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天津益元利康生物科技有限公司

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  • 2024

    10-16

    RAW 264.7細(xì)胞復(fù)蘇

    要復(fù)蘇RAW264.7巨噬細(xì)胞,首先需要將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管從液氮中取出并快速解凍于37℃水浴中,然后將其轉(zhuǎn)移到1mL新鮮培養(yǎng)基的無菌管中,并ce底混合均勻。接下來,使用1000rpm的離心速度離心5分鐘,將上清液倒掉,隨后再加入1mL培養(yǎng)基并充分重懸細(xì)胞。將懸液加入含有適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿或瓶中(10ml/10cm皿),并將其放置在培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)(37℃,5%CO2)。第二天檢查細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和密度,以確定是否需要進(jìn)行傳代操作。通過這些步驟,可以有效地復(fù)蘇RAW264.7巨噬細(xì)胞,并為
  • 2024

    10-15

    PCR-SBT基本原理

    1.PCR擴(kuò)增PCR-SBT技術(shù)首先是對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以擴(kuò)增出分型區(qū)域。PCR,即聚合酶鏈反應(yīng),是一種在體外快速擴(kuò)增特定DNA片段的方法。在PCR過程中,需要設(shè)計(jì)特定的引物,它們能夠與待擴(kuò)增的DNA片段兩端互補(bǔ)結(jié)合。然后,在DNA聚合酶的作用下,以dNTP為原料,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則,合成新的DNA鏈。通過多次循環(huán)的變性、退火和延伸步驟,待測(cè)DNA片段得以大量擴(kuò)增。在PCR-SBT技術(shù)中,為了擴(kuò)增出HLA基因的多態(tài)性區(qū)域,通常需要設(shè)計(jì)多個(gè)引物對(duì)。這些引物對(duì)能夠覆蓋HLA基因的所有可
  • 2024

    10-15

    PCR的提出和發(fā)展

    一、起源PCR的發(fā)明人,一般認(rèn)為是穆里斯(K.Mullis),他也因此獲得了1993年的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。穆里斯在好些寫作中,包括1990年在《科學(xué)美國(guó)人》上的一篇文章,及1998年的自傳《心靈luo舞》(DancingNakedintheMindField),都曾提到PCR這個(gè)構(gòu)想的起源。然而,PCR從構(gòu)想到實(shí)現(xiàn),真的就是穆里斯一人之功嗎?PCR究竟是在什么樣的環(huán)境下誕生的呢?穆里斯的出身是生物化學(xué)家,1972在加州大學(xué)伯克利分校取得博士學(xué)位,專長(zhǎng)有機(jī)合成。一早他就表現(xiàn)出桀驁不馴的性格,在那嬉皮的
  • 2024

    10-15

    三一造血人血小板裂解液說明書

    【產(chǎn)品名稱】中文名稱:三一造血人血小板裂解液英文名稱:HumanPlateletLysate(HPL)【貨號(hào)】RC-002【規(guī)格】100mL/瓶、500mL/瓶【性狀】本產(chǎn)品為橙黃色略渾濁的液體,久置或反復(fù)凍融后,渾濁現(xiàn)象更明顯,并有絮狀沉淀產(chǎn)生?!具\(yùn)輸條件】采用干冰冷凍運(yùn)輸?!举A藏條件與有效期】-20°C保存即可,長(zhǎng)期儲(chǔ)藏可置于-80°C條件下;建議收到本產(chǎn)品后,將本產(chǎn)品于4°C條件下放置過夜或37°C水浴0.5-1小時(shí)進(jìn)行化凍,然后分裝凍存;利用本產(chǎn)品配制的wan全培養(yǎng)基(例如5%添加量)可
  • 2024

    10-14

    感受態(tài)細(xì)胞制備原理與舉例

    一、感受態(tài)細(xì)胞即受體細(xì)胞通過理化方法處理,使其處于最適攝取和容納外來DNA的生理狀態(tài)的細(xì)胞。二、感受態(tài)細(xì)胞制備原理將快速生長(zhǎng)的大腸桿菌置于經(jīng)低溫0℃預(yù)處理的低滲氯化鈣溶液中,便會(huì)造成細(xì)胞膨脹(滲透作用),同時(shí),Ca2+會(huì)使細(xì)胞膜磷脂雙分子層形成液晶結(jié)構(gòu),促使細(xì)胞外膜與內(nèi)膜間隙中的部分核酸酶解離開來,離開所在區(qū)域,誘導(dǎo)細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞。大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞三、大腸桿菌DH5α感受態(tài)制備實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟一從-80℃冰箱中取出保種的DH5α菌株,用滅菌的槍頭吸取少量保菌液加入至合適的LB液體培
  • 2024

