色機(jī)制一般認(rèn)為是物理學(xué)上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂質(zhì)染色,即油紅O先溶于60%異丙醇中,然后切片浸入油紅O染液中時(shí),油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,所以在染色時(shí)油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。細(xì)胞周圍在鏡下呈現(xiàn)空泡時(shí),究竟是水樣變性、糖原,還是被溶解的脂肪?就需要用脂質(zhì)染色來幫助鑒別診斷,如脂肪瘤或脂肪肉瘤,脂肪染色呈陽性。腎的透明細(xì)胞癌,在癌細(xì)胞胞質(zhì)透亮,但脂肪染色為陰性。腎上腺皮脂腺瘤質(zhì)染色也為陽性。動(dòng)脈粥樣硬化時(shí),
特殊染色免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)2019/12/20
技術(shù)服務(wù)介紹免疫組織化學(xué)技術(shù)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù),是利用特異性抗原抗體結(jié)合性質(zhì)定量檢測化學(xué)物質(zhì)的技術(shù)。應(yīng)用免疫學(xué)基本原理--抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。軟組織腫瘤類型很多,由于普通病理切片還不能確定是哪種類型的腫瘤,因此通過一些特異性表達(dá)某種腫瘤的抗體進(jìn)行標(biāo)記,有望獲得明確的病理診斷,所以要借助于免疫組化及特殊染色。上海創(chuàng)凌生物可提供以下染色相關(guān)
Masson染色技術(shù)服務(wù)2019/12/20
Masson染色技術(shù)服務(wù)?介紹Masson染色(麗春紅酸性品紅-苯胺藍(lán)染色),是用于檢測動(dòng)物組織中膠原纖維的一種染色方法之一,能夠?qū)⒛z原纖維染成藍(lán)色,肌纖維、和紅細(xì)胞呈紅色,可用于鑒膠原纖維和肌纖維;并顯示各種組織膠原纖維含量及纖維化程度。實(shí)驗(yàn)原理1.膠原纖維是人體中的結(jié)締組織的主要成分,分布在全身的各個(gè)部位,組成膠原纖維的主要成分是膠原蛋白。新鮮時(shí)呈白色,故一般稱為白色纖維。在HE染色中被染為淡紅色。它的性質(zhì)是具有韌性及緊固性,因此它能夠抵抗的牽拉力而不至于撕裂或拉斷它們常聚集成粗細(xì)不等的束,
石蠟切片HE染色技術(shù)服務(wù)2019/12/20
技術(shù)服務(wù)介紹蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining),簡稱HE染色法,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中基本、使用廣泛的技術(shù)方法。服務(wù)流程(1)樣本接收:石蠟切片、細(xì)胞爬片、冰凍切片。(2)實(shí)驗(yàn)步驟:脫蠟至水—伊紅染色—染核(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:染色好的玻片客戶需知1、注意細(xì)胞核的分化程度;2、注意蘇木素和
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