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了解和認(rèn)識胎牛血清,特殊加工工藝血清,您知道幾種?2021/08/18
血清作用原理:正因為血清來源于動物,含有細(xì)胞培養(yǎng)中所需的各種營養(yǎng)(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等),所以奠定了血清是細(xì)胞培養(yǎng)實驗中最基本普遍試劑的基礎(chǔ)。血清通常用作細(xì)胞生長的添加物,擁有多種功能和用途,如:富含大分子蛋白,低分子量的營養(yǎng)素,作為氨基酸、碳水化合物、維生素的額外來源;提高介質(zhì)的緩沖能力;可結(jié)合或中和有毒成分;減少細(xì)胞氧化應(yīng)激,減少細(xì)胞凋亡;提供促進(jìn)生長的因子,有助細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境。▽成分表血清通過牛齡進(jìn)行分類,可大致分為:胎牛血清(FoetalBovineS
siRNA表達(dá)載體的構(gòu)建2021/08/04
siRNA表達(dá)載體的構(gòu)建siRNA表達(dá)載體構(gòu)建可以:(1)作為后基因組時代基因功能分析的有力工具;(2)應(yīng)用于基因組學(xué)、細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路分析;(3)用于藥物靶點篩選、疾病治療。實驗方法原理:多數(shù)的siRNA表達(dá)載體依賴三種RNA聚合酶III啟動子(polIII)中的一種,操縱一段小的發(fā)夾RNA(shorthairpinRNA,shRNA)在哺乳動物細(xì)胞中的表達(dá)。這三類啟動子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6啟動子和人H1啟動子。之所以采用RNApolIII啟動子是由于它可以在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)更多的
轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞,在2021年發(fā)表文章中的經(jīng)驗介紹2021/07/21
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
高效率轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞,在2021年發(fā)表文章中的經(jīng)驗介紹2021/07/21
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
RAW264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作步驟在已經(jīng)發(fā)表文章中的經(jīng)驗分享介紹2021/07/20
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
有關(guān)Raw264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染在2021年發(fā)表文章中的經(jīng)驗分享2021/07/20
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
如何轉(zhuǎn)染好RAW264.7細(xì)胞,在2021年發(fā)表文章中的經(jīng)驗總結(jié)2021/07/20
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
轉(zhuǎn)染raw264.7細(xì)胞相關(guān)專業(yè)知識在已經(jīng)發(fā)表文章中的經(jīng)驗分享2021/07/20
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
RAW264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA在2021年發(fā)表文章中的經(jīng)驗總結(jié)2021/07/20
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
轉(zhuǎn)染RAW264.7,發(fā)表文章中使用zeta life轉(zhuǎn)染試劑經(jīng)驗分享2021/07/19
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
RAW264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA在2021年發(fā)表文章中的經(jīng)驗總結(jié)2021/07/19
石河子大學(xué)動物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,在2021年發(fā)表文章到FrontiersinImmunology的學(xué)術(shù)期刊中科研者使用美國zetalife轉(zhuǎn)染試劑,高效率轉(zhuǎn)染質(zhì)粒DNA和siRNA到RAW264.7細(xì)胞,具體轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞方法經(jīng)驗如下:(注意:本文轉(zhuǎn)染實驗中使用的細(xì)胞數(shù)量、試劑用量和操作方法不適用于傳統(tǒng)lipo3000轉(zhuǎn)染試劑或類似產(chǎn)品)AllplasmidsandsiRNAs(20uM/uL)weretransfectedusingtheAdvancedDNARNATransfecti
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞(RAW264.7)的培養(yǎng)要點及高效轉(zhuǎn)染試劑2021/07/13
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞(RAW264.7)是通過Abelson鼠白血病病毒誘導(dǎo)BALB/c小鼠產(chǎn)生腫瘤后得到的細(xì)胞株。其在醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用十分普遍,是許多白血病相關(guān)研究模型的常用細(xì)胞株,在微生物學(xué)、免疫學(xué)等研究中也十分常用。但RAW264.7細(xì)胞形態(tài)和分化狀態(tài)多變,在實際培養(yǎng)中較難把握,給科研工作帶來了一定困難;且RAW264.7細(xì)胞很難轉(zhuǎn)染,許多研究者表示Lipofectamine2000根本轉(zhuǎn)不進(jìn)去,或者僅有不到10%的轉(zhuǎn)染效率。因此RAW264.7細(xì)胞的培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染方法就很值得去探討,本文
