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2023
05-122023
05-052023
04-28細(xì)胞學(xué)堂 | 培養(yǎng)基顏色改變意味著什么
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基的顏色變化往往對應(yīng)著細(xì)胞狀態(tài)。大多數(shù)情況下,我們所見的培養(yǎng)基都呈紅色,這是因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)基的PH值大多在7.4左右,添加了酚紅的培養(yǎng)基的顏色就是紅色。不同成分培養(yǎng)基的顏色會有差異,例如DMEM會比1640顏色深一點(diǎn),主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導(dǎo)致。當(dāng)然還有部分培養(yǎng)基不含有酚紅,呈現(xiàn)的就是無色或者淡黃色。圖1:DMEM培養(yǎng)基正常顏色很多時候,培養(yǎng)基顏色并不是我們所見的紅色,而是偏紫或偏黃,不同顏色培養(yǎng)基究竟對應(yīng)何種細(xì)胞狀態(tài)呢?本期細(xì)胞學(xué)堂將為您揭曉培養(yǎng)基顏色變化的2023
04-242023
04-21胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中具有廣泛而顯著的作用
胎牛血清是一種從牛胚胎中提取的血清,是細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛使用的補(bǔ)充物之一。胎牛血清的主要成分是特定種類的蛋白質(zhì)、小分子物質(zhì)和其他生物化學(xué)物質(zhì),其中包含的生長因子等成分可以幫助維持培養(yǎng)基中細(xì)胞的生長和增殖。由于胎牛血清的復(fù)雜性和多變性,它也成為了細(xì)胞培養(yǎng)中存在的一些問題的根源。在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,培養(yǎng)基的主要作用是提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)以及生長因子等對于細(xì)胞生長和增殖至關(guān)重要的成分。在這個過程中,添加胎牛血清作為培養(yǎng)基的補(bǔ)充物,不僅可以提高細(xì)胞存活率,還可以促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和移行等許多生物學(xué)現(xiàn)象的發(fā)生。2023
04-14大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞都具備怎樣的研究價值?
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rBM-MSCs)是一種來源于大鼠骨髓的干細(xì)胞。它們具有自我更新、多向分化和免疫調(diào)節(jié)能力等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)和組織工程等領(lǐng)域。rBM-MSCs可以通過骨髓采集和體外擴(kuò)增等方法獲得。與其他來源的干細(xì)胞相比,rBM-MSCs具有更好的生長性能和穩(wěn)定性。同時,它們還具有成本低廉、操作簡單等優(yōu)點(diǎn),為干細(xì)胞治療和組織工程研究提供了重要的材料基礎(chǔ)。大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用非常廣泛。例如,在骨損傷修復(fù)方面,rBM-MSCs可通過分化為成骨細(xì)胞來促進(jìn)骨的再生。在肝2023
04-11大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和擴(kuò)增方法
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一類具有自我更新、多向分化潛能和免疫調(diào)節(jié)功能的成年干細(xì)胞,被廣泛應(yīng)用于組織再生和干細(xì)胞治療領(lǐng)域。其中,rMSCs由于其易于獲取、操作簡便和多向分化潛能等優(yōu)點(diǎn),成為了研究的重要對象。一、大鼠rMSCs的來源1、骨髓:大鼠骨髓中含有豐富的MSCs,可以通過骨髓穿刺或摘除骨頭的方式獲取。2、脂肪:大鼠脂肪組織中也可以分離出一定數(shù)量的MSCs,比較適合于治療軟組織損傷。3、胎盤:在大鼠胚胎發(fā)育過程中,其胎盤中也含有MSCs,可以在胎盤收獲時進(jìn)行分離。二、大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、2023
04-062023
03-24細(xì)胞學(xué)堂 | 貼壁細(xì)胞6大培養(yǎng)難題原因和解決方法
貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)時要貼附于培養(yǎng)(瓶)器皿壁上,細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展,然后開始有絲分裂,并很快進(jìn)入對數(shù)生長期。貼壁細(xì)胞因其培養(yǎng)過程較為繁瑣,所以培養(yǎng)時更容易出現(xiàn)問題。以下總結(jié)了貼壁細(xì)胞培養(yǎng)中常見的6種問題,并詳細(xì)介紹原因和解決方法,若培養(yǎng)時遇到這些情況,可參考對應(yīng)解決方法處理。01傳代后細(xì)胞全部飄起解決方法:檢查所使用的培養(yǎng)基的顏色是否偏紫色(如圖1),檢查瓶蓋是否透氣,不透氣瓶蓋是否被擰松。圖1.培養(yǎng)基顏色偏紫通常培養(yǎng)基偏堿,顏色就會偏紫,主要是因?yàn)榕囵B(yǎng)基里的酚紅指示劑遇酸變黃、遇堿變紫,培養(yǎng)基2023
03-212023
03-17細(xì)胞學(xué)堂 | 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)異常解決方法
懸浮細(xì)胞大多胞體呈圓形,不貼于支持物上,呈懸浮生長,容易大量繁殖。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)雖比貼壁細(xì)胞少了消化的步驟,但培養(yǎng)起來同樣不易。有碎片、形態(tài)改變、生長速度慢、細(xì)胞貼壁……每一種異常都牽動著我們的心。因此本期細(xì)胞學(xué)堂整理了懸浮細(xì)胞收貨和培養(yǎng)過程中的常見問題,并針對各個問題列出解決辦法,帶你逐個擊破!運(yùn)輸常見問題及處理方法1碎片多處理方法:懸浮細(xì)胞受到運(yùn)輸或者其他因素導(dǎo)致細(xì)胞損傷時,容易產(chǎn)生細(xì)胞碎片,碎片可通過低速離心(800~1000rpm,3min)去除;低速離心同時也會丟失細(xì)胞,故細(xì)胞密度低的時2023
03-17如何培養(yǎng)原代小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞?