    10-14

    單克隆抗體vs多克隆抗體

    單克隆抗體與多克隆抗體在多個(gè)方面存在顯著的區(qū)別,這些區(qū)別包括它們的來源、特性、應(yīng)用以及生產(chǎn)方式等。盡管單克隆抗體和多克隆抗體在特異性、穩(wěn)定性和生產(chǎn)方式等方面存在差異,但它們?cè)谠S多情況下可以互補(bǔ)使用。一、定義與來源單克隆抗體:是指通過B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞系所產(chǎn)生的抗體。這種抗體是由單一的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,因此具有高度均一性和特異性。它們通常是通過雜交瘤技術(shù)從動(dòng)物細(xì)胞中獲得。多克隆抗體:則是從動(dòng)物血清中獲得的抗體,屬于多種B細(xì)胞產(chǎn)生的混合物。這些抗體可以受到多種抗原刺激,與多種
  • 2024

    10-12

    在基因操作中如何選用載體?

    ?在基因操作中選用載體的核心原則?是確保載體能夠滿足基因工程的基本要求,包括能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并復(fù)制、具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)以便于目的基因的插入、帶有標(biāo)記基因以便于篩選等?。圖為質(zhì)粒構(gòu)建基本流程在基因操作中選用載體的核心原則一?能夠自主復(fù)制?:確保載體在宿主細(xì)胞內(nèi)能夠自我復(fù)制,從而增加目的基因的數(shù)量?。在基因操作中選用載體的核心原則二?遺傳標(biāo)記物?:載體應(yīng)具有兩個(gè)以上的遺傳標(biāo)記物,便于重組體的篩選和鑒定?。在基因操作中選用載體的核心原則三?克隆位點(diǎn)?:載體應(yīng)具有一個(gè)或多個(gè)特定的酶切位點(diǎn),即多克
  • 2024

    10-12

    Transwell遷移實(shí)驗(yàn)步驟

    一、細(xì)胞遷移細(xì)胞遷移(cellmigration)也稱為細(xì)胞爬行、細(xì)胞移動(dòng)或細(xì)胞運(yùn)動(dòng),是指細(xì)胞在接收到遷移信號(hào)或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動(dòng)。細(xì)胞遷移為細(xì)胞頭部偽足的延伸、新的黏附建立、細(xì)胞體尾部收縮在時(shí)空上的交替過程。細(xì)胞遷移是正常細(xì)胞的基本功能之一,是機(jī)體正常生長(zhǎng)發(fā)育的生理過程,也是活細(xì)胞普遍存在的一種運(yùn)動(dòng)形式。胚胎發(fā)育、血管生成、傷口愈合、免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥轉(zhuǎn)移等過程中都涉及細(xì)胞遷移。細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)是研究細(xì)胞在體外條件下移動(dòng)能力的一種實(shí)驗(yàn)方法,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、
  • 2024

    10-12

    Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

    Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn),也稱為Transwell遷移或侵襲測(cè)定實(shí)驗(yàn),是一種用于細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù),用于研究細(xì)胞通過多孔膜的運(yùn)動(dòng)。前面已經(jīng)講過實(shí)驗(yàn)步驟,那實(shí)驗(yàn)過程中需要注意些什么呢?注意事項(xiàng)一基質(zhì)膠在室溫下容易凝固,鋪膠過程全程需要在冰上操作。注意事項(xiàng)二基質(zhì)膠濃度也是影響細(xì)胞遷移和侵襲的因素之一,所以基質(zhì)膠的濃度和稀釋比例需根據(jù)供應(yīng)商提供的信息和實(shí)驗(yàn)具體情況調(diào)整,必要時(shí)可設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索最佳濃度和稀釋比例。一般常用濃度為1mg/mL。注意事項(xiàng)三鋪膠時(shí),盡量垂直小室底部在小室底
  • 2024

    10-11

    三一造血STEMERY——人 γδT 細(xì)胞高效擴(kuò)增試劑盒說明書

    一、產(chǎn)品介紹【中文名稱】人γδT細(xì)胞高效擴(kuò)增試劑盒【英文名稱】HumanγδTcellrobustexpasionkit【編號(hào)】CT-004【包裝規(guī)格】2L/套【試劑盒組成】【預(yù)期用途】適用于從人新鮮外周血、濃縮白細(xì)胞來源的單個(gè)核細(xì)胞以及凍存的單個(gè)核細(xì)胞在體外擴(kuò)增成γδT細(xì)胞。【貯藏條件與有效期】GD-I,GD-II,GD-IV置于2-8°C保存,有效期為12個(gè)月;GD-III置于-20°C保存,有效期為24個(gè)月,置于2-8°C保存,有效期則為3個(gè)月,并勿反復(fù)凍融;生產(chǎn)日期,有效期至:見標(biāo)簽?!?
  • 2024

