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天津益元利康生物科技有限公司

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  • 2024

    09-27

    ROS的檢測(cè)方法

    ROS在細(xì)胞生命,應(yīng)激和死亡中具介導(dǎo)作用,今天讓我們來聊下ROS吧~一、ROS簡(jiǎn)介活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)廣泛指代氧來源的自由基和非自由基,包含了超氧陰離子(O2-)、過氧化氫(H2O2)、羥自由基(OH-)、臭氧(O3)和單線態(tài)氧(1O2),由于它們含有不成對(duì)的電子,因而具有很高的化學(xué)反應(yīng)活性。在機(jī)體內(nèi),ROS的主要來源之一是線粒體內(nèi)膜的呼吸鏈底物端,在線粒體中的電子傳遞鏈復(fù)合物將電子傳遞給O2的過程中,有一部分O2被還原,形成O2-或H2O2。其中,最為重
  • 2024

    09-26

    細(xì)胞培養(yǎng)的一般過程

    一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對(duì)開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。二、取材在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?,?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的shou次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動(dòng)
  • 2024

    09-26

    RNA酶保護(hù)試驗(yàn)方法優(yōu)缺點(diǎn)

    一、工作原理RNA酶保護(hù)法(RNaseProtectionAssay,RPA,以下簡(jiǎn)稱RPA),是近十年發(fā)展起來的一種全新的mRNA定量分析方法?;驹恚簩?biāo)記的特異RNA探針(32P或生物素)與待測(cè)的RNA樣品液相雜交,標(biāo)記的特異RNA探針按堿基互補(bǔ)的原則與目的基因特異性結(jié)合,形成雙鏈RNA;未結(jié)合的單鏈RNA經(jīng)RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸,而待測(cè)目的基因與特異RNA探針結(jié)合后形成雙鏈RNA,免受RNA酶的消化,故該方法命名為RNA酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)。二、RPA法優(yōu)點(diǎn)與Northern
  • 2024

    09-26

    選擇來源安全、可追溯的新生牛血清至關(guān)重要

    新生牛血清是從出生0天至1周內(nèi)或0至30天的新小牛中采集的血液制品,主要用于細(xì)胞培養(yǎng)和疫苗生產(chǎn)等生物制藥領(lǐng)域。在選購(gòu)時(shí)應(yīng)該關(guān)注血源的可追溯性、質(zhì)量認(rèn)證以及適用性;操作時(shí)應(yīng)注意血清的采集、儲(chǔ)存條件和逐步適應(yīng)訓(xùn)練等。新生牛血清的選購(gòu)指南:1.血源可追溯性:選擇來源安全、可追溯的新生牛血清至關(guān)重要。市面上存在較多以假亂真的產(chǎn)品,因此科研工作者需要對(duì)血清的真實(shí)產(chǎn)地、來源進(jìn)行充分了解和鑒別。2.質(zhì)量認(rèn)證:通過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和多項(xiàng)性能測(cè)試。例如,某些特優(yōu)級(jí)胎牛血清會(huì)有多達(dá)70項(xiàng)質(zhì)量測(cè)試,包括內(nèi)毒素和血紅蛋白
  • 2024

    09-25

    生物制藥中殘留DNA檢測(cè)試劑盒推薦

    一、前言生物制藥是利用生物技術(shù)從組織、細(xì)胞等生物體中分離出有效成分后制備出的用于預(yù)防、治療和診斷的制品,如疫苗,重組蛋白藥等。目前,已開發(fā)出多種生產(chǎn)用的細(xì)胞系,如CHO細(xì)胞、大腸桿菌、VERO細(xì)胞等細(xì)胞系。然而這些通過大腸桿菌,CHO細(xì)胞等培養(yǎng)生產(chǎn)的生物制劑會(huì)含有宿主細(xì)胞殘留DNA等特定的雜質(zhì),殘留DNA會(huì)引發(fā)潛在的安全問題(如潛在致瘤性、傳染性,甚至增加免疫源性或?qū)е峦蛔儯?,所以相關(guān)的法律法規(guī)相繼出臺(tái),以對(duì)生物制品中外源宿主DNA殘留量進(jìn)行嚴(yán)格把控。如WHO和美國(guó)FDA現(xiàn)行指導(dǎo)方針:推薦成品中
  • 2024

