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防爆冰箱了解多少？2021/08/11

對于冰箱，我們并不陌生，現(xiàn)在幾乎家家戶戶都有冰箱，這是一種常用家電，而防爆冰箱主要應(yīng)用在石油、化工、軍事、醫(yī)藥、科研、實驗室等領(lǐng)域，屬于特種冰箱。實驗室防爆冰箱用于儲存易燃、易爆、易蒸發(fā)、易腐蝕等化學(xué)試劑、實驗試劑等，適用于高校各實驗室、科研單位的實驗場所等，就是為了防止爆炸引起的人員或者財產(chǎn)上的損失。美菱生物醫(yī)療2~8℃防爆冰箱產(chǎn)品特點：全面防靜電：箱殼與內(nèi)襯、門殼及門內(nèi)襯均采用銅絞線連接，存儲空間內(nèi)各活動部件均為金屬制作。多種防爆方式：整機防爆，采用隔爆型、本質(zhì)安全型及澆封型三種防爆方式。不

染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）2021/08/11

染色質(zhì)免疫沉淀（chromatinimmunoprecipitationassay,ChIP）是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的方法。它的基本原理是在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。ChIP不僅可以檢測體內(nèi)反式因子與DNA的動態(tài)作用，還可以用來研究組蛋白的各種共價修飾與基因表達的關(guān)系。而且，ChIP與其他方

細胞周期的分析2021/08/11

細胞周期（cellcycle）是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。細胞分裂期又稱M期。細胞通過M期一分為二，有的可繼續(xù)分裂進行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細胞周期暫時停止分裂的一個階段。但在一定適宜刺激下，又可進入周期（圖1），合成DNA與分裂。G0期的特點為：在未受刺激的G0細胞，DNA合成與細胞分裂的潛力仍然存在；當(dāng)G0細胞受到刺激而增殖時，又

細胞凋亡檢測2021/08/11

細胞凋亡（apoptosis）指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用，它并不是病理條件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。下面介紹幾種常用的檢測細胞凋亡的方法。一、TUNEL法脫氧核糖核苷酸衍生物digoxin在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了報告酶（過氧化物酶或

蛋白磷酸化檢測的注意事項2021/08/02

1、樣本準備過程中防止蛋白質(zhì)降解和保留翻譯后修飾樣本準備過程中，細胞會釋放蛋白酶和/或去磷酸化酶，為了減少這些酶的活性，處理樣本的過程應(yīng)在冰上進行，并預(yù)先冷卻所有緩沖液，并且建議用含蛋白酶和磷酸酶抑制劑的裂解緩沖液。2、磷酸化特異性抗體的選擇選擇磷酸化特異性抗體時，選擇所要檢測位點的磷酸化抗體至關(guān)重要。磷酸化都會使蛋白質(zhì)的分子量增加80Da，檢查抗體是否檢測到磷酸化靶蛋白的分子量正確的條帶也很重要。3、誘導(dǎo)磷酸化課題設(shè)計可能需要在收獲前刺激細胞，以確保蛋白質(zhì)被磷酸化。例如，在特定細胞信號傳導(dǎo)途徑

Western blot之蛋白轉(zhuǎn)印二三事2021/08/02

蛋白轉(zhuǎn)印的方法蛋白轉(zhuǎn)印可選擇傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)、半干轉(zhuǎn)或快速半干轉(zhuǎn)方法。濕轉(zhuǎn)系統(tǒng)：適用于大多數(shù)各種分子量的常規(guī)蛋白轉(zhuǎn)印。轉(zhuǎn)印過程中凝膠和膜被浸入充滿轉(zhuǎn)印緩沖液的槽中。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)：凝膠和膜被夾在預(yù)先潤濕緩沖液的濾紙之間，濾紙與平板電極直接接觸。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)的安裝使用比濕轉(zhuǎn)簡單?？焖俎D(zhuǎn)印系統(tǒng)：快速轉(zhuǎn)印系統(tǒng)是最近發(fā)展出來的技術(shù)，使用專用設(shè)備、專用濾紙及專用緩沖液來快速有效地轉(zhuǎn)印蛋白。通常濾紙和濕潤的膜預(yù)先放在一次性包裝中，簡化了轉(zhuǎn)印“三明治”的組裝。轉(zhuǎn)印緩沖液轉(zhuǎn)印緩沖液包含強導(dǎo)電性化學(xué)緩沖試劑（例如Tris，CA

