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天津益元利康生物科技有限公司

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  • 2023

    10-08

    影響免疫組化(IHC)實驗結(jié)果的因素有哪些?

    免疫組化技術(shù)是利用已知的特異性抗體或抗原能特異性結(jié)合的特點,通過化學反應(yīng)使標記于結(jié)合后的特異性抗體上的顯示劑通過借助顯微鏡的觀察,從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織細胞結(jié)構(gòu)的一門組化技術(shù)。那么影響免疫組化實驗結(jié)果的因素有哪些呢?讓我們一起來看看吧!一、組織的固定組織固定的好壞直接影響免疫組化的結(jié)果,選擇良好的固定液并及時充分的固定可以防止組織自溶,最大限度保留組織的抗原性,保證免疫組化結(jié)果的準確性。常用固定液:10%的中性緩沖福爾馬林(40%甲醛10ml+0.01mol/LPBS90ml(pH7.4
  • 2023

    10-08

    影響免疫熒光(IF)實驗結(jié)果的因素有哪些?

    免疫熒光染色技術(shù)是一種以免疫學為基礎(chǔ),結(jié)合生物化學技術(shù)和顯微技術(shù)發(fā)展而來的蛋白等分子檢測技術(shù)。那么你知道影響免疫熒光(IF)實驗結(jié)果的因素有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、免疫熒光染色方法的選擇免疫熒光染色技術(shù)分為直接法和間接法。直接法:將熒光標記物偶聯(lián)在抗原/抗體上,直接與相應(yīng)的抗體/抗原反應(yīng)。間接法:先用未標記的一抗與抗原充分反應(yīng)后,再利用熒光標記的二抗與已經(jīng)結(jié)合在抗原上的一抗結(jié)合,達到檢測抗原的目的。優(yōu)點缺點直接法操作簡單、特異性高,非特異性染色少便于相同宿主來源的不同蛋白的共定位靈敏性相
  • 2023

    10-08

    影響ELISA結(jié)果的因素有哪些?

    ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗是目前臨床上zui常用的免疫學檢驗方法,由于其試劑穩(wěn)定,易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀,既適宜于大規(guī)模篩查試驗,又可用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析,目前已廣泛用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子檢測等領(lǐng)域。那么你知道影響ELISA結(jié)果的因素有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、樣品樣品是檢測的前提,樣品質(zhì)量會直接影響實驗結(jié)果??梢杂肊LISA來檢測的樣品很多,根據(jù)檢測項目不同可以是血清、血漿、唾液、尿液等,但大部分還是以血清為樣品。作為血清樣品,
  • 2023

    10-07

    RNA提取的注意事項有哪些?

    RNA是目前發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)生物功能zui豐富多樣的生物大分子,同時是DNA與蛋白質(zhì)信息傳遞的橋梁,因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時代的重要手段。那么你知道RNA提取的注意事項都有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、如何保存提取出的RNA?提取后溶解于RNase-freeWater中,RNA樣品建議立即進行下游實驗,如需儲存,建議分裝保存于-80℃。避免多次取用樣品,反復(fù)凍融。二、為什么提取的RNA有降解?1.使用的組織材料不新鮮。提取RNA應(yīng)采用新鮮的組織材料,或?qū)⑿迈r組織材料用液氮迅凍后置于-
  • 2023

    10-07

    你知道PCR檢測技術(shù)的分類嗎?

    分子診斷技術(shù)是指以DNA和RNA為診斷材料,用分子生物學技術(shù)通過檢測基因的存在、缺陷或表達異常,從而對人體狀態(tài)和疾病作出診斷的技術(shù)。其基本原理是檢測DNA或RNA的結(jié)構(gòu)是否變化、量的多少及表達功能是否異常,以確定受檢者有無基因水平的異常變化,對疾病的預(yù)防、預(yù)測、診斷、治療具有重要意義。那么你知道PCR檢測技術(shù)的分類嗎?讓我們一起來看看吧!PCR技術(shù)是一種用于擴增特定DNA片段的分子生物學技術(shù),基本原理是在反應(yīng)室中模擬細胞內(nèi)的DNA復(fù)制,即人為創(chuàng)造核酸半保留復(fù)制條件,使目的DNA在細胞外完成擴增的
  • 2023

    10-07

    內(nèi)切酶實驗的注意事項有哪些?