    09-25

    大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞(E.coli DH5α)制備

    一、DH5αDH5α是大腸桿菌(Escherichiacoli)的一種感受態(tài)細(xì)胞系,通常被用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。這些細(xì)胞被設(shè)計(jì)成對(duì)外源DNA接受性較高,因此在分子克隆、DNA轉(zhuǎn)化和質(zhì)粒擴(kuò)增等實(shí)驗(yàn)中被廣泛使用。DH5α感受態(tài)細(xì)胞對(duì)于吸收外源DNA特別有效,這使得它們?cè)诨蚬こ毯头肿由飳W(xué)研究中成為常見的實(shí)驗(yàn)室工具。二、操作步驟1、前夜接種受體菌(DH5a或DH10B),挑取單菌落于LB培養(yǎng)基中37℃搖床培養(yǎng)過夜(約16小時(shí));2、取1ml過夜培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于100mlLB培養(yǎng)基中,在37℃搖床上劇烈振
  • 2024

    09-25

    BCA法實(shí)驗(yàn)原理、操作步驟

    一、實(shí)驗(yàn)原理BCA(bicinchoninicacid,二辛可酸)法,測(cè)定蛋白質(zhì)即在堿性條件下蛋白質(zhì)與Cu2+絡(luò)合,并將其還原成Cu1+。Cu1+和BCA試劑反應(yīng),使其由原來的蘋果綠形成穩(wěn)定的紫藍(lán)色復(fù)合物,在562nm有強(qiáng)烈的光吸收,且吸光值和蛋白質(zhì)濃度在廣泛范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,因此可用于蛋白質(zhì)濃度測(cè)定。?二、操作步驟準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品和樣品?:將標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液(如牛血清白蛋白BSA)稀釋成一系列已知濃度的溶液,作為標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí),將待測(cè)樣品適當(dāng)稀釋,確保其在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)。配制BCA工作液?
  • 2024

    09-24

    LNA在基因檢測(cè)中的應(yīng)用

    一、LNA的介紹鎖核酸(Lockednucleicacid,LNA)是一種經(jīng)過修飾的RNA,LNA中一部分核糖上的2'與4'碳連結(jié)在一起。一般可見于A-DNA或RNA。這類核酸可以增加引物或探針(probe)的融解溫度(Tm值),加強(qiáng)這些實(shí)驗(yàn)用物質(zhì)的穩(wěn)定性,可應(yīng)用在即時(shí)聚合酶連鎖反應(yīng)(real-timePCR)等技術(shù)中。近期,鎖核酸(lockednucleicacid,LNA)作為一種新穎的核苷酸衍生物在藥學(xué)研究領(lǐng)域引起了人們的廣泛關(guān)注,有希望成為分子水平治療各種疾病的新突破口.它是一種特殊的雙
  • 2024

    09-24

    重組蛋白產(chǎn)品正確溶解步驟

    一、重組蛋白重組蛋白(recombinantprotein)是指應(yīng)用重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應(yīng)用基因克隆或化學(xué)合成技術(shù)獲得目的基因(geneofinterest,GOI),連接到適合的表達(dá)載體,導(dǎo)入到特定的宿主細(xì)胞,利用宿主細(xì)胞的遺傳系統(tǒng),表達(dá)出有功能的蛋白質(zhì)分子。重組蛋白的正確溶解步驟包括離心、溶解和(可能的話)進(jìn)一步處理。二、重組蛋白溶解步驟一開蓋前離心試劑管。凍干粉在運(yùn)輸過程中可能會(huì)因顛簸而漂散并粘貼于管壁或管蓋上,所以在打開塑料瓶蓋前,需將凍干粉通過離心收
  • 2024

    09-24

    ?重組質(zhì)粒發(fā)生逃逸的原因

    ?重組質(zhì)粒發(fā)生逃逸的原因主要包括細(xì)胞分裂時(shí)不均勻分配、受體細(xì)胞的遺傳影響、外源基因過度表達(dá)、以及環(huán)境因素。?一、?重組質(zhì)粒發(fā)生逃逸的原因一?細(xì)胞分裂時(shí)不均勻分配?:在細(xì)胞分裂過程中,重組質(zhì)??赡懿痪鶆虻胤峙涞阶哟?xì)胞中,導(dǎo)致一些子代細(xì)胞不含有重組質(zhì)粒,從而發(fā)生逃逸。這種逃逸與質(zhì)粒的拷貝數(shù)有關(guān),低拷貝數(shù)質(zhì)粒在分裂時(shí)更有可能導(dǎo)致子代細(xì)胞不含重組質(zhì)粒?。二、?重組質(zhì)粒發(fā)生逃逸的原因二?受體細(xì)胞的遺傳影響?:受體細(xì)胞的核酸酶可能將重組質(zhì)粒視為外來DNA并進(jìn)行降解,阻礙其獨(dú)立復(fù)制。此外,受體細(xì)胞中的內(nèi)源性
  • 2024