實驗室里的不明瓶瓶罐罐不要隨意洗?。?！2021/07/30

中山大學(xué)藥學(xué)院于7月27日發(fā)布通報，該院2021年7月27日發(fā)生一起實驗安全事故，實驗=室在清理通風(fēng)柜時發(fā)現(xiàn)之前畢業(yè)生遺留在燒瓶內(nèi)的未知白色固體，一博士研究生用水沖洗時發(fā)生炸裂，炸裂產(chǎn)生的玻璃碎片刺破該生手臂動脈血管，送醫(yī)救治傷情得到控制，無生命危險。與實驗室負責(zé)老師溝通分析，導(dǎo)致炸裂的未知白色固體中可能含有氫化鈉或氫化鈣，遇水發(fā)生劇烈反應(yīng)而炸裂。實驗室的瓶瓶罐罐清洗是科研工作者最日常的工作，但是，如果你并不確定瓶內(nèi)裝的是什么東西，千萬不要隨意就拿去清洗！有些化學(xué)品遇水會發(fā)生爆炸，有些化學(xué)品遇水

吃東西是為了饑餓還是為了享樂？原來它們的腦回路并不相同2021/07/30

研究人員發(fā)現(xiàn)，盡管大腦通過中腦產(chǎn)生5-羥色胺的神經(jīng)元來調(diào)節(jié)快感和饑餓感的進食，但每種進食方式都是由自己獨立的電路連接的，不影響其他類型的進食方式。美國疾病控制與預(yù)防中心(CentersforDiseaseControlａndPrevention)的數(shù)據(jù)顯示，無論是由饑餓還是愉悅引起的暴飲暴食，通常都會導(dǎo)致肥胖。美國約42%的成年人都患有肥胖癥。一個由貝勒醫(yī)學(xué)院(BaylorCollegeofMedicine)的研究人員領(lǐng)導(dǎo)的國際研究小組在動物模型上研究了大腦是如何調(diào)節(jié)饑餓或其他因素引發(fā)的進食的，

重組DNA的構(gòu)建（載體構(gòu)建）2021/07/29

基本原理：外源目的DNA與載體分子的連接稱為DNA重組，重組的DNA稱為重組體或重組子。研究中需要克隆或表達的基因為外源DNA，載體是指能夠攜帶外源基因進入受體細胞，并在其中進行擴增或誘導(dǎo)外源基因表達的工具，其中質(zhì)粒載體最為常用。質(zhì)粒是獨立于細菌染色體外具有自我復(fù)制的DNA分子。所有的質(zhì)粒都有復(fù)制子、選擇性標(biāo)志和多克隆位點3個共同的特性。質(zhì)粒載體的選擇包括載體的大小、載體拷貝數(shù)、多接頭以及篩選插入片段的能力，pcDNA3.1（+/-）是比較常用的真核表達載體?；静襟E：1、目的DNA片段的獲得。

CCK8法測定細胞增殖注意事項2021/07/29

CCK8全稱CellCountingKit-8，是一種基于WST-8（化學(xué)名為2-（2-甲氧基-4-硝基苯）-3-（4-硝基苯）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽）的應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測試劑盒。其工作原理類似于MTT，在電子耦合試劑存在的情況下，WST-8可以被線粒體內(nèi)的脫氧酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細胞的數(shù)量有關(guān)。CCK8法在藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性實驗、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等方面應(yīng)用廣泛。注

細胞凍存注意事項2021/07/28

基本原理細胞凍存時保存細胞的最基本方法，當(dāng)不加保護劑直接凍存細胞時，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水會形成冰晶，從而引起細胞死亡。因此，正常情況下凍存細胞，通常會向培養(yǎng)液中加入保護劑，使用逐步降低溫度的方法，以減少凍存過程中細胞內(nèi)冰晶形成、保護細胞。注意事項1、凍存細胞選擇細胞增殖旺盛、情況穩(wěn)定、無污染、處于對數(shù)生長期的細胞。2、實驗操作過程必須遵循無菌操作。3、細胞凍存液的配方應(yīng)根據(jù)細胞的類型進行調(diào)整，摸索對應(yīng)細胞最適的配方。4、細胞凍存過程，降溫速率要小，遵循慢凍原則，可借助程序降溫盒來完成。5、凍存細

