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2025
02-06腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子載體轉(zhuǎn)染人臍帶干細(xì)胞
引言腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)是一種重要的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子,廣泛參與神經(jīng)元的存活、分化、突觸可塑性以及神經(jīng)再生等過(guò)程。近年來(lái),隨著干細(xì)胞技術(shù)的快速發(fā)展,人臍帶干細(xì)胞(hUC-MSCs)因其來(lái)源廣泛、免疫原性低、增殖能力強(qiáng)等優(yōu)勢(shì),成為細(xì)胞治療和組織工程研究的熱點(diǎn)。將BDNF基因?qū)雋UC-MSCs,不僅可以增強(qiáng)其神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)功能,還能為神經(jīng)退行性疾病的治療提供新的細(xì)胞來(lái)源。構(gòu)建BDNF載體轉(zhuǎn)染hUC-MSCs的轉(zhuǎn)化體系具有重要的科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。一方面,該體系為研究BDNF在干細(xì)胞中的功能機(jī)制提供了2025
02-05熒光定量 PCR 測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞基因拷貝數(shù)
引言:基因拷貝數(shù)的測(cè)定在基因功能研究、基因治療及遺傳病診斷等領(lǐng)域具有重要意義。隨著基因編輯技術(shù)的快速發(fā)展,如何準(zhǔn)確、高效地評(píng)估轉(zhuǎn)染細(xì)胞中目標(biāo)基因的拷貝數(shù)成為研究的關(guān)鍵。熒光定量PCR技術(shù)以其高靈敏度、特異性和定量準(zhǔn)確性,在基因拷貝數(shù)檢測(cè)中展現(xiàn)出更好的優(yōu)勢(shì)。在基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中,構(gòu)建穩(wěn)定、高效的轉(zhuǎn)化體系是實(shí)現(xiàn)基因功能研究的基礎(chǔ)。轉(zhuǎn)染效率的高低直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方法如化學(xué)轉(zhuǎn)染、物理轉(zhuǎn)染等,雖然在一定程度上能夠?qū)崿F(xiàn)基因的導(dǎo)入,但存在轉(zhuǎn)染效率低、細(xì)胞毒性大等問(wèn)題。因此,探索更為2025
02-05攻克前白蛋白 cDNA 克隆與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株
引言前白蛋白(PA),又稱前清蛋白,是一種由肝臟細(xì)胞合成的糖蛋白,分子量約為55kD,血漿半衰期為1.9天。因其電泳遷移速度在白蛋白之前而得名。PA在肝功能評(píng)價(jià)、肝病診斷及預(yù)后判斷中具有重要價(jià)值。各種類型肝病的PA水平均低于正常水平,且肝病越嚴(yán)重,血清PA水平越低。此外,PA還作為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,可用于炎癥反應(yīng)的監(jiān)測(cè),以及營(yíng)養(yǎng)不良、消耗性疾病、腎病和妊娠等疾病的診療。然而,天然PA的來(lái)源有限,且提取過(guò)程復(fù)雜,難以滿足大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用的需求。因此,通過(guò)基因工程技術(shù)生產(chǎn)PA成為研究熱點(diǎn)。本研究2025
02-05分泌人可溶性 FL 基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞活性解析
引言在現(xiàn)代生物學(xué)研究中,細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染技術(shù)已成為一種重要的研究手段。該技術(shù)能夠?qū)⑼庠椿驅(qū)爰?xì)胞內(nèi),使細(xì)胞獲得新的遺傳特性,從而為研究基因功能、疾病機(jī)制以及開發(fā)新型治療方法提供了有力的工具。人可溶性FL基因,作為Flt3配體(FL)的一種可溶性形式,在細(xì)胞的生長(zhǎng)、發(fā)育以及免疫調(diào)節(jié)等過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。FL通過(guò)與Flt3受體結(jié)合,能夠刺激造血干/祖細(xì)胞的增殖和分化,調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的發(fā)育和功能。因此,對(duì)人可溶性FL基因進(jìn)行深入研究,有助于揭示相關(guān)生理和病理過(guò)程的分子機(jī)制,為相關(guān)疾病的診斷和治療開辟新的2025
02-05構(gòu)建組織型纖溶酶原激活劑突變體轉(zhuǎn)染細(xì)胞株
