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優(yōu)誓(北京)生物技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)使用時(shí)需注意點(diǎn)2020/07/22
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)在使用時(shí)需要注意點(diǎn)。1.臺(tái)式凍干機(jī)要將主機(jī)放置于桌面上,真空泵放置于地面上。如果出現(xiàn)突然停電時(shí),二者的高度差能阻止真空泵返油。2.凍干機(jī)主機(jī)一般采用風(fēng)冷式全封閉制冷系統(tǒng),制冷劑為新型無氟制冷劑,環(huán)境溫度不要超過30℃,否則會(huì)影響制冷機(jī)正常工作。3.主機(jī)安裝時(shí)左側(cè)、右側(cè)、后面與墻壁的距離應(yīng)在20公分以上,保證正常通風(fēng)散熱。4.降低真空泵噪音,減輕震動(dòng),可以在真空泵下面墊一些軟性泡沫板、紙板等。5.操作過程中不要頻繁開關(guān),如果因?yàn)殄e(cuò)誤操作造成制冷機(jī)停止運(yùn)轉(zhuǎn),不要馬上啟動(dòng),等待二十分鐘后在
體外診斷試劑之生物芯片2020/07/21
生物芯片主要包括DNA芯片、蛋白芯片、組織芯片和細(xì)胞芯片等。生物芯片診斷試劑產(chǎn)品基本可分成二個(gè)部分,一部分是芯片,另一部分檢測(cè)用工作液。生物芯片工作液配制包括:1.芯片生產(chǎn)所需試劑,包括細(xì)胞培養(yǎng)基,探針制備試劑,陣列制作和固定試劑等。2.樣品處理試劑,芯片檢測(cè)靶分子分為核酸和蛋白質(zhì)。檢測(cè)核酸的樣品處理試劑包括臨床取樣,DNA提取或RNA提取試劑,逆轉(zhuǎn)錄試劑,PCR擴(kuò)增試劑,核酸標(biāo)記試劑等;檢測(cè)蛋白的處理試劑包括取樣試劑,蛋白稀釋液以及特殊試劑等。3.反應(yīng)液:檢測(cè)核酸時(shí)的反應(yīng)液包括預(yù)雜交液,雜交液
熒光PCR凍干試劑形式及要點(diǎn)2020/07/19
熒光PCR凍干試劑研發(fā)要點(diǎn):1.倉(cāng)儲(chǔ)溫度設(shè)計(jì)。2.凍干保護(hù)劑篩選。3.容器設(shè)計(jì)。4.生產(chǎn)環(huán)境設(shè)計(jì)、設(shè)備設(shè)計(jì)。熒光PCR凍干試劑形式有西林瓶?jī)龈?,八連管凍干,凍干微芯等。下面簡(jiǎn)單的介紹一下凍干微芯的優(yōu)點(diǎn)。能準(zhǔn)確定量,單人單份,產(chǎn)品使用方便,可實(shí)現(xiàn)特殊工藝處理,防止吸潮,對(duì)包材沒有要求,可以分裝到八連管、微流控芯片、各種生物芯片、卡、流式管、96孔板等包材里,而且可以實(shí)現(xiàn)常溫儲(chǔ)存。熒光PCR凍干試劑的凍干機(jī)技術(shù)要點(diǎn):1.完整的PAT控制技術(shù),可對(duì)凍干過程進(jìn)行完整的控制和分析監(jiān)控。包括預(yù)凍全過程控制、
實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)品稀釋法2020/07/19
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料,利用熒光信號(hào)積累對(duì)PCR反應(yīng)的過程,進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)現(xiàn)起始模板的準(zhǔn)確定量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋方法依次是選擇目標(biāo)、提取/PCR、純化、測(cè)試濃度、調(diào)整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間,覆蓋全部樣品濃度區(qū)間。和大家在分享一下10倍連續(xù)梯度稀釋方法:1V原液(標(biāo)準(zhǔn)品為i)+9V稀釋緩沖液,得到標(biāo)準(zhǔn)品為ii。1V標(biāo)準(zhǔn)品ii+9V稀釋緩沖液,得到標(biāo)準(zhǔn)品為iii,1V標(biāo)準(zhǔn)品iii+9V稀釋緩沖液,得到標(biāo)準(zhǔn)品為iv,1