干貨分享--WB實驗問題總結(jié)與處理方案（三）2021/07/27

41、跑電泳的時候配的膠總是“縮”是什么原因呢？是有的成分不對嗎？答：沒什么問題，就是你膠里的水分被蒸發(fā)了。過夜時拿保鮮膜包起來，在里面加點水保持濕度就可以了；也可能母液（30%聚丙酰胺）有問題，你可以重新配制一份觀察；能夠替換的試劑，盡量換一下，選用好的試劑。42、蛋白質(zhì)的分子量跨度很大，如要分離小21KD，中至66KD，大至170KD，可以一次做好嗎？答：這么廣的分布不好轉(zhuǎn)移，一般建議：21kd和66kd可以一起轉(zhuǎn)，12％SDS-PAGE，濕轉(zhuǎn)120mA，45-60min就可以了，可以根據(jù)你

干貨分享--WB實驗問題總結(jié)與處理方案（二）2021/07/27

Westernblot實驗過程中常見問題匯總及處理方案。21、想分離的蛋白是分子量200kd的，SDS-PAGE電泳的分離膠濃度多大合適？濃縮膠的濃度又該用多少？這么大分子量的蛋白容易作WesternBlot嗎？答：分離膠用7％，濃縮膠3.5％，200kd的蛋白不好做。22、如果上樣量超載，要用什么方法來增加上樣量？答：可以濃縮樣品，也可以根據(jù)你的目標(biāo)分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地，超載30％是不會有問題的。如果已經(jīng)超了不少了，而且小分子量的也要，可以考慮加大膠的厚度，可以試試1.5mm的

干貨分享--WB實驗問題總結(jié)與處理方案（一）2021/07/27

Westernblot實驗過程中常見問題匯總及處理方案。1、westernblot的優(yōu)點及缺點答：優(yōu)點：靈敏，特異性高，常規(guī)可達ng級，Ecl顯色法理論上可達pg級。缺點：通量有限。2、為什么我的細胞提取液中沒有目標(biāo)蛋白？答：原因有很多：首先排除WB過程是不是抗體的問題，重新實驗、更換抗體；其次排除蛋白是否降解，提取的時候需要加入蛋白酶抑制劑，a)你的細胞中不表達這種蛋白質(zhì)，換一種細胞；最后考慮此種細胞是否表達該蛋白，表達量高低。3、提取液有的有沉淀，有的很清亮，為什么呢？答：a)有沉淀可能因為

分子生物學(xué)常用數(shù)據(jù)庫匯總及推薦2021/07/27

分子生物學(xué)主要研究具體生物大分子在某一生物學(xué)行為過程中的表達變化、功能和作用方式；主要涉及基因的表達調(diào)控、蛋白相互作用、信號分子間的交互對話等。分子生物學(xué)實驗常需要我們在具體實驗前對所關(guān)注的基因的一些基本信息、可能受哪些因素調(diào)控、與哪些分子可能存在潛在的相互作用，可能參與哪些生物學(xué)行為等進行一些初步的判斷，然后根據(jù)這些信息，提出合理的實驗設(shè)計，并通過生物學(xué)實驗加以驗證。那么，如何獲得上面的這些信息，除了根據(jù)實驗結(jié)果提供的線索和深入研究相關(guān)文獻以外，還會用到一些分子生物學(xué)數(shù)據(jù)庫，尤其一些在線預(yù)測工

逆轉(zhuǎn)錄PCR2021/07/26

RT-PCR，逆轉(zhuǎn)錄PCR或稱反轉(zhuǎn)錄PCR（ReverseTranscriptionPCR），是聚合酶鏈式反應(yīng)的一種廣泛應(yīng)用的變形。在RT-PCR中，RNA在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下被逆轉(zhuǎn)錄成為互補DNA（complementaryDNA，cDNA），再以此為模板通過PCR進行DNA擴增?；驹恚河媚孓D(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成與其互補的DNA（cDNA）的過程。因為mRNA末端存在PolyA，所以用OligodT作為通用引物與其互補。商品化的反轉(zhuǎn)錄試劑盒里通常除了OligodT之外，還可以用隨機引物，但

