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2024
01-29細(xì)胞學(xué)堂 | 細(xì)胞培養(yǎng)中的小黑點(diǎn)，原來是它
提起細(xì)胞培養(yǎng)，相信很多老師都遇到過培養(yǎng)液中的“小黑點(diǎn)”，因無法確定它的身份而頭痛不已。本期細(xì)胞學(xué)堂將為大家揭秘這些黑點(diǎn)究竟是什么，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。01血清沉淀血清在融解過程中會(huì)產(chǎn)生大量的析出物，呈現(xiàn)出小顆粒樣的東西，甚至呈纖維樣，這是由于血清融解后導(dǎo)致的蛋白、鹽類物質(zhì)的析出。血清融解時(shí)混勻血清靜置融解不混勻，出現(xiàn)黑點(diǎn)顯微鏡下的血清沉淀物影響因素通常血清析出物的多少與融解方法有關(guān)。通過4℃冰箱解凍和溶解過程持續(xù)搖晃混勻，可以有效避免沉淀產(chǎn)生，而37℃靜置混勻則會(huì)有較多沉淀物析出。處理方法血2024
01-25細(xì)胞學(xué)堂 | BV2細(xì)胞形態(tài)問題大揭秘
BV2細(xì)胞系由E·Blasi于1990年建立，應(yīng)用小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染v-raf/v-myc獲得永生化，在模擬神經(jīng)系統(tǒng)疾病和研究相關(guān)疾病機(jī)制方面應(yīng)用廣泛。BV2細(xì)胞保留有小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞多種形態(tài)、表征和功能特征，免疫組化結(jié)果顯示，BV2細(xì)胞為MAC1、MAC2陽性，MAC3、膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂陰性。培養(yǎng)BV2細(xì)胞時(shí)，最常遇到的問題就是細(xì)胞形態(tài)異常，通常伴隨著細(xì)胞形狀改變、拉絲較多等，對大家的實(shí)驗(yàn)造成影響。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了BV2細(xì)胞的培養(yǎng)方法、常見問題及處2024
01-242024
01-162023
12-282023
12-26細(xì)胞學(xué)堂 | A-498細(xì)胞知識(shí)盤點(diǎn)
A-498（人腎癌細(xì)胞）細(xì)胞由Aaronson·S建立，是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態(tài)的細(xì)胞系。該細(xì)胞系是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主，在腫瘤研究中具有一定的應(yīng)用價(jià)值，常作為腎細(xì)胞癌研究的模型。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了A-498細(xì)胞的培養(yǎng)條件與傳代、凍存步驟及常見應(yīng)用，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞形態(tài)A498細(xì)胞貼壁生長，呈上皮樣形態(tài)，細(xì)胞鋪開面積大，單位面積細(xì)胞總數(shù)量少，少量細(xì)胞有觸角；低密度時(shí)可觀察到單個(gè)細(xì)胞清晰的邊緣，密度大于100%時(shí)邊緣不清晰，細(xì)胞與細(xì)胞之間沒有間隙；A2023
12-19細(xì)胞學(xué)堂 | 實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞計(jì)數(shù)指南
細(xì)胞計(jì)數(shù)是實(shí)驗(yàn)室中常見的一項(xiàng)操作，用于確定樣品中細(xì)胞的數(shù)量，判斷細(xì)胞數(shù)量是否滿足實(shí)驗(yàn)需求。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了幾種常見的計(jì)數(shù)方法：人工手動(dòng)計(jì)數(shù)法、自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法，以及懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞在不同密度下的鏡下視野的參考范圍，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。1人工手動(dòng)計(jì)數(shù)法即通過肉眼觀察顯微鏡視野中的細(xì)胞數(shù)量，從而進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。操作步驟1將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上；2輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞均勻分布；吸出10μL-20μL左右的細(xì)胞懸液滴在蓋片邊緣，使細(xì)胞懸液充滿蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間；3靜2023
11-28直播答疑 | 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)要點(diǎn)解析
11月16日，普諾賽直播間為大家介紹了懸浮細(xì)胞的生長特點(diǎn)、培養(yǎng)注意事項(xiàng)，并通過THP-1、NK-92、NCI-H209三個(gè)細(xì)胞案例，深入講解了懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要點(diǎn)。直播回放可移步至B站-“普諾賽生物”進(jìn)行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細(xì)解答。如有其他問題，也歡迎大家在推文底部留言，我們將在線解答。Q1傳代時(shí)，細(xì)胞密度比較低，但是培養(yǎng)基又變黃了，怎么辦？細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞量較少，但培養(yǎng)基變黃較快，可以從以下3個(gè)方面進(jìn)行排查：?檢查培養(yǎng)基成分是否正常，如N2023
11-28細(xì)胞學(xué)堂 | 培養(yǎng)B16系列細(xì)胞必看知識(shí)點(diǎn)
B16系列細(xì)胞屬于小鼠黑色素瘤細(xì)胞系，是源自C57小鼠的一種皮膚癌細(xì)胞，常用于腫瘤生物學(xué)研究。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了B16系列細(xì)胞的培養(yǎng)方法與注意事項(xiàng)，B16細(xì)胞黑色素的形成原因及解決方法，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。01B16系列細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)條件RPMI-1640(PM150110)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)；生長特性貼壁生長，生長迅速，能產(chǎn)生黑色素；傳代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min，推薦傳代比例1:3-1:4；凍存推薦凍存密度2023