熒光PCR之常用探針2020/07/18
熒光PCR技術(shù)擁有特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),已成為了分子生物學(xué)研究的重要工具。常用的探針有全基因組核酸探針、克隆探針、寡核苷酸探針、單鏈RNA探針、cDNA探針、蛋白質(zhì)探針以及酶探針。常用的幾種探針都有各自的優(yōu)點(diǎn)。例如酶探針中,分子信標(biāo)核酶探針常用,優(yōu)點(diǎn)是設(shè)計(jì)及操作簡(jiǎn)單,能準(zhǔn)確靈敏地反應(yīng)核酶切割反應(yīng)過程,為核酶篩選及切割動(dòng)力學(xué)研究提供直接依據(jù)。例如RNA探針一般都是單鏈,具有許多DNA單鏈探針?biāo)鶝]有的優(yōu)點(diǎn),主要是:RNA:DNA雜交體比DNA:DNA雜交體
實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng)2020/07/17
實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)需要先制備混合反應(yīng)液,大劑量包裝的反應(yīng)試劑,使用前進(jìn)行分裝,盡量減少試劑的反復(fù)凍融。建議所有樣本要有三個(gè)重復(fù)。實(shí)驗(yàn)操作過程時(shí)需注意以下幾點(diǎn),有利于避免實(shí)驗(yàn)污染問題。1.用稀釋的漂白劑或凈化劑擦拭凈化臺(tái)。2.在的配有紫外燈超凈式或者超靜臺(tái)中準(zhǔn)備樣品,理想的是樣品的準(zhǔn)備與PCR的擴(kuò)增分開在不同的區(qū)域完成。3.在樣品制備和配制反應(yīng)過程中要勤換手頭。4.勤用稀釋的漂白劑擦拭移液器。5.只使用PCR級(jí)的水和PCR試劑進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)。5.用帶旋蓋的EP管稀釋和配制反應(yīng)液。6.在進(jìn)行PC
熒光PCR實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟2020/07/16
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)所需的耗材有八連管,光學(xué)級(jí)八連管蓋子,光學(xué)級(jí)96孔板封膜,96孔板等。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)過程分為RAN的提取,反轉(zhuǎn)錄,熒光定量PCR反應(yīng),數(shù)據(jù)分析。做熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)有幾個(gè)關(guān)鍵步驟需要注意1.應(yīng)有合適數(shù)目的生物學(xué)重復(fù)及正確的對(duì)照樣品設(shè)置2.樣品的獲得應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)流程中對(duì)采樣,處理和保存的要求及確保重復(fù)性并減小重復(fù)樣品間的標(biāo)準(zhǔn)偏差。3對(duì)RAN的純度和完整性進(jìn)行質(zhì)量控制。4.將總RAN反轉(zhuǎn)錄成cDNA的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。5.試驗(yàn)中正確的引物設(shè)計(jì),引物退火溫度確定,基因擴(kuò)增效率摸索。6.