實驗室純水等級分類及應(yīng)用2021/07/23

通常我們會將實驗室的純水分為四個不同的等級，按照級別分為：純水、去離子水、實驗室Ⅱ級純水以及超純水。這四類不同的純水通常根據(jù)電導(dǎo)率來進行區(qū)分和檢測。1、純水純水也叫純化水，它的電導(dǎo)率會在1-50μs/cm之間，它可經(jīng)由單一弱堿性陰離子交換樹脂、反滲透或單次蒸餾制成。一般應(yīng)有在玻璃器皿清洗、清洗劑用水、恒溫恒濕實驗室和高壓滅菌器之間。2、去離子水去離子水的電導(dǎo)率通常都在1.0-0.1μs/cm之間，通過采用含強陰離子交換樹脂的混床離子交換制成。它們能夠滿足各種制備試劑、稀釋樣品、制備分析標(biāo)準樣的需

你會正確使用移液器嗎？2021/07/22

移液器的基本構(gòu)造：移液器的使用：1、設(shè)定容量值：根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器，可調(diào)式移液器應(yīng)在允許的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。在調(diào)整旋鈕時，不要用力過猛，并應(yīng)注意使移液器顯示的數(shù)值不超過其可調(diào)范圍，各品牌移液器的量程設(shè)置略有不同。2、吸液：根據(jù)所選擇的移液器選擇合適的吸頭安放在移液器的套筒上，稍加扭轉(zhuǎn)壓緊吸頭使之與套筒間無空氣間隙。把按鈕壓住第一停點，垂直握住移液器，使吸頭浸入液面下2-3毫米處然后緩緩平穩(wěn)的松開按鈕吸入液體，等一秒鐘，然后將吸頭提離液面，貼壁停留2-3秒使管尖外側(cè)的液滴滑落。3、放液：將吸

真空冷凍干燥，您了解多少？2021/07/22

什么是真空冷凍干燥？真空冷凍干燥又稱升華干燥，是將含水物料冷凍到冰點以下，使水轉(zhuǎn)變?yōu)楸缓笤谳^高真空下將冰轉(zhuǎn)變?yōu)檎魵舛サ母稍锓椒?。物料可先在冷凍裝置內(nèi)冷凍，再進行干燥。但也可直接在干燥室內(nèi)經(jīng)迅速抽成真空而冷凍。升華生成的水蒸氣借冷凝器除去。升華過程中所需的汽化熱量，一般用熱輻射供給。干燥后的物料保持原來的化學(xué)組成和物理性質(zhì)（如多孔結(jié)構(gòu)、膠體性質(zhì)等），易于長期保存，復(fù)水性好，加水后能恢復(fù)到凍干前的形態(tài)，并且能保持其原有的生化特性。因此，冷凍干燥技術(shù)在化學(xué)工業(yè)、生物制品、食品等領(lǐng)域都得到廣泛應(yīng)

實驗室如何滅菌？2021/07/21

實驗室如何滅菌?消毒和滅菌是微生物實驗技術(shù)中最基本的操作技術(shù)，因此從事藥品生產(chǎn)、檢驗的人員均應(yīng)了解消毒和滅菌的基本概念、兩者的關(guān)系，各自的應(yīng)用方法及其意義，操作時應(yīng)嚴格執(zhí)行相關(guān)的操作規(guī)程，一方面確保生產(chǎn)與檢驗工作的效果，另一方面也是對自身安全的保護。消毒和滅菌的概念：1、消毒：指對病原微生物的繁殖體的致死作用，但不能殺死芽孢等全部微生物，因此消毒是不*的，不能代替滅菌。凡用于消毒的化學(xué)藥品稱為消毒劑，因此人們也常稱消毒劑為化學(xué)消毒劑。2、滅菌：殺滅物體中所有活的微生物（含芽孢）的作用，滅菌是采用