小鼠骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。那么它是如何培育的呢?1、材料成年小鼠4只、胎牛血清、L-DMEM、胰蛋白酶、PBS、Percool細(xì)胞分離液、雙抗、8%碳酸氫鈉溶液。2、儀器倒置顯微鏡、CO2恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺、生物顯微鏡、低溫高速離心機(jī)、無菌操作臺、血球計數(shù)板、6孔培養(yǎng)板。3、方法骨髓收集→Percoll密度梯度離心法分離純化骨髓間充質(zhì)2023
03-14人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞被廣泛應(yīng)用于組織工程
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為一個研究熱點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)和組織工程(特別是在骨、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)等疾病的領(lǐng)域)。作為細(xì)胞模型被應(yīng)用于增殖、移植和分化研究,以及體外的免疫反應(yīng)的鑒定。這是一種能分化成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的多能干細(xì)胞。其具有強(qiáng)大的增殖能力和免疫調(diào)節(jié)能力,因此被廣泛應(yīng)用于組織工程,細(xì)胞治療和基因治療。人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞取自成人的骨髓,其擁有強(qiáng)大的自我更新能力并具有多向分化潛能。干細(xì)胞(BMSC)分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃2023
03-072023
03-052023
02-16細(xì)胞學(xué)堂 | 脫落的293T細(xì)胞如何恢復(fù)正常
293T[HEK-293T](人胚腎細(xì)胞)是293[HEK-293]細(xì)胞株插入了SV40T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。該細(xì)胞廣泛應(yīng)用于病毒包裝,因其比較容易轉(zhuǎn)染,也是常用的表達(dá)研究外源基因的細(xì)胞株。圖1.293T正常生長圖片該細(xì)胞因?yàn)橘N壁松散,若購買常溫細(xì)胞,收貨時有可能大部分細(xì)胞脫離培養(yǎng)瓶壁,顯微鏡下找不到細(xì)胞,只能看到肉眼可見的細(xì)胞團(tuán),是正?,F(xiàn)象(如圖2)。圖2.293T收貨聚團(tuán)(圖由客戶提供,僅供學(xué)習(xí)參考)參照以下方式處理即可恢復(fù)正常:1收到細(xì)胞后請先置于培養(yǎng)箱中穩(wěn)定22023
02-142023
02-03細(xì)胞學(xué)堂 | RAW 264.7誘導(dǎo)極化及鑒定大全
RAW264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)是破骨細(xì)胞、炎癥研究最-常用的體外模型之一,被廣泛用于研究風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、骨質(zhì)溶解、牙周炎等骨骼疾病。極化方式巨噬細(xì)胞是具有異質(zhì)性的一類免疫細(xì)胞,在體內(nèi)外不同環(huán)境影響下可極化為不同表型參與機(jī)體生理、病理反應(yīng)。從激活方式上分為經(jīng)典激活的巨噬細(xì)胞M1和選擇性激活的巨噬細(xì)胞M2。1M1型分化細(xì)菌和脂多糖(LPS)可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M1型分化,產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子,抵抗病原入侵,但也會造成機(jī)體損傷,在實(shí)驗(yàn)中可采用2.5ng/mLIFN-γ和200ng/2022
12-13文獻(xiàn)解讀 | J Exp Med發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞抑制肝纖維化的作用及機(jī)制
肝炎病毒感染、酒精性或非酒精性脂肪性肝炎和膽道梗阻都會造成慢性肝損傷,使肝臟發(fā)生病理性的纖維化,進(jìn)而誘發(fā)肝纖維化的發(fā)生,最終導(dǎo)致肝硬化和肝功能衰竭。在肝纖維化進(jìn)程中,活化的肝星狀細(xì)胞在肝臟中沉積是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。同時,其他研究人員發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞通過直接接觸殺死早期激活或衰老的肝星狀細(xì)胞或誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡,表現(xiàn)出獨(dú)-特的抗纖維化能力。??前列腺素是由花生四烯酸經(jīng)過環(huán)氧合酶和前列腺素合成酶的連續(xù)反應(yīng)而得到的具有生物活性的脂類,其中前列腺素E2在免疫調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮著雙重作用,這種雙重作用的產(chǎn)生2022
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