    你知道內(nèi)切酶實驗的注意事項有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、限制性內(nèi)切酶一般反應(yīng)條件當進行限制性酶切反應(yīng)時,為確保最佳的反應(yīng)條件,務(wù)必要遵守限制性內(nèi)切酶供應(yīng)商提供的建議。在此過程中需要考慮的重要參數(shù)包括:底物(DNA)和酶的量、反應(yīng)體積以及孵育時間。根據(jù)傳統(tǒng)的定義,在最佳反應(yīng)條件下,一個單位的限制性內(nèi)切酶可以在1小時內(nèi),在50μL體系中wan全酶切1μL定義底物(例如,質(zhì)粒pUC19)。盡管單位定義提供了一種測定方式,但還需注意,根據(jù)DNA底物之中的識別序列出現(xiàn)的頻率及所用底物類型,針對不同DN
  • 2023

    10-07

    熒光原位雜交實驗的原理是什么?

    熒光原位雜交(FluorescenceinsituhybridizationFISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術(shù),是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性原位雜交技術(shù)。目前這項技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動植物基因組結(jié)構(gòu)研究、染色體精細結(jié)構(gòu)變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領(lǐng)域。那么你知道熒光原位雜交實驗的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!熒光原位雜交(FluorescenceinsituhybridizationFISH)是一
  • 2023

    10-07

    你知道熒光原位雜交實驗的方法與步驟是什么嗎?

    熒光原位雜交是一門新興的分子細胞遺傳學技術(shù),目前這項技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于動植物基因組結(jié)構(gòu)研究、染色體精細結(jié)構(gòu)變異分析、病毒感染分析、人類產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究待許多領(lǐng)域。那么你知道熒光原位雜交實驗的方法與步驟是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、探針變性將探針在75℃恒溫水浴中溫育5min,立即置0℃,5~10min,使雙鏈DNA探針變性。二、標本變性(1)將制備好的染色體玻片標本于50℃培養(yǎng)箱中烤片2~3h。(經(jīng)Giemsa染色的標本需預(yù)先在固定液中退色后再烤片)。(2)取出玻片標本,
  • 2023

    09-28

    細胞轉(zhuǎn)染過程中需要注意什么?

    隨著基因和蛋白功能的深入研究,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為科研實驗中最chang用的技術(shù)手段之一。那么在細胞轉(zhuǎn)染過程中需要注意什么呢?讓我們一起來看看吧!一、轉(zhuǎn)染試劑不同細胞系轉(zhuǎn)染效率通常不同,但細胞系的選擇通常是根據(jù)實驗的需要,因此在轉(zhuǎn)染實驗前應(yīng)根據(jù)實驗要求和細胞特性選擇適合的轉(zhuǎn)染試劑。每種轉(zhuǎn)染試劑都會提供一些已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染的細胞株列表和文獻,通過這些資料可選擇最shi合實驗設(shè)計的轉(zhuǎn)染試劑。不同轉(zhuǎn)染試劑有不同的轉(zhuǎn)染方法,但大多大同小異。轉(zhuǎn)染時應(yīng)跟據(jù)具體轉(zhuǎn)染試劑推薦的方法,但也要注意,因不同實驗室培養(yǎng)的細胞性質(zhì)不
  • 2023

    09-28

    細胞轉(zhuǎn)染是如何分類的?