摘要:本研究致力于構(gòu)建組織型纖溶酶原激活劑(tPA)突變體基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞體系,采用定點(diǎn)突變技術(shù)優(yōu)化tPA性能,通過(guò)HEK293與CHO細(xì)胞系進(jìn)行轉(zhuǎn)染,獲得穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株,并驗(yàn)證其在體內(nèi)外的溶栓性能。該成果為開發(fā)新型溶栓藥物提供了理論與實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值與科學(xué)意義。引言血栓性疾病,如急性心肌梗死(AMI)和腦卒中,因其高發(fā)病率和高致死率,嚴(yán)重威脅人類健康。作為血中纖溶系統(tǒng)中天然存在的生理性激活劑,組織型纖溶酶原激活劑(tissue-typeplasminogenactivator,t2025
02-05探究心房肽 cDNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞對(duì)高血壓調(diào)控
摘要:本研究旨在探討心房肽(ANP)cDNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞對(duì)高血壓的調(diào)控作用,通過(guò)構(gòu)建微囊化ANPcDNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞體系,觀察其對(duì)高血壓大鼠模型的血壓及相關(guān)生理指標(biāo)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,ANPcDNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞能顯著降低高血壓大鼠的血壓,增加尿量,且不影響其正常生理行為。本研究為高血壓的基因治療提供了新的思路和方法。引言高血壓作為一種常見的慢性疾病,已成為全球范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,涉及多種生理和病理過(guò)程,包括血管張力增加、血容量增多、心臟輸出量增大等。傳統(tǒng)的治療方法主要依賴于藥物干預(yù),2025
01-24周期型馬來(lái)絲蟲多基因克隆構(gòu)建載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞
摘要:本文詳細(xì)闡述了周期型馬來(lái)絲蟲多基因克隆構(gòu)建載體及轉(zhuǎn)染細(xì)胞的研究,通過(guò)RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增目標(biāo)基因,構(gòu)建原核及真核表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)分析。研究成功構(gòu)建了多基因轉(zhuǎn)化體系,為絲蟲病疫苗及抗蟲藥物的研發(fā)提供了基礎(chǔ)。引言馬來(lái)絲蟲(Brugiamalayi)是一種寄生在人體淋巴系統(tǒng)中的絲蟲,可引起馬來(lái)絲蟲病。根據(jù)其微絲蚴出現(xiàn)于外周血液的時(shí)間,馬來(lái)絲蟲可分為夜現(xiàn)周期型和亞周期型。周期型馬來(lái)絲蟲成蟲寄生于人體四肢淺部淋巴系統(tǒng),特別是下肢,導(dǎo)致急性淋巴結(jié)炎、淋巴管炎及象皮腫等癥狀。馬來(lái)絲蟲2025
01-24線性多核苷酸借電穿孔增強(qiáng)真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染
摘要:本文研究了通過(guò)電穿孔法使用線性多核苷酸增強(qiáng)真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率和效果。實(shí)驗(yàn)采用威尼德電穿孔儀,利用優(yōu)化后的電穿孔參數(shù),成功在人類造血細(xì)胞,特別是樹突細(xì)胞(DC)中實(shí)現(xiàn)高效基因遞送。該方法優(yōu)于傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和質(zhì)粒cDNA電穿孔,為基因治療、疫苗開發(fā)和免疫治療提供了有力工具。引言:基因遞送是基因治療、疫苗開發(fā)和免疫治療中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)方法如脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和質(zhì)粒cDNA電穿孔雖已廣泛應(yīng)用,但存在轉(zhuǎn)染效率低、細(xì)胞毒性大等問(wèn)題。線性多核苷酸作為基因遞送的載體,具有穩(wěn)定性高、易于合成和修飾等優(yōu)點(diǎn)。然而,如2025
01-24基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞治療帕金森病進(jìn)展的研究