    09-24

    WB實(shí)驗(yàn)中單層貼壁總蛋白的提取方法

    一、前言蛋白質(zhì)印跡法(WesternBlot)通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色,通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的分子生物學(xué)技術(shù)。WesternBlotting實(shí)驗(yàn)單層貼壁細(xì)胞總蛋白的提取步驟:二、操作步驟1.倒掉培養(yǎng)液,并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液(或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫?huì)兒使殘余培養(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走)。2.每瓶細(xì)胞加3ml4℃預(yù)冷的PBS(0.01MpH=7.2~7.3)。平放輕輕搖動(dòng)1min洗滌細(xì)胞,然后
  • 2024

    09-24

    Wako BAMBANKER無血清細(xì)胞凍存液操作步驟

    一、細(xì)胞凍存細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。二、WakoBAMBANKER®無血清細(xì)胞凍存液簡(jiǎn)介WakoBAMBANKER®無血清細(xì)胞凍存液是一款無血清、無動(dòng)物源且成分明確的即用型細(xì)胞凍存液,適用幾乎所有類型細(xì)胞株。相比于傳統(tǒng)添加血清的細(xì)胞凍存方法,Bam
  • 2024

    09-23

    劃痕實(shí)驗(yàn)怎么做

    一、準(zhǔn)備工作:6孔板,marker筆,直尺,無血清培養(yǎng)基,完quan培養(yǎng)基,PBS,離心管,胰酶。二、實(shí)驗(yàn)步驟:培養(yǎng)板劃線一計(jì)數(shù)一鋪板一細(xì)胞劃線一清洗一培養(yǎng)并觀察一結(jié)果分析1.使用marker筆在6孔板背后,用直尺均勻地劃?rùn)M線,每隔0.5~1cm劃一道,橫穿過孔,每孔至少穿過5條線。2.通過胰酶消化細(xì)胞制備細(xì)胞懸液。細(xì)胞計(jì)數(shù)后鋪板,確保每組細(xì)胞鋪板密度一致,一般在孔內(nèi)接種約5-10×105個(gè)細(xì)胞(可根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度調(diào)整接種數(shù)量)。3第二天,使用移液槍槍頭(20ul),與細(xì)胞平面垂直,在細(xì)胞層上
  • 2024

    09-23

    鎳柱純化實(shí)驗(yàn)原理及操作步驟

    一、實(shí)驗(yàn)原理?鎳柱純化實(shí)驗(yàn)的原理基于固定化金屬離子親和色譜(IMAC)?,這是一種利用金屬離子與配體之間的特異性相互作用來分離蛋白質(zhì)的方法。鎳柱純化利用Ni2+與帶有咪唑基團(tuán)的組氨酸(His)標(biāo)簽的蛋白質(zhì)之間的相互作用,從而實(shí)現(xiàn)目的蛋白的純化。具體來說,鎳柱中含有Ni2+離子,這些離子能夠與組氨酸上的咪唑基團(tuán)形成配位鍵,從而選擇性結(jié)合帶有His標(biāo)簽的目的蛋白。由于不帶His標(biāo)簽的蛋白無法與Ni2+形成配位鍵,因此能夠有效地區(qū)分目的蛋白與非目的蛋白。在純化過程中,首先通過Bindingbuffer
  • 2024

    09-23

    實(shí)驗(yàn)室常用的幾種細(xì)胞核染料

    一、細(xì)胞核結(jié)構(gòu):細(xì)胞核的結(jié)構(gòu)有核膜、核仁、染色質(zhì)、核基質(zhì)。主要功能是遺傳物質(zhì)DNA儲(chǔ)存和復(fù)制的主要場(chǎng)所,是細(xì)胞遺傳和代謝的控制中心。①核膜:核膜是細(xì)胞核的外部邊界,由內(nèi)外兩層單位膜組成,將細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)分隔開來。②核孔復(fù)合體:核孔復(fù)合體是核膜上的特殊結(jié)構(gòu),由多種蛋白質(zhì)組成,形成環(huán)狀開口,允許大分子物質(zhì)如mRNA、tRNA以及某些蛋白質(zhì)在核質(zhì)之間穿梭。③染色質(zhì):染色質(zhì)是細(xì)胞核內(nèi)的重要組成部分,由DNA和蛋白質(zhì)組成,是遺傳信息的載體。④核仁:核仁是細(xì)胞核內(nèi)的一個(gè)致密結(jié)構(gòu)區(qū)域,與核糖體的形成密切相關(guān)。
  • 2024