    細胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊毎麅?nèi)的技術(shù)。那你知道細胞轉(zhuǎn)染是如何分類的嗎?讓我們一起來看看吧!一、根據(jù)導(dǎo)入時間長短進行分類根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細胞的時間長短,可以分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時轉(zhuǎn)染(transienttransfection):指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導(dǎo)入到哺乳動物細胞內(nèi),該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。細胞中瞬時轉(zhuǎn)染的外源基因表達時間有限,通常僅持續(xù)幾天,直到外源基因在細胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析。目前,由于各種轉(zhuǎn)染試
  • 2023

    09-25

    PCR管是進行PCR反應(yīng)實驗的重要器材

    PCR管是PCR反應(yīng)的重要實驗器材,關(guān)乎反應(yīng)體系的整體功效。它主要有以下幾個特點:1.需要具備高熱穩(wěn)定性。PCR反應(yīng)過程中,3步中的第一步變性需要高溫,傳統(tǒng)PCR管都是由堅硬的塑料材料制成,能夠承受高溫的影響,不會變形或燒融?,F(xiàn)在還有一種新型PCR管,叫做光學透明PCR管,也具備了一定的熱穩(wěn)定性。2.內(nèi)表面需要具備良好的附著性。這是因為PCR反應(yīng)的三個步驟需要發(fā)生在管內(nèi),每個步驟對于成功的PCR反應(yīng)都是至關(guān)重要的。PCR管內(nèi)表面需要特殊處理,表面要光滑而均勻,以保持雜質(zhì)相對較低。3.其尺寸需要與
  • 2023

    09-20

    細胞擴增技術(shù)與策略有什么?

    細胞擴增技術(shù)與策略是實現(xiàn)細胞大規(guī)模增殖的關(guān)鍵步驟,可以根據(jù)細胞類型、擴增需求和實際情況選擇不同的技術(shù)和策略。那么你知道細胞擴增技術(shù)與策略有什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、傳代培養(yǎng):1.間歇性傳代:將細胞從培養(yǎng)器具(如細胞瓶或培養(yǎng)皿)中解離并移植到新的培養(yǎng)器具中,以分離細胞,控制細胞密度和細胞增殖速率。2.連續(xù)傳代:利用旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)器具(如旋轉(zhuǎn)壺、旋轉(zhuǎn)筒)或生物反應(yīng)器等,實現(xiàn)細胞的持續(xù)增殖。連續(xù)傳代可以減少人工處理和移植對細胞的傷害,提高細胞擴增效率。二、懸浮培養(yǎng):1.攪拌培養(yǎng):通過攪拌裝置將培養(yǎng)器
  • 2023

    09-19

    PCR管的維護保養(yǎng)方法

    聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)是基因工程中常用的一種分子生物學技術(shù),PCR管通過模擬體內(nèi)DNA復(fù)制過程快速合成特定DNA片段。其原理基于DNA的復(fù)制過程,包括三個步驟:變性、退火和延伸。變性(Denaturation)階段,反應(yīng)體系中的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)在高溫(通常為94°C-98°C)下被分離成兩條單鏈DNA。這一步是通過加熱使兩條DNA鏈斷裂,目的是將DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)變?yōu)閱捂溄Y(jié)構(gòu)以提供模板。退火(Annealing)階段,溫度被降低至50°C-65°C,此時引物(Primers)能夠與目標DNA序列的
  • 2023

    09-18

    如何正確保存抗體?

    抗體保存的是否得當,直接決定了抗體的活性和使用效果,那么我們該如何正確保存抗體呢?讓我們一起來看看吧!一、保存溫度和條件很多抗體的最佳保存條件是分裝成小包裝凍存于-20°C或-80°C。分裝能使凍融引起的損失減到最小,同時可避免多次在一個管內(nèi)取樣而由槍頭引入的污染。分裝凍存的抗體,融解一次后剩余抗體應(yīng)保存于4°C。收到抗體后,應(yīng)10,000xg離心20秒,使管口螺紋內(nèi)的抗體溶液全部離心至管底,用低蛋白吸附性的微量離心管分裝。分裝量的多少取決于每次試驗的使用量。分裝量不能少于10μl;分裝量越少,
  • 2023

    09-18

    qPCR實驗的Ct值有什么作用?