摘要:帕金森?。≒arkinson'sDisease,PD)是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,主要影響運(yùn)動(dòng)功能。本研究通過(guò)基因轉(zhuǎn)染技術(shù),將特定基因?qū)肷窠?jīng)干細(xì)胞,增強(qiáng)其分化為多巴胺能神經(jīng)元的能力,為帕金森病治療提供了新的策略。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,基因工程改造的神經(jīng)干細(xì)胞能顯著改善帕金森病大鼠模型的運(yùn)動(dòng)功能,具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。引言帕金森病是一種常見的神經(jīng)退行性疾病,主要病理特征是中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的逐漸喪失,導(dǎo)致大腦無(wú)法正常調(diào)控運(yùn)動(dòng)功能?;颊叱1憩F(xiàn)為靜止性震顫、肌肉強(qiáng)直、運(yùn)動(dòng)遲緩等癥狀,嚴(yán)重影響生2025
01-24實(shí)驗(yàn)探究供者基因轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)免疫耐受機(jī)制
摘要:本研究通過(guò)供者主要組織相容性復(fù)合物(MHC)基因轉(zhuǎn)染誘導(dǎo)受體免疫耐受,探索其在器官移置中的應(yīng)用潛力。實(shí)驗(yàn)采用C3H小鼠為供體,C57B/L小鼠為受體,利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)將供者M(jìn)HC基因轉(zhuǎn)入受體胸腺細(xì)胞,觀察其對(duì)移植排斥反應(yīng)的影響。結(jié)果表明,MHC基因轉(zhuǎn)染能顯著延長(zhǎng)移植物存活時(shí)間,誘導(dǎo)免疫耐受。引言器官移置作為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的重要治療手段,為許多終末期疾病患者提供了新的生命希望。然而,移植排斥反應(yīng)一直是制約器官移置成功率和長(zhǎng)期存活的關(guān)鍵因素。免疫耐受是指生物體對(duì)某種抗原具有免疫無(wú)應(yīng)答狀態(tài)的特性,誘2025
01-24實(shí)驗(yàn)探索 GAD65 基因轉(zhuǎn)染神經(jīng)干細(xì)胞
摘要本研究旨在探索谷氨酸脫羧酶65(GAD65)基因轉(zhuǎn)染對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)分化為γ-氨基丁酸(GABA)神經(jīng)元的影響,為GAD65基因修飾的神經(jīng)干細(xì)胞移植治療癲癇提供理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)采用脂質(zhì)體基因轉(zhuǎn)染技術(shù),成功將GAD65基因轉(zhuǎn)入神經(jīng)干細(xì)胞,并觀察到GABA陽(yáng)性神經(jīng)元比例顯著提高。引言癲癇是一種由大腦神經(jīng)細(xì)胞群反復(fù)超同步放電引起的慢性腦功能障礙綜合征,是功能神經(jīng)外科的常見疾病。約20%-30%的癲癇患者經(jīng)系統(tǒng)正規(guī)的抗癲癇藥物治療后仍無(wú)法有效控制,成為難治性癲癇。傳統(tǒng)手術(shù)治療的遠(yuǎn)期療效有限,且2025
01-23基于豬尾組織培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染研究
摘要:本研究采用豬尾小組織塊貼壁培養(yǎng)法成功分離培養(yǎng)出原代豬成纖維細(xì)胞,并進(jìn)行了不同時(shí)期的綠色熒光蛋白(GFP)陽(yáng)性質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率的研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,原代細(xì)胞具有較高的轉(zhuǎn)染效率,且傳代和復(fù)蘇細(xì)胞亦能成功轉(zhuǎn)染。該研究為豬成纖維細(xì)胞的基因編輯和體細(xì)胞克隆提供了有價(jià)值的參考。引言:成纖維細(xì)胞作為重要的供體細(xì)胞之一,在醫(yī)學(xué)、動(dòng)物科學(xué)及基礎(chǔ)研究中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。在醫(yī)學(xué)上,成纖維細(xì)胞可用于疾病診斷、人工皮膚制備、組織創(chuàng)傷修復(fù)及組織器官培養(yǎng)等方面。在動(dòng)物科學(xué)領(lǐng)域,成纖維細(xì)胞則可用于體細(xì)胞克隆及轉(zhuǎn)基因研究,以2025
01-232025
01-23原代海馬神經(jīng)元轉(zhuǎn)染方法優(yōu)化利樹突棘觀察
摘要:本文旨在探索優(yōu)化原代大鼠海馬神經(jīng)元轉(zhuǎn)染方法,以提高樹突棘形態(tài)學(xué)觀察的效果。通過(guò)比較Lipofectamine2000和慢病毒轉(zhuǎn)染方法,發(fā)現(xiàn)Lipofectamine2000在轉(zhuǎn)染效率和熒光表達(dá)上更具優(yōu)勢(shì)。在培養(yǎng)12天的神經(jīng)元中轉(zhuǎn)染,20天時(shí)樹突棘形態(tài)學(xué)觀察效果佳。本研究為神經(jīng)退行性疾病的突觸可塑性機(jī)制研究提供了重要手段。引言:樹突棘是腦內(nèi)興奮性連接的主要位點(diǎn),在突觸形成及其功能上發(fā)揮著重要作用。樹突棘在數(shù)量和形態(tài)方面的改變會(huì)直接影響突觸的功能,進(jìn)而影響腦功能的改變。因此,觀察培養(yǎng)原代海馬神2025
