SiHa人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
SiHa人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系源自人體子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織,是研究宮頸癌發(fā)病機(jī)制、開發(fā)治療策略的重要工具。在顯微鏡下,SiHa 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的上皮樣癌細(xì)胞形態(tài),多為多邊形或不規(guī)則形,細(xì)胞邊界清晰但常因快速增殖而相互擠壓,形成緊密排列的細(xì)胞簇或小型細(xì)胞團(tuán)。胞質(zhì)豐富,經(jīng)染色后呈弱嗜酸性,內(nèi)含大量線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器,為細(xì)胞快速增殖提供能量與物質(zhì)基礎(chǔ);細(xì)胞核大且深染,核質(zhì)比例顯著失調(diào),核仁明顯,部分細(xì)胞可見雙核或多核現(xiàn)象,甚至出現(xiàn)異常核分裂象,直觀體現(xiàn)出其惡性腫瘤細(xì)胞的本質(zhì)。
從生物學(xué)特性來看,SiHa 細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移能力,且與高危型人乳頭瘤病毒(HPV)關(guān)系密切。SiHa 細(xì)胞整合了 HPV16 的基因組,其 E6 和 E7 癌蛋白持續(xù)表達(dá),E6 蛋白與 p53 腫瘤抑制蛋白結(jié)合,促使 p53 降解,解除對細(xì)胞周期的抑制;E7 蛋白則與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白(pRb)結(jié)合,釋放轉(zhuǎn)錄因子 E2F,驅(qū)動(dòng)細(xì)胞從 G1 期進(jìn)入 S 期,在適宜培養(yǎng)條件下,SiHa 細(xì)胞倍增時(shí)間約為 36 - 48 小時(shí)。侵襲過程中,SiHa 細(xì)胞大量分泌基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2、MMP-9,能夠高效降解宮頸組織細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、層粘連蛋白等成分,破壞基底膜完整性;同時(shí),細(xì)胞表面整合素家族蛋白表達(dá)上調(diào),增強(qiáng)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附,輔助癌細(xì)胞脫離原發(fā)灶。此外,SiHa 細(xì)胞中 PI3K/AKT、MAPK 等信號通路持續(xù)激活,進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞存活、增殖與遷移。值得注意的是,SiHa 細(xì)胞在特定誘導(dǎo)條件下,如添加視huang酸等,會出現(xiàn)一定程度的細(xì)胞分化現(xiàn)象,細(xì)胞形態(tài)趨于扁平,角質(zhì)化程度增加,這一特性有助于研究宮頸癌的分化機(jī)制。
培養(yǎng) SiHa 細(xì)胞需嚴(yán)格遵循操作規(guī)范?;A(chǔ)培養(yǎng)基選用含 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富,配合胎牛血清中的生長因子,可滿足細(xì)胞生長需求;添加 1% 青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液防止細(xì)菌污染。將細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,模擬人體生理環(huán)境。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進(jìn)行消化傳代,消化過程需在顯微鏡下實(shí)時(shí)觀察,避免過度消化,傳代比例通常為 1:3 - 1:4 。凍存時(shí),采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,遵循程序降溫原則,先于 - 80℃冰箱過夜,再轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,SiHa 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用??蒲腥藛T利用基因編輯技術(shù)敲低 HPV16 E6/E7 基因表達(dá),發(fā)現(xiàn) SiHa 細(xì)胞增殖顯著受抑制,揭示了 HPV 致癌的關(guān)鍵機(jī)制。在藥物研發(fā)方面,SiHa 細(xì)胞系是篩選抗宮頸癌藥物的重要模型,新型靶向 PI3K/AKT 通路的抑制劑在該細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)中,能有效抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)凋亡;針對 HPV E6/E7 蛋白的免yi治療策略,也通過 SiHa 細(xì)胞驗(yàn)證了可行性,為宮頸癌的精準(zhǔn)治療提供了新方向,推動(dòng)宮頸癌診療技術(shù)不斷革新。
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