    qPCR擴增過程中,擴增產(chǎn)物的熒光信號達到設(shè)定的熒光閾值時的所對應(yīng)的擴增循環(huán)數(shù)(CycleThreshold)。C代表Cycle,T代表Threshold。簡單講,Ct值就是qPCR中起始模板擴增達到一定產(chǎn)物量時,所對應(yīng)的循環(huán)數(shù)。那么你知道qPCR實驗中的Ct值有什么作用嗎?讓我們一起來看看吧!一、指數(shù)擴增、模板量與Ct值的關(guān)系理想情況下,qPCR中的基因經(jīng)過一定的循環(huán)數(shù)被指數(shù)擴增而積累,擴增循環(huán)數(shù)和產(chǎn)物量之間的關(guān)系是:擴增產(chǎn)物量=起始模板量×(1+En)循環(huán)個數(shù)。然而qPCR反應(yīng)并不是一直處于
  • 2023

    09-14

    病毒轉(zhuǎn)染實驗有何注意事項?

    病毒轉(zhuǎn)染是指將外源病毒導(dǎo)入真核細胞的技術(shù),用病毒將帶有目的基因的載體整合到細胞的基因組中,以達到長期穩(wěn)定表達目的基因的目的。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。那么病毒轉(zhuǎn)染實驗有何注意事項呢?讓我們一起來看看吧!一、病毒安全性問題病毒本身具有一定的危險性,需要在符合生物安全實驗室標準的條件下進行實驗,并遵守相關(guān)的實驗室安全操作規(guī)范。病毒操作時最好使用生物安全柜。如果使用普通超凈工作臺操作病毒,請不要打開排風扇。病毒操作時請穿實驗服,帶口罩和
  • 2023

    09-14

    如何提高電轉(zhuǎn)效率?

    電轉(zhuǎn),也稱電穿孔法,是通過脈沖電流在細胞膜上打孔,將外源分子(DNA、RNA、mRNA等)導(dǎo)入真核細胞內(nèi),來改變細胞的特性,從而達到改造細胞的目的,是實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究的重要工具。那么該如何提高電轉(zhuǎn)效率呢?讓我們一起來看看吧!一、細胞收集時:1)在消化貼壁細胞時,一定要注意終止胰酶反應(yīng),防止過度消化;最好使用專業(yè)的胰酶中和劑;2)在進行細胞離心時,使用低轉(zhuǎn)速長時間離心,提升細胞的存活率;3)選擇合適狀態(tài)的細胞,一般原代細胞可以傳1-2次后使用;盡量挑選迭代次數(shù)少的細胞,如果是凍存細
  • 2023

    09-13

    貼壁細胞培養(yǎng)和懸浮細胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么?

    細胞培養(yǎng)有兩種基本方式,一種是人工基質(zhì)上的單層細胞(貼壁培養(yǎng)),另一種是在培養(yǎng)基中自由漂?。☉腋∨囵B(yǎng))。那么你知道貼壁細胞培養(yǎng)和懸浮細胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么嗎?讓我們一起來看看吧!來自脊椎動物的大多數(shù)細胞,除了造血細胞系和少數(shù)其他細胞系,都是貼壁依賴性的,必須在經(jīng)過專門處理以允許細胞粘附和擴散的合適基質(zhì)上培養(yǎng)。然而,許多細胞系也適用于懸浮培養(yǎng)。同樣,大多數(shù)市售昆蟲細胞系在貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng)中生長良好。懸浮培養(yǎng)的細胞可以保存在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶中,但隨著培養(yǎng)體積與表面積的增加,充分的氣體交換會受
  • 2023

    09-13

    什么是原代細胞培養(yǎng)和細胞生長曲線?

    你知道什么是原代細胞培養(yǎng),和細胞生長曲線嗎?,讓我們一起來看看吧!一、原代細胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的首ci培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時間短,遺傳性狀和體內(nèi)細胞相似,適于做細胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì),如果是正常細胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實際上,通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。最chang用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。二、細胞生長曲線細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數(shù)的常用方
  • 2023

    09-12

    熒光定量PCR的原理是什么?

    熒光定量PCR(Real-timePCR),是指在PCR擴增反應(yīng)體系中加入熒光基團,通過對擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!以探針法熒光定量PCR為例:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。開始時,探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,檢測不到熒光信號;PCR擴增時,Ta
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