    09-20

    如何區(qū)分染色體DNA和質(zhì)粒 DNA

    一、前言在質(zhì)粒提取中,其原理是基于生物大分子在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異,通過變性、復(fù)性、沉淀和純化等實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行區(qū)分、提取。蛋白質(zhì)在堿性環(huán)境下容易發(fā)生變性,使用SDS(十二烷基硫酸鈉)等去垢劑破壞細(xì)胞膜時(shí),SDS與蛋白質(zhì)發(fā)生變性,形成復(fù)合物,使其沉淀;RNA通常會(huì)加入RNase降解RNA,但一般RNase的加入時(shí)間通常在細(xì)菌/細(xì)胞裂解之后、質(zhì)粒DNA純化之前,以確保RNA被充分降解;最關(guān)鍵的問題是:如何將染色體DNA和質(zhì)粒DNA區(qū)分出來?二、如何區(qū)分染色體DNA和質(zhì)粒DNA細(xì)菌沒有細(xì)胞核,只有一個(gè)
  • 2024

    09-19

    血管組織解離試劑盒推薦

    一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介百奧醫(yī)藥血管組織解離試劑盒可用于血管組織樣本單細(xì)胞懸液制備,可廣泛應(yīng)用于高通量單細(xì)胞測(cè)序等相關(guān)科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品貨號(hào):BA3310產(chǎn)品規(guī)格:10rxns二、測(cè)試結(jié)果使用該組織解離試劑盒將新鮮小鼠動(dòng)脈組織消化解離為單細(xì)胞懸液,利用CountStar全自動(dòng)細(xì)胞熒光分析儀檢測(cè)細(xì)胞活性(AO/PI染色)、結(jié)團(tuán)率、活細(xì)胞濃度、細(xì)胞直徑等參數(shù)。然后進(jìn)行10xGenomics平臺(tái)單細(xì)胞建庫(kù)測(cè)序,獲取數(shù)據(jù)。懸液質(zhì)檢結(jié)果:細(xì)胞活率:80.56%;總細(xì)胞濃度:1.28E+06/ml;活細(xì)胞濃度:1.03
  • 2024

    09-19

    新生牛血清主要用于生物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)中

    新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡(jiǎn)稱NBCS)是一種從新生牛體內(nèi)提取的血液成分,主要用于生物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞培養(yǎng)。它含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分、生長(zhǎng)因子、激素、酶和其他生物活性物質(zhì),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖具有重要作用。新生牛血清的主要作用如下:1.提供營(yíng)養(yǎng):含有大量的氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可以為細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。2.促進(jìn)細(xì)胞貼壁:有些一些成分可以促進(jìn)細(xì)胞與培養(yǎng)器皿表面的黏附,有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖。3.保護(hù)細(xì)胞:某些成分具有抗氧化、抗凋亡和抗炎癥等作用,可以保護(hù)細(xì)
  • 2024

    09-19

    一文了解CCK-8檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

    CCK-8檢測(cè)實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞活力檢測(cè)實(shí)驗(yàn))是一種常用的細(xì)胞增殖和毒性檢測(cè)方法,通過測(cè)量細(xì)胞內(nèi)酶活性的變化,從而來評(píng)估細(xì)胞的活力。CCK-8檢測(cè)是一種簡(jiǎn)便、快速、高靈敏度的細(xì)胞活力檢測(cè)方法,適用于多種細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)條件。本文主要從實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)步驟、注意事項(xiàng)等方面來介紹該實(shí)驗(yàn)。一、實(shí)驗(yàn)原理該試劑中含有WST-8,它在電子載體(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚染料formazan,生成的甲瓚物formazan的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,因此可以用這一
  • 2024

    09-13

    簡(jiǎn)石生物DNA提取試劑盒介紹

    核酸是生命的最基本物質(zhì)之一,可分為DNA和RNA兩類,廣泛存在于動(dòng)物、植物細(xì)胞、微生物等所有生命體內(nèi)。不僅起著儲(chǔ)存和傳遞遺傳信息的作用,而且在蛋白質(zhì)的生物合成上也占重要位置,因而在生長(zhǎng)、遺傳、變異等一系列重大生命現(xiàn)象中起決定性的作用。簡(jiǎn)石生物DNA提取試劑盒主要是從樣本中提取基因組DNA,通過裂解細(xì)胞、分離DNA與雜質(zhì),最終獲得純凈的DNA樣本。讓我們來看看簡(jiǎn)石生物DNA提取試劑盒都有哪些吧。產(chǎn)品名稱貨號(hào)規(guī)格血清/血漿游離DNA提取試劑盒TD47650次血液&細(xì)胞基因組DNA小量提取試劑盒TD3
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