    10-10

    ELISA的基本原理

    ELISA,全稱為:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linkedimmunosorbentassay),是用于檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法。它是一種特殊的試劑分析方法,是在免疫酶技術(shù)(immunoenzymatictechniques)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù)。那讓我們一起來看看ELISA的基本原理吧!ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)
  • 2024

    10-10

    液相雜交芯片與固相雜交芯片的原理及區(qū)別

    液相雜交芯片和固相雜交芯片是兩種不同的基因檢測(cè)技術(shù),它們?cè)谠?、?yīng)用、技術(shù)優(yōu)勢(shì)等方面存在一定的差異。以下是對(duì)這兩種芯片的詳細(xì)比較:一、液相雜交芯片1.基本原理液相雜交芯片技術(shù),在農(nóng)業(yè)育種中常被稱為“液相芯片”或“靶向序列捕獲”,英文名稱為“Genotypingbytargetsequencing”。該技術(shù)最早由安捷倫公司推出,其工作原理基于目標(biāo)探針與靶向序列互補(bǔ)結(jié)合的定點(diǎn)捕獲測(cè)序。具體來說,該技術(shù)利用生物素標(biāo)記的探針在液態(tài)中與基因組目標(biāo)區(qū)域雜交形成雙鏈,隨后通過鏈霉親和素包被的磁珠捕獲這些雙鏈,
  • 2024

    10-09

    PCR DNA聚合酶都有什么?

    DNA聚合酶是催化DNA或RNA為模板合成DNA的一類酶的總稱,又稱DNA依賴的DNA聚合酶(DNA—dependentDNApolymerase,DNApol),它是以親代DNA為模板,催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶是美國(guó)科學(xué)家ArthurKomberg于1957年在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的,被稱為DNA聚合酶Ⅰ(DNApolymeraseⅠ,簡(jiǎn)稱polⅠ)以后陸續(xù)在其他原核生物及真核生物中找到了多種DNA聚合酶。這些聚合酶的共同特點(diǎn)是:它們都能把脫氧核糖核苷酸(dNTP)連續(xù)的
  • 2024

    10-08

    瓊脂糖凝膠電泳的原理

    一、瓊脂糖凝膠瓊脂糖是一種從紅藻中提取的天然線性聚合物,其基本結(jié)構(gòu)是由D-和L-半乳糖殘基通過α(1→3)和β(1→4)糖苷鍵交替連接而成的長(zhǎng)鏈。瓊脂糖在水中加熱溶解后,冷卻時(shí)能形成半固體狀的凝膠。制成的小顆粒用于凝膠過濾。適于用sephadex不能分級(jí)分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級(jí)分離細(xì)胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點(diǎn),有時(shí)用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物。瓊脂糖凝膠具有多孔性,其孔徑大小與DNA分子的雙螺旋直徑相當(dāng),這使得它成為理想的分離
  • 2024

    10-08

    丹麥SSI的血清怎么樣?

    一、公司簡(jiǎn)介SSIDiagnosticaA/S是一家北歐微生物實(shí)驗(yàn)室體外診斷產(chǎn)品制造、分銷和技術(shù)服務(wù)公司。SSIDiagnostica為全球眾多實(shí)驗(yàn)室、診所和制藥商提供服務(wù)。在國(guó)際上,SSIDiagnostica提供快速診斷測(cè)試、疫苗產(chǎn)品、抗血清和其他幾種體外診斷產(chǎn)品的質(zhì)量控制測(cè)試。此外,SSIDiagnostica還在北歐地區(qū)銷售來自外部合作伙伴的精選產(chǎn)品。SSIDiagnostica的歷史可以追溯到1902年,是著名的StatensSerumInstitut的一個(gè)部門。2016年,Adeli
  • 2024