多重?zé)晒釶CR2020/07/14
多重?zé)晒釶CR也叫多重引物熒光PCR,主要用于多種病院微生物的同時(shí)檢測(cè)或鑒定某些病原微生物、某些遺傳病。其優(yōu)點(diǎn)是解決不同類型的核酸,需要多次擴(kuò)增的情況,不僅節(jié)省了時(shí)間,還節(jié)約了耗材成本。并且多重?zé)晒釶CR試劑凍干后,方便運(yùn)輸,穩(wěn)定性好。多重?zé)晒釶CR的原理是在同一PCR反應(yīng)體系里加上兩對(duì)以上的引物、探針,從而對(duì)兩種或兩種以上的不同核酸片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增。目前,基于熒光探針的多重?zé)晒釶CR試劑基本都是對(duì)同一種類型的核酸進(jìn)行檢測(cè),如都針對(duì)DNA類的核酸或都針對(duì)RNA類的核酸。在做多重?zé)晒釶CR試劑凍
熒光定量PCR凍干保護(hù)劑的篩選及優(yōu)化2020/07/13
在做熒光定量PCR凍干時(shí),先要對(duì)凍干保護(hù)劑進(jìn)行篩選,可采用的凍干保護(hù)劑(大加注量)包含:5wt.%的甘油、100mg/mL的海藻糖、5mmol/L的DTT、1wt.%牛血清白蛋白、0.3wt.%Proclin300、1wt.%甲酰胺等。篩選完凍干保護(hù)劑后需要進(jìn)行優(yōu)化,舉個(gè)例子講一下凍干保護(hù)劑的優(yōu)化。先將各種凍干保護(hù)劑稀釋成多組不同的濃度,與配置好的反應(yīng)試劑混勻,然后進(jìn)行無菌分裝,200ul的8連管中,每管加入20ul。凍干后根據(jù)凍干樣品的性質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)。Pilot7-12T凍干機(jī)應(yīng)用于醫(yī)療,涉及產(chǎn)
PCR試劑凍干過程2020/07/12
PCR技術(shù)是一種在體外模擬DNA復(fù)制過程的核酸過程技術(shù)。PCR技術(shù)應(yīng)用于不對(duì)稱PCR制備單鏈DNA,反向PCR測(cè)定未知DNA區(qū)域,反轉(zhuǎn)錄PCR,cDNA末端快增技術(shù)等,PCR試劑包括:1.各種提取dna的常用試劑和純化dna所用的試劑。2.PCRtaq酶,dntp(四種堿基),緩沖試劑(buffer),引物。3.瓊脂糖,聚丙烯酰胺凝膠,aps,tmed,eb等。在做其中一類PCR試劑凍干時(shí),先將裝有PCR試劑的西林瓶放入凍干機(jī)倉(cāng)內(nèi),預(yù)凍要大約經(jīng)過40-60分鐘,隔板溫度大約降到-50℃左右,預(yù)凍
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)操作法之開機(jī)操作2020/07/06
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)操作簡(jiǎn)單易懂,即使是沒有使用過凍干機(jī)也能很快掌握操作法。下面簡(jiǎn)單介紹下實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)FD-2C開機(jī)操作法。開機(jī)操作時(shí),先要連接好總電源線,打開后側(cè)的總電源開關(guān),這時(shí)顯示窗開始顯示冷阱溫度。在按一下制冷機(jī)開關(guān),制冷機(jī)開始運(yùn)轉(zhuǎn),此儀器為雙極制冷,需要注意的是大約20分鐘后第二極制冷開始運(yùn)轉(zhuǎn)。為使冷阱具有充分吸附水的能力,在第二極制冷運(yùn)轉(zhuǎn)后,預(yù)冷時(shí)間要不少于30分鐘。在按一下真空計(jì)開關(guān),真空度顯示為999。預(yù)冷結(jié)束后,將準(zhǔn)備好的制品置于物料盤中,在將有機(jī)玻璃筒罩上。這時(shí)按下快速充氣閥上的按片
凍干制品的關(guān)鍵屬性2020/07/02
凍干制品的關(guān)鍵屬性影響著整個(gè)凍干過程。凍干質(zhì)量參數(shù)是否能達(dá)成,是由關(guān)鍵屬性決定的。凍干制品關(guān)鍵屬性:物理性質(zhì)包括粒徑、形態(tài)、粒徑分布、不同PH值下的溶解度、含水率值、外觀要求、吸濕性、共熔點(diǎn)、共晶點(diǎn)、玻璃態(tài)轉(zhuǎn)換溫區(qū)、塌陷溫區(qū)、倉(cāng)儲(chǔ)玻璃態(tài)轉(zhuǎn)換溫區(qū)、晶型等。化學(xué)性質(zhì)包括酸堿解離常數(shù)、對(duì)酸堿光照氧濕熱等的穩(wěn)定性。生物性質(zhì)包括不同PH值對(duì)活性影響、不同升降溫速率對(duì)活性影響、倉(cāng)儲(chǔ)溫度對(duì)活性影響、油水分配系數(shù)、膜通透性、生物利用度及常用輔料活性保持值。凍干研發(fā)項(xiàng)目涉及面廣且復(fù)雜,博醫(yī)康凍干技術(shù)將從應(yīng)用開發(fā)技
