LS180人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
LS180人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系源自人體結(jié)腸腺癌組織,是腫瘤研究領(lǐng)域的重要工具。倒置顯微鏡下,細(xì)胞呈典型上皮樣形態(tài),多邊形或不規(guī)則形,邊界清晰,常聚集成團(tuán),部分形成類似腺管的立體結(jié)構(gòu),高度模擬結(jié)腸腺癌的組織學(xué)特征。胞質(zhì)經(jīng) HE 染色呈淡粉色弱嗜酸性,線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器豐富,為細(xì)胞增殖供能并參與蛋白合成;細(xì)胞核大且深染,核仁明顯,雙核、多核現(xiàn)象常見,凸顯其惡性特質(zhì)。
在生物學(xué)特性上,LS180 細(xì)胞的增殖與侵襲能力ji強(qiáng)。細(xì)胞周期調(diào)控紊亂,Cyclin E 與 CDK2 過度表達(dá),激活細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶,使細(xì)胞在 36 - 48 小時(shí)即可完成倍增。侵襲過程中,細(xì)胞大量分泌 MMP-7、MMP-9 等基質(zhì)金屬蛋白酶,降解細(xì)胞外基質(zhì),破壞結(jié)腸基底膜。同時(shí),E-cadherin 表達(dá)下降,β-catenin 轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核激活 Wnt/β-catenin 信號通路,誘導(dǎo)上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),增強(qiáng)細(xì)胞運(yùn)動能力;整合素家族蛋白表達(dá)上調(diào),輔助癌細(xì)胞脫離原發(fā)灶。此外,PI3K/AKT 信號通路持續(xù)激活,驅(qū)動腫瘤惡化。
培養(yǎng) LS180 細(xì)胞需嚴(yán)格規(guī)范流程。以 McCoy's 5A 培養(yǎng)基為基礎(chǔ),添加 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清提供生長因子,加入 1% 青mei素 - 鏈mei素雙抗防止污染。將細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,維持生理環(huán)境。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá) 80% - 90% 時(shí),用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液消化傳代,控制比例在 1:3 - 1:4。凍存時(shí)采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合液,程序降溫后液氮保存。
在科研應(yīng)用中,LS180 細(xì)胞系成果豐碩。借助 CRISPR/Cas9 技術(shù),研究發(fā)現(xiàn) Notch 與 Wnt/β-catenin 信號通路協(xié)同促進(jìn)癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移。藥物研發(fā)方面,靶向 KRAS G12C 突變的抑制劑在該細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)中效guo顯著,免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合hua療方案也經(jīng)其驗(yàn)證后應(yīng)用于臨床。通過構(gòu)建裸鼠移植瘤模型,還可深入探究腫瘤微環(huán)境對結(jié)腸腺癌的影響,為診療技術(shù)創(chuàng)新提供關(guān)鍵支撐。
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