    09-29

    WB實(shí)驗(yàn)之內(nèi)參蛋白的選擇

    在進(jìn)行WB(WesternBlot)實(shí)驗(yàn)時(shí),選擇合適的內(nèi)參確實(shí)至關(guān)重要。內(nèi)參的主要作用是像一把“尺子”,用來衡量和校正每個(gè)樣本的上樣量,以及在上樣過程中可能產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)誤差。這樣,我們就可以更加確信實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,因?yàn)樗鼈円呀?jīng)經(jīng)過了內(nèi)參的校正。一、選擇內(nèi)參需要遵循的原則?1.樣本種屬來源匹配性原則:內(nèi)參蛋白的選擇應(yīng)基于實(shí)驗(yàn)樣本的物種來源。對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織樣本,常用的內(nèi)參包括β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB等。這些蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)穩(wěn)定,適合作為內(nèi)參??缥锓N
  • 2024

    09-29

    為了獲得完整的全血RNA,血液采集和抽提有什么建議嗎?

    首先血液通常在臨床地點(diǎn)采集,但在其他地方進(jìn)行RNA分離處理。這導(dǎo)致在運(yùn)輸和RNA純化之前需要RNA穩(wěn)定。血液含有復(fù)雜的細(xì)胞成分,含RNA的目標(biāo)細(xì)胞白細(xì)胞,占細(xì)胞質(zhì)量的1%以下。血液中含有的生化物質(zhì)會(huì)影響下游的應(yīng)用。如RNA酶、抗凝血?jiǎng)┖脱t素等,需要有專業(yè)的產(chǎn)品進(jìn)行純化。凱杰提出了解決方案:一、EDTA抗凝管采集的新鮮人全血,可搭配QIAampRNABloodMiniKit(貨號(hào):52304)來提取高質(zhì)量的總RNA(>200nt);二、采用PAXgenBloodRNATubes(貨號(hào):76216
  • 2024

    09-29

    FUJIFILM Wako——CLEM用熒光蛋白表達(dá)載體

    FUJIFILMWako推出了適用于光電關(guān)聯(lián)顯微技術(shù)(CLEM)的熒光蛋白表達(dá)載體。載體表達(dá)的熒光蛋白(CLEM-Red,CLEM-Green)可通過CLEM用熒光恢復(fù)試劑(TUKSolution,TUKSolutionformulticolor)恢復(fù)被氧化鋨淬滅的電子顯微鏡樣品中的熒光,從而實(shí)現(xiàn)使用光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察同一切片?!糨d體概要◆產(chǎn)品一覽購(gòu)前須知:本系列載體僅供科研使用。如有需要,請(qǐng)聯(lián)系FUJIFILMWako代理——天津益元利康生物科技有限公司!FUJIFILMWako天津代
  • 2024

    09-29

    Wnt信號(hào)通路

    一、Wnt信號(hào)通路簡(jiǎn)介Wnt在1982年shou次在小鼠胰腺癌中發(fā)現(xiàn),由于此基因激活依賴小鼠乳腺癌相關(guān)病毒基因的插入,因此,當(dāng)被命名為Int-1。之后的研究表明,Int1基因在小鼠正常胚胎發(fā)育中發(fā)揮重要作用,與果蠅的無翅(Wingless)基因功能相似,均可控制胚胎的軸向發(fā)育。此后大量研究提示Int1基因在神經(jīng)系統(tǒng)胚胎發(fā)育中的重要性。因兩者基因與蛋白功能的相似性,研究者將Wingless與Int1合并,賦名為Wnt基因。人Wnt基因定位于12q13。在胚胎發(fā)育中,Wnt基因調(diào)控的重要信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)
  • 2024

    09-27

    為什么CCK8鏡下趨勢(shì)是對(duì)的,測(cè)出來的OD值卻不對(duì)??

    CCK-8實(shí)驗(yàn)中,鏡下趨勢(shì)正確但測(cè)出的OD值不準(zhǔn)確的問題可能由多種原因?qū)е隆D敲从绊慍CK8結(jié)果的因素到底有哪些?一、細(xì)胞接種數(shù)量過多首先,細(xì)胞接種數(shù)量過多可能導(dǎo)致OD值過高。當(dāng)細(xì)胞數(shù)量過多時(shí),它們可能會(huì)重疊生長(zhǎng),導(dǎo)致測(cè)得的OD值偏高。此外,如果細(xì)胞密度過高,可能會(huì)影響藥物的均勻分布,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?。二、藥物作用時(shí)間不足或鋪板細(xì)胞密度太大其次,藥物作用時(shí)間不足或鋪板細(xì)胞密度太大也可能導(dǎo)致測(cè)量不準(zhǔn)確,都可能影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和最終測(cè)得的OD值?。三、誤差操作過程中的誤差也是導(dǎo)致OD值不準(zhǔn)確的
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