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BY-0993 L/1C2小鼠雜交瘤細(xì)胞系

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱(chēng) 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào) BY-0993
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2025/7/21 15:55:33
  • 訪問(wèn)次數(shù) 169
產(chǎn)品標(biāo)簽

小鼠雜交瘤細(xì)胞系L/1C2

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上海乾思生物科技有限公司 我們只做一件事,認(rèn)真做好試劑盒!

上海乾思生物科技有限公司,是一家專(zhuān)門(mén)供應(yīng)試劑盒的廠家。提供試劑盒解決方案。

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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。

供貨周期 現(xiàn)貨

L/1C2小鼠雜交瘤細(xì)胞系

L/1C2小鼠雜交瘤細(xì)胞系是單克隆抗體制備與免疫檢測(cè)領(lǐng)域的重要細(xì)胞模型,憑借穩(wěn)定分泌特異性抗體、良好的體外培養(yǎng)性能及精準(zhǔn)的抗原識(shí)別能力,在生物分子檢測(cè)、疾病診斷試劑研發(fā)及免疫學(xué)基礎(chǔ)研究中應(yīng)用廣泛,為單克隆抗體的規(guī)?;a(chǎn)與功能研究提供了可靠載體。

來(lái)源與背景:該細(xì)胞系源于 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合產(chǎn)物,通過(guò)經(jīng)典雜交瘤技術(shù)篩選克隆獲得。其建立過(guò)程是將經(jīng)特定抗原免疫后的 B 淋巴細(xì)胞與永生化骨髓瘤細(xì)胞融合,利用 HAT 培養(yǎng)基篩選出成功融合的雜交瘤細(xì)胞,再經(jīng)有限稀釋法克隆和抗體特異性檢測(cè),最終得到能穩(wěn)定分泌針對(duì)目標(biāo)抗原的單克隆抗體的細(xì)胞株。這一過(guò)程有效解決了多克隆抗體成分復(fù)雜、特異性不足、批間差異大的問(wèn)題,為獲取均一性高、靶向性強(qiáng)的抗體提供了穩(wěn)定來(lái)源,自建立以來(lái),在多種免疫檢測(cè)方法的建立中發(fā)揮了重要作用。
細(xì)胞特性:形態(tài)上呈現(xiàn)典型的雜交瘤細(xì)胞特征,貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈上皮樣多邊形,細(xì)胞質(zhì)豐富,細(xì)胞核大而圓,核質(zhì)比約 1:2.3,約 7% 的細(xì)胞可見(jiàn)雙核結(jié)構(gòu),體現(xiàn)融合細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)。核心特性顯著:抗體分泌穩(wěn)定高效,分泌量達(dá) 8-14μg/10?細(xì)胞 / 24h,連續(xù)傳代 56 次后,抗體分泌能力僅下降 8%,穩(wěn)定性?xún)?yōu)于多數(shù)同類(lèi)細(xì)胞系;抗原結(jié)合特異性高,與靶抗原的結(jié)合常數(shù)(Kd)達(dá) 10??M 級(jí)別,與同源抗原的交叉反應(yīng)率低于 0.9%,確保了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性;增殖能力穩(wěn)健,體外培養(yǎng)倍增時(shí)間約 51-57 小時(shí),克隆形成率 40%,腹腔接種 BALB/c 小鼠后,12-18 天可形成腹水,腹水中抗體濃度達(dá) 3-7mg/ml,便于批量制備抗體。傳代時(shí)采用常規(guī)方法處理,傳代比例 1:3-1:4,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 70%-75% 時(shí)需及時(shí)傳代,過(guò)度密集會(huì)導(dǎo)致抗體分泌量下降 16% 左右。
培養(yǎng)條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基,添加 1% 抗生素,培養(yǎng)環(huán)境控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。關(guān)鍵培養(yǎng)要點(diǎn):血清質(zhì)量關(guān)鍵,需使用低內(nèi)毒素胎牛血清(<0.3EU/ml),劣質(zhì)血清會(huì)使細(xì)胞活力降低 24%,抗體分泌量減少 30%;無(wú)血清培養(yǎng)適配性較好,在無(wú)血清培養(yǎng)基中添加適量的胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白等營(yíng)養(yǎng)因子,可維持細(xì)胞正常生長(zhǎng),且抗體純度能提高至 93% 以上,有利于后續(xù)的抗體純化;腹水制備規(guī)范,小鼠腹腔預(yù)先注射降植烷,7 天后接種 1.1×10?個(gè)細(xì)胞,13-19 天收集腹水,每只小鼠可收獲 2-5ml 腹水,腹水經(jīng)純化后抗體活性保持穩(wěn)定。凍存采用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液,程序降溫后液氮保存,復(fù)蘇后 48 小時(shí)貼壁率達(dá) 78%,抗體分泌功能恢復(fù) 83% 以上。
檢測(cè)鑒定:經(jīng)嚴(yán)格的微生物檢測(cè),無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染,符合雜交瘤細(xì)胞的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)??贵w亞型鑒定為 IgG2a 型,輕鏈為 κ 型;通過(guò) ELISA、免疫印跡等方法驗(yàn)證,該抗體能特異性結(jié)合靶抗原,無(wú)明顯交叉反應(yīng);染色體核型分析顯示,其染色體數(shù)目為 83-93 條,融合了親本 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的染色體特征,符合雜交瘤細(xì)胞的遺傳學(xué)特性;功能驗(yàn)證中,將該抗體用于免疫組化檢測(cè)時(shí),能特異性識(shí)別組織中的靶抗原,陽(yáng)性信號(hào)清晰,背景干擾低,證實(shí)其在免疫檢測(cè)中的實(shí)用性。

應(yīng)用領(lǐng)域:在生物分子檢測(cè)方面,基于該細(xì)胞系分泌的抗體構(gòu)建的 ELISA 試劑盒,檢測(cè)靈敏度達(dá) 0.45ng/ml,線性范圍寬,適用于血清、組織等多種樣本類(lèi)型中靶抗原的定量分析;在疾病診斷試劑研發(fā)中,利用該抗體開(kāi)發(fā)的免疫熒光探針,可用于病理切片中靶抗原的可視化檢測(cè),診斷符合率達(dá) 89%。在免疫學(xué)研究中,可用于抗原表位分析,通過(guò)肽掃描實(shí)驗(yàn)確定抗原的特異性結(jié)合區(qū)域,為疫苗設(shè)計(jì)提供關(guān)鍵信息。此外,該細(xì)胞系可用于優(yōu)化抗體生產(chǎn)工藝,通過(guò)調(diào)整懸浮培養(yǎng)的溫度、pH 值等條件,能使抗體產(chǎn)量提升 1.3-1.9 倍,有助于降低抗體規(guī)?;a(chǎn)的成本,為免疫檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展及相關(guān)疾病的精準(zhǔn)診斷提供了重要支持。

以上信息僅供參考,詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。



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