01-232025
01-23牛朊蛋白基因 prnp敲除載體構(gòu)建與轉(zhuǎn)染
摘要:本研究旨在通過(guò)基因打靶技術(shù),構(gòu)建牛朊蛋白基因prnp的敲除載體,并轉(zhuǎn)染牛胎兒成纖維細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)prnp基因的高效敲除。利用正負(fù)篩選策略富集中靶細(xì)胞,最終獲得了9個(gè)陽(yáng)性細(xì)胞克隆。本研究為生產(chǎn)抗瘋牛病的轉(zhuǎn)基因牛提供了理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。引言:朊蛋白(Prionprotein)是動(dòng)物傳染性海綿狀腦病的致病蛋白,由prnp基因編碼的一種糖蛋白。在牛中,這種病癥被稱為瘋牛?。˙SE),是一種嚴(yán)重危害人類健康和世界經(jīng)濟(jì)發(fā)展的傳染性疾病。瘋牛病的病原體是PrPsc,一種內(nèi)源性膜錨定蛋白PrPc(由prnp2025
01-22聚凝胺對(duì)慢病毒轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞效率的提升
摘要:本文探討了聚凝胺(Polybrene)在提升慢病毒轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞效率中的作用。通過(guò)詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)施,發(fā)現(xiàn)聚凝胺能顯著增強(qiáng)病毒顆粒與樹突狀細(xì)胞的結(jié)合,從而提高轉(zhuǎn)染效率。本研究為基因功能研究和基因治療提供了新的策略,具有廣闊的應(yīng)用前景。引言:基因轉(zhuǎn)染技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究中占據(jù)重要地位,尤其在基因功能研究和基因治療領(lǐng)域。慢病毒載體因其高效、穩(wěn)定的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染。然而,樹突狀細(xì)胞(DendriticCells,DCs)作為重要的免疫細(xì)胞,其轉(zhuǎn)染效率一直較低,限制了相關(guān)研究的進(jìn)展。聚凝2025
01-22鼓室內(nèi)注射慢病毒轉(zhuǎn)染小鼠耳蝸技術(shù)改良
引言內(nèi)耳疾病,如感音神經(jīng)性耳聾和梅尼埃病等,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量?;蛑委熥鳛橐环N新興的治療手段,在內(nèi)耳疾病的治療中展現(xiàn)出巨大潛力。然而,內(nèi)耳結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性和對(duì)損傷的高度敏感性,使得基因遞送成為一大挑戰(zhàn)。慢病毒載體因其高效、持久的基因表達(dá)能力,成為內(nèi)耳基因治療研究的工具。小鼠耳蝸鼓室內(nèi)注射是常用的內(nèi)耳基因遞送方法之一,但轉(zhuǎn)染效率往往受到多種因素的影響。因此,優(yōu)化小鼠耳蝸鼓室內(nèi)慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù),提高轉(zhuǎn)染效率和安全性,對(duì)于推動(dòng)內(nèi)耳基因治療的發(fā)展具有重要意義。構(gòu)建慢病毒轉(zhuǎn)染內(nèi)耳疾病的轉(zhuǎn)化體系,不僅有助于2025
01-222025
01-22優(yōu)化外源基因?qū)氩溉閯?dòng)物細(xì)胞的關(guān)鍵條件
引言外源基因?qū)氩溉閯?dòng)物細(xì)胞是基因功能研究、基因治療及細(xì)胞工程等領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)。高效、安全的基因轉(zhuǎn)移方法對(duì)于實(shí)現(xiàn)外源基因在細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定表達(dá)至關(guān)重要。傳統(tǒng)方法如脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染、病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)等雖各有優(yōu)勢(shì),但存在細(xì)胞毒性大、操作復(fù)雜或安全性隱患等問(wèn)題。電穿孔法作為一種物理轉(zhuǎn)染技術(shù),通過(guò)短暫施加高壓電場(chǎng)使細(xì)胞膜形成微小孔洞,允許外源DNA進(jìn)入細(xì)胞,具有操作簡(jiǎn)便、適用范圍廣及可大規(guī)模應(yīng)用等優(yōu)點(diǎn)。然而,電穿孔過(guò)程對(duì)細(xì)胞損傷較大,轉(zhuǎn)化效率與細(xì)胞存活率往往難以平衡,限制了其廣泛應(yīng)用。構(gòu)建高效、低毒的哺乳動(dòng)物細(xì)胞以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
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