分析為何細(xì)胞狀態(tài)差2021/07/12
細(xì)胞狀態(tài)很差,常常出現(xiàn)的現(xiàn)象是:細(xì)胞邊緣不清晰、細(xì)胞不飽滿、折光性差、背景比較臟、黑點很多、細(xì)胞碎片多(細(xì)胞凋亡后的細(xì)胞碎片)、單個細(xì)胞內(nèi)有空泡(凋亡)且空泡比較多;如果細(xì)胞出現(xiàn)老化,也就是細(xì)胞比較扁平、增殖減緩、細(xì)胞核體積增大、細(xì)胞突觸變多,此時觀察到的細(xì)胞狀態(tài)也是不正常的?!鴪D1:背景很臟;▲圖2:有較多小黑點因此細(xì)胞狀態(tài)差只是對這些現(xiàn)象的一種籠統(tǒng)說法。究其根本,細(xì)胞狀態(tài)變差主要是由于兩種原因:1細(xì)胞營養(yǎng)條件不夠2細(xì)胞被污染了今天我們將深入分析影響細(xì)胞狀態(tài)的這些原因。一、營養(yǎng)條件不夠細(xì)胞營養(yǎng)
如何分辨和選擇穩(wěn)定性和質(zhì)量好的胎牛血清2021/07/08
由于質(zhì)量好的進(jìn)口特級胎牛血清具備穩(wěn)定性好、內(nèi)毒素低和較完善的檢測報告,無論是醫(yī)療機(jī)構(gòu)、生產(chǎn)研發(fā)機(jī)構(gòu)或者實驗室都可適用,所以穩(wěn)定性好的進(jìn)口特級胎牛血清受到各行各業(yè)用戶的推崇和喜愛。故分辨選擇好的胎牛血清顯得尤為重要,下邊就讓安培生物為您分析。1.外觀好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。2、總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高
原代細(xì)胞的培養(yǎng)與建系2021/07/07
原代細(xì)胞的培養(yǎng)與建系凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱之為原代細(xì)胞。細(xì)胞的純化或細(xì)胞克隆技術(shù)是細(xì)胞培養(yǎng)工作的基礎(chǔ)。原代細(xì)胞的取材人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。一、取材的基本要求.1.取材要注意新鮮和保鮮.2.應(yīng)嚴(yán)格無菌.3.防止機(jī)械損傷.4.去除無用組織和避免干燥.5.應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等.6.作好記錄二、各類組織的取材技術(shù)皮膚和粘膜的取材內(nèi)臟和實體瘤的取材血液細(xì)胞的取材骨髓、羊水、胸/腹水細(xì)胞取材動物
原代細(xì)胞培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的方法2021/07/07
原代培養(yǎng)原理將動物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。儀器、材料及試劑儀器:培養(yǎng)箱(調(diào)整至37℃),培養(yǎng)瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術(shù)器械、血球計數(shù)板、離心機(jī)、水浴箱(37℃)材料:動物組織塊試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清或胎牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒初代消化培養(yǎng)法1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化
轉(zhuǎn)染HGF-1牙齦成纖維細(xì)胞, 質(zhì)粒大小10646bp2021/07/05
1.可轉(zhuǎn)染極度難轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞,懸浮細(xì)胞,如T細(xì)胞,NK細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、THP-1等;2.可高效率轉(zhuǎn)染sirRNA、小分子到任何哺乳動物細(xì)胞;3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞后可10小時內(nèi)快速代謝的第三代新轉(zhuǎn)染試劑;轉(zhuǎn)染條件:細(xì)胞密度:60左右質(zhì)粒DNA濃度:648ng/ul質(zhì)粒DNA大?。?0646bp培養(yǎng)板:6孔板轉(zhuǎn)染試劑用量:8ul質(zhì)粒DNA用量:電訊轉(zhuǎn)染試劑:AD600150,AdvancedDNARNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染時間:48小時血清:z7010-500胎牛血清細(xì)胞凍存:CE70100T無血清細(xì)胞凍存液細(xì)
Advanced 系列高效 DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑操作說明2021/07/01
Advanced系列高效DNARNA轉(zhuǎn)染試劑操作說明產(chǎn)品名稱AdvancedDNARNATransfectionReagent包裝規(guī)格1.產(chǎn)品貨號:AD600025、AD600050、AD600075、AD600100、AD600150、AD600300;2.規(guī)格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1ml、1.5ml、3ml;儲存條件常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復(fù)凍融。材料準(zhǔn)備1.RNA濃度20uM/L。2.質(zhì)粒DNA濃度300ng-2ug/ul(注意:①溶解于無菌雙蒸水或超純水
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