11-202023
11-14細(xì)胞學(xué)堂 | 手把手教你培養(yǎng)SV-HUC-1
SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細(xì)胞)，是由猿猴空泡病毒40轉(zhuǎn)染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細(xì)胞，而建立起來的永生化細(xì)胞系。其分化特性與正常細(xì)胞相似，培養(yǎng)簡單，可無限傳代，卻不屬于腫瘤細(xì)胞[1]?；A(chǔ)信息?生長培養(yǎng)基：Ham'sF-12K＋10%FBS＋1%P/S?生長特性：貼壁，上皮細(xì)胞樣?推薦傳代比例：1:2-1:4?推薦換液頻率：2~3次/周?培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃?凍存條件：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSOSV-HUC-1細(xì)胞正常生長細(xì)胞傳2023
11-14直播答疑 | 原代細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方案
原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的首-次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是細(xì)胞系建立的第一步。在9月22日開播的“原代細(xì)胞常見問題解決方案”課程中，有很多老師就原代細(xì)胞培養(yǎng)問題提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細(xì)解答。臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞需要包被嗎？選用什么包被比較好？臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞建議包被，建議選用0.1%明膠包被，包被的細(xì)胞形態(tài)會(huì)比不包被的好看。角質(zhì)細(xì)胞需要包被嗎？角質(zhì)細(xì)胞生長類似上皮細(xì)胞，營養(yǎng)環(huán)境要求高，建議使用膠原蛋白包被。細(xì)胞原皿狀態(tài)很好，傳代后細(xì)胞邊界不清楚是什么原因？感覺虛化的很快。2023
11-032023
10-23細(xì)胞學(xué)堂 | 微血管內(nèi)皮細(xì)胞知識(shí)盤點(diǎn)
微血管內(nèi)皮細(xì)胞（microvascularendothelialcells,MVECs）構(gòu)成了血液與組織液之間的物理屏障，而且在機(jī)體的凝血與抗凝血、致炎與抗炎及免疫應(yīng)答等方面起著十分重要的作用，其體外培養(yǎng)模型廣泛應(yīng)用于相關(guān)研究。但由于不同組織器官的微血管內(nèi)皮細(xì)胞之間存在較大的異質(zhì)性，同時(shí)微血管內(nèi)皮細(xì)胞因解剖部位不同，在形態(tài)學(xué)、表型和功能上等方面也存在明顯異質(zhì)性，不同來源的血管內(nèi)皮細(xì)胞之間是不可相互替代的，主要包括腸、肺、心臟、腦、脈絡(luò)膜、視網(wǎng)膜、真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞等。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了微血2023
10-082023
09-28細(xì)胞學(xué)堂 | 如何判斷細(xì)胞狀態(tài)
培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，由于培養(yǎng)的環(huán)境各不相同，同時(shí)細(xì)胞各階段的形態(tài)也存在一定差異，沒有一個(gè)確定的參照物去比對，很多老師同學(xué)也無法確定自己所養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)是否正常。那么如何判斷細(xì)胞狀態(tài)是正常還是異常呢？本期細(xì)胞學(xué)堂將詳介紹幾種常用的判斷方法，學(xué)會(huì)這幾招，輕松辨別細(xì)胞狀態(tài)！01如何判斷細(xì)胞活率臺(tái)盼藍(lán)染色法臺(tái)盼藍(lán)是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性，可以檢測出細(xì)胞是否存活。正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常2023
09-202023
09-012023
08-244T1 （小鼠乳腺癌細(xì)胞）的研究及其在癌癥治療中的應(yīng)用
乳腺癌是全球女性最常見的癌癥之一，對公眾健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。在多種乳腺癌亞型中，4T1（小鼠乳腺癌細(xì)胞）的生物學(xué)特性及腫瘤轉(zhuǎn)移潛能引起了科研人員的特別關(guān)注。4T1細(xì)胞來源于410-6乳腺癌細(xì)胞，其能在BALB/c小鼠中產(chǎn)生自發(fā)性的肺轉(zhuǎn)移，這一特性使其在研究乳腺癌轉(zhuǎn)移機(jī)制及探索新型治療策略方面成為一個(gè)有價(jià)值的模型。4T1（小鼠乳腺癌細(xì)胞）具有高度的侵襲性和轉(zhuǎn)移潛能，其通過激活Src通路、誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）以及引發(fā)免疫逃避等機(jī)制促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。此外，4T1細(xì)胞還能產(chǎn)生大量的炎性細(xì)胞因子，如IL2023
08-23細(xì)胞學(xué)堂|肺泡上皮細(xì)胞知識(shí)盤點(diǎn)
肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。肺泡或肺的氣體交換表面由I型肺泡上皮(ATⅠ,AT1)、II型肺泡上皮(ATⅡ,AT2)和微血管內(nèi)皮細(xì)胞組成。其中，ATⅠ細(xì)胞又稱小肺泡細(xì)胞，其主要作用是參與構(gòu)成氣血屏障、進(jìn)行氣體交換；ATⅡ細(xì)胞又稱大肺泡細(xì)胞，是肺泡上皮中的祖細(xì)胞，具有很強(qiáng)的增殖和分化潛能，可分化成ATⅠ，在維持肺臟穩(wěn)態(tài)以及肺損傷修復(fù)過程中起著至關(guān)重要的作用。圖1肺泡模式圖圖2肺泡細(xì)胞的外觀：上皮I型細(xì)胞(I)、上皮II型細(xì)胞(掃一掃訪問手機(jī)商鋪
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