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)之鐘罩凍干機(jī)2020/06/29
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)之鐘罩凍干機(jī),一般在大學(xué)實(shí)驗(yàn)室,科研研究所等使用較多。其優(yōu)點(diǎn)是體積較小,預(yù)算成本低,性能穩(wěn)定,可滿足實(shí)驗(yàn)要求。適合凍干水溶性溶液、懸濁液或糊狀物質(zhì),共晶點(diǎn)溫度高于-20℃。根據(jù)不同類型的凍干制品選擇適用的鐘罩凍干機(jī)。如選用不銹鋼盤可凍干散裝物料,與帶壓蓋的有機(jī)玻璃干燥室組合可凍干西林瓶,與帶掛瓶的有機(jī)玻璃干燥時(shí)組合可凍干在燒瓶?jī)?nèi)的樣品,與T型架附件組合可凍干安瓿瓶。鐘罩凍干機(jī)FD-1A-50特點(diǎn):臺(tái)式設(shè)計(jì),緊湊,占用臺(tái)面小。外形美觀,人體工學(xué)設(shè)計(jì),操作方便。品牌全封閉壓縮機(jī),高效可靠
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)真空度排除法2020/06/22
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)真空度達(dá)不到指標(biāo)的故障排除法:1檢查放氣閥是否關(guān)緊,可在抽氣過程中反復(fù)開、關(guān)該閥,讓外界空氣吹沖閥孔,吹除閥內(nèi)可能有的雜質(zhì),從而保證閥的密封。2真空泵與主機(jī)之間由真空管連接,檢查連接處的卡箍是否擰緊,右側(cè)抽氣口的不銹鋼接頭,要順時(shí)針方向擰緊。3檢查玻璃罩底面是否光潔平整,橡膠密封圈是否破損,在真空泵開始工作的時(shí)候,用力下壓玻璃罩一會(huì),有利于密封。4檢查真空泵油質(zhì)量,從視油鏡觀察泵油是否渾濁或混入雜質(zhì),一般情況下連續(xù)工作200小時(shí),就需要更換真空泵油。實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)FD-1A-80特點(diǎn):
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)裝載物料須知2020/06/19
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)一般配置分為主機(jī)、真空泵、凍干倉(cāng)、真空管、物料盤、外掛瓶等。根據(jù)裝載物料的不同形式分為普通型、壓塞型,多岐管型、多岐管壓塞型、T型多岐管型。凍干前需要知道五種不同類型的實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)裝載物料的量,如FD-2系列實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)普通型的物料干燥盤直徑24mm,共6層,可放置物料約1800ml(物料厚10mm)或者放置直徑22mm的瓶子大約384只。壓塞型的物料干燥盤直徑為170mm共3層,可放置物料約650ml(物料厚10mm),或者放置直徑22mm的瓶子大約135只。多岐管型配置8個(gè)橡膠閥
怎樣選用實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)2020/06/17
實(shí)驗(yàn)室凍干機(jī)從外形上可分為臺(tái)式和立式,例如博醫(yī)康FD系列凍干機(jī)的臺(tái)式凍干機(jī)和立式凍干機(jī)一般冷阱溫度為-50℃,-85℃或-110℃。捕水能力一般為3L-6L/24H,真空度一般為<10Pa,凍干面積一般為0.08㎡-0.8㎡之間。按照凍干不同種類制品又可分為普通型,壓塞型,掛瓶普通型,掛瓶壓塞型,多岐管型。凍干散裝物料可選普通型,裝載西林瓶物料可選壓塞型,裝載外掛瓶物料可選掛瓶普通型,如果是裝載散裝物料,瓶裝物料,外掛瓶物料需選掛瓶壓塞型,裝載外掛瓶及安瓿瓶物料可選多岐管型。五種類型凍干機(jī)的共晶
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