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2023
10-08影響免疫組化(IHC)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有哪些?
免疫組化技術(shù)是利用已知的特異性抗體或抗原能特異性結(jié)合的特點(diǎn),通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記于結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑通過借助顯微鏡的觀察,從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的一門組化技術(shù)。那么影響免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、組織的固定組織固定的好壞直接影響免疫組化的結(jié)果,選擇良好的固定液并及時(shí)充分的固定可以防止組織自溶,最大限度保留組織的抗原性,保證免疫組化結(jié)果的準(zhǔn)確性。常用固定液:10%的中性緩沖福爾馬林(40%甲醛10ml+0.01mol/LPBS90ml(pH7.42023
10-08影響免疫熒光(IF)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有哪些?
免疫熒光染色技術(shù)是一種以免疫學(xué)為基礎(chǔ),結(jié)合生物化學(xué)技術(shù)和顯微技術(shù)發(fā)展而來的蛋白等分子檢測技術(shù)。那么你知道影響免疫熒光(IF)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、免疫熒光染色方法的選擇免疫熒光染色技術(shù)分為直接法和間接法。直接法:將熒光標(biāo)記物偶聯(lián)在抗原/抗體上,直接與相應(yīng)的抗體/抗原反應(yīng)。間接法:先用未標(biāo)記的一抗與抗原充分反應(yīng)后,再利用熒光標(biāo)記的二抗與已經(jīng)結(jié)合在抗原上的一抗結(jié)合,達(dá)到檢測抗原的目的。優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)直接法操作簡單、特異性高,非特異性染色少便于相同宿主來源的不同蛋白的共定位靈敏性相2023
10-082023
10-072023
10-072023
10-07內(nèi)切酶實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)有哪些?
你知道內(nèi)切酶實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、限制性內(nèi)切酶一般反應(yīng)條件當(dāng)進(jìn)行限制性酶切反應(yīng)時(shí),為確保最佳的反應(yīng)條件,務(wù)必要遵守限制性內(nèi)切酶供應(yīng)商提供的建議。在此過程中需要考慮的重要參數(shù)包括:底物(DNA)和酶的量、反應(yīng)體積以及孵育時(shí)間。根據(jù)傳統(tǒng)的定義,在最佳反應(yīng)條件下,一個(gè)單位的限制性內(nèi)切酶可以在1小時(shí)內(nèi),在50μL體系中wan全酶切1μL定義底物(例如,質(zhì)粒pUC19)。盡管單位定義提供了一種測定方式,但還需注意,根據(jù)DNA底物之中的識別序列出現(xiàn)的頻率及所用底物類型,針對不同DN2023
10-072023
10-07你知道熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的方法與步驟是什么嗎?
熒光原位雜交是一門新興的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù),目前這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動植物基因組結(jié)構(gòu)研究、染色體精細(xì)結(jié)構(gòu)變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學(xué)和基因組進(jìn)化研究待許多領(lǐng)域。那么你知道熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)的方法與步驟是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、探針變性將探針在75℃恒溫水浴中溫育5min,立即置0℃,5~10min,使雙鏈DNA探針變性。二、標(biāo)本變性(1)將制備好的染色體玻片標(biāo)本于50℃培養(yǎng)箱中烤片2~3h。(經(jīng)Giemsa染色的標(biāo)本需預(yù)先在固定液中退色后再烤片)。(2)取出玻片標(biāo)本,2023
09-282023
09-282023
09-25PCR管是進(jìn)行PCR反應(yīng)實(shí)驗(yàn)的重要器材
PCR管是PCR反應(yīng)的重要實(shí)驗(yàn)器材,關(guān)乎反應(yīng)體系的整體功效。它主要有以下幾個(gè)特點(diǎn):1.需要具備高熱穩(wěn)定性。PCR反應(yīng)過程中,3步中的第一步變性需要高溫,傳統(tǒng)PCR管都是由堅(jiān)硬的塑料材料制成,能夠承受高溫的影響,不會變形或燒融。現(xiàn)在還有一種新型PCR管,叫做光學(xué)透明PCR管,也具備了一定的熱穩(wěn)定性。2.內(nèi)表面需要具備良好的附著性。這是因?yàn)镻CR反應(yīng)的三個(gè)步驟需要發(fā)生在管內(nèi),每個(gè)步驟對于成功的PCR反應(yīng)都是至關(guān)重要的。PCR管內(nèi)表面需要特殊處理,表面要光滑而均勻,以保持雜質(zhì)相對較低。3.其尺寸需要與2023
09-202023
09-192023
09-182023
09-182023
09-14病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)有何注意事項(xiàng)?
病毒轉(zhuǎn)染是指將外源病毒導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù),用病毒將帶有目的基因的載體整合到細(xì)胞的基因組中,以達(dá)到長期穩(wěn)定表達(dá)目的基因的目的。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。那么病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)有何注意事項(xiàng)呢?讓我們一起來看看吧!一、病毒安全性問題病毒本身具有一定的危險(xiǎn)性,需要在符合生物安全實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)的條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并遵守相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)范。病毒操作時(shí)最好使用生物安全柜。如果使用普通超凈工作臺操作病毒,請不要打開排風(fēng)扇。病毒操作時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服,帶口罩和2023
09-142023
09-13貼壁細(xì)胞培養(yǎng)和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么?
細(xì)胞培養(yǎng)有兩種基本方式,一種是人工基質(zhì)上的單層細(xì)胞(貼壁培養(yǎng)),另一種是在培養(yǎng)基中自由漂?。☉腋∨囵B(yǎng))。那么你知道貼壁細(xì)胞培養(yǎng)和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么嗎?讓我們一起來看看吧!來自脊椎動物的大多數(shù)細(xì)胞,除了造血細(xì)胞系和少數(shù)其他細(xì)胞系,都是貼壁依賴性的,必須在經(jīng)過專門處理以允許細(xì)胞粘附和擴(kuò)散的合適基質(zhì)上培養(yǎng)。然而,許多細(xì)胞系也適用于懸浮培養(yǎng)。同樣,大多數(shù)市售昆蟲細(xì)胞系在貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng)中生長良好。懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞可以保存在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶中,但隨著培養(yǎng)體積與表面積的增加,充分的氣體交換會受2023
09-13什么是原代細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞生長曲線?
你知道什么是原代細(xì)胞培養(yǎng),和細(xì)胞生長曲線嗎?,讓我們一起來看看吧!一、原代細(xì)胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的首ci培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時(shí)間短,遺傳性狀和體內(nèi)細(xì)胞相似,適于做細(xì)胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上,通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。最chang用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。二、細(xì)胞生長曲線細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞絕對生長數(shù)的常用方2023
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