BY-1543 NBTF新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1543
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- 更新時(shí)間 2025/8/6 10:28:13
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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NBTF新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞系
NBTF新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞系作為眼表纖維化研究的核心貼壁模型,以其穩(wěn)定的成纖維細(xì)胞功能和典型的創(chuàng)傷修復(fù)特性,在眼表瘢痕形成機(jī)制解析、青光眼術(shù)后抗瘢痕研究及眼科藥物研發(fā)中具有不可替代的地位。與 NBLE 新生牛眼晶體上皮細(xì)胞系的晶狀體研究定位不同,該細(xì)胞系源自新生牛眼 Tenon's 囊組織,為探索眼表結(jié)締組織的修復(fù)與纖維化過程提供了貼近在體狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)載體。
細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
該細(xì)胞系源自健康新生牛的眼球 Tenon's 囊組織,通過 0.2% 膠原酶聯(lián)合 0.1% yi酶消化法獲得原代成纖維細(xì)胞后,經(jīng)成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物波形蛋白(Vimentin)免疫熒光篩選純化建立。其核心特征是高純度保留新生牛眼 Tenon's 囊成纖維細(xì)胞的功能表型:波形蛋白陽性率達(dá) 98%,成纖維細(xì)胞活化標(biāo)志物 α- 平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)基礎(chǔ)表達(dá)率低于 5%,而 NBLE 的波形蛋白陽性率僅為 1%,細(xì)胞純度較傳統(tǒng)組織塊培養(yǎng)法提升 60%。
細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)典型的長梭形成纖維樣,胞體長度約 100-120μm,寬度約 15-20μm,較 NBLE 的多邊形上皮細(xì)胞更大,細(xì)胞核呈長橢圓形(核質(zhì)比約 1:4.5),排列呈放射狀或漩渦狀,與體內(nèi) Tenon's 囊成纖維細(xì)胞的形態(tài)吻合度達(dá) 94%。培養(yǎng)體系需精準(zhǔn)調(diào)控:含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基(添加 2ng/mL 轉(zhuǎn)化生長因子 -β1 抑制劑),在 37℃、5% CO?環(huán)境下貼壁生長,倍增時(shí)間約 42-46 小時(shí)(短于 NBLE)。傳代需在細(xì)胞融合度達(dá) 80%-90% 時(shí)進(jìn)行,采用 1:3 比例接種,過度密集會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞提前活化(α-SMA 表達(dá)量上升 40%)。
功能驗(yàn)證顯示,該細(xì)胞系保留關(guān)鍵修復(fù)功能:膠原蛋白 Ⅰ 合成速率達(dá) 28μg/(10?細(xì)胞?24h),顯著高于 NBLE 的晶體蛋白合成量;細(xì)胞遷移能力穩(wěn)定(劃痕愈合率 48 小時(shí)達(dá) 65%),連續(xù)傳代 25 次后仍保持核型穩(wěn)定(60 條染色體,與牛物種核型一致),無支原體及眼表病原體污染。
核心應(yīng)用領(lǐng)域
眼表纖維化機(jī)制研究
NBTF 細(xì)胞系是解析 Tenon's 囊成纖維細(xì)胞活化機(jī)制的理想模型。在創(chuàng)傷修復(fù)信號(hào)通路研究中,該細(xì)胞系表現(xiàn)出典型的纖維化特征:轉(zhuǎn)化生長因子 -β1(TGF-β1)刺激后,α-SMA 表達(dá)量增加 8.2 倍,膠原蛋白 Ⅰ 基因轉(zhuǎn)錄水平提升 6.5 倍,而 NBLE 在相同刺激下無顯著變化。通過該模型發(fā)現(xiàn),Tenon's 囊成纖維細(xì)胞中獨(dú)te的 Smad3 磷酸化模式(持續(xù)激活達(dá) 72 小時(shí))是眼表瘢痕形成的關(guān)鍵,為理解青光眼術(shù)后濾過泡瘢痕化提供了直接證據(jù)。
青光眼術(shù)后抗瘢痕研究模型
在濾過性手術(shù)瘢痕模型中,該細(xì)胞系的應(yīng)用價(jià)值尤為突出。對(duì)比 NBTF 與瘢痕模型細(xì)胞系發(fā)現(xiàn),后者的細(xì)胞外基質(zhì)沉積量是正常細(xì)胞的 5.8 倍,收縮能力增強(qiáng) 4.2 倍,與臨床青光眼術(shù)后濾過泡失敗的病理特征吻合度達(dá) 92%。而 NBLE 因細(xì)胞類型差異,wan全無法模擬成纖維細(xì)胞介導(dǎo)的收縮過程。在抗瘢痕藥物篩選中,該細(xì)胞系可量化反映藥物效果:絲lie霉素 C 處理后,細(xì)胞增殖率僅為正常細(xì)胞的 28%,而 NBLE 的增殖抑制率與之差異顯著(45%),提示其物種特異性反應(yīng)。
眼科抗纖維化藥物評(píng)價(jià)
該細(xì)胞系為眼用抗瘢痕藥物的安全性與有效性測(cè)試提供了專屬平臺(tái)。在新型抗纖維化肽的評(píng)價(jià)中,NBTF 細(xì)胞系的 α-SMA 表達(dá)抑制率與動(dòng)物模型濾過泡存活率的相關(guān)性達(dá) 0.93,顯著高于 NBLE(0.58)。某青光眼術(shù)后抗瘢痕藥物測(cè)試顯示,當(dāng)濃度為 15μmol/L 時(shí),該細(xì)胞系的膠原蛋白合成量下降 52%,細(xì)胞遷移速率降低 48%,提示其潛在臨床價(jià)值,為給藥方案設(shè)計(jì)提供了關(guān)鍵參考。
與 NBLE 細(xì)胞系的差異及協(xié)同
兩者雖同源自新生牛眼組織,但功能定位截然不同:NBTF 專注于眼表結(jié)締組織的纖維化與修復(fù)研究,而 NBLE 聚焦晶狀體的透明性維持與代謝功能;在眼創(chuàng)傷修復(fù)的整體研究中,兩者可分別模擬 Tenon's 囊瘢痕形成和晶狀體混濁過程,形成眼內(nèi)創(chuàng)傷修復(fù)的多細(xì)胞模型體系。例如,在眼球穿通傷研究中,NBTF 的活化程度與 NBLE 的晶體蛋白損傷存在顯著相關(guān)性(相關(guān)系數(shù) 0.81),反映了眼內(nèi)不同組織的協(xié)同損傷機(jī)制。
優(yōu)勢(shì)與局限性
優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在:高度模擬新生牛眼 Tenon's 囊成纖維細(xì)胞的體內(nèi)活化特性,尤其適合眼表纖維化研究;細(xì)胞增殖活力強(qiáng),可大量用于高通量藥物篩選;作為標(biāo)準(zhǔn)化成纖維細(xì)胞模型,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)重復(fù)性優(yōu)于原代細(xì)胞(CV 值<5%)。局限性包括:無法wan全模擬體內(nèi)復(fù)雜的眼表微環(huán)境(需三維共培養(yǎng)技術(shù)彌補(bǔ));新生牛與成年動(dòng)物的成纖維細(xì)胞活性存在差異(老年個(gè)體的纖維化潛能更高);與人類 Tenon's 囊成纖維細(xì)胞的藥物反應(yīng)性存在物種差異(部分抑制劑的 IC50 值相差 2-3 倍)。
研究意義與展望
該細(xì)胞系的建立填bu了眼表成纖維細(xì)胞模型的空白,目前已被用于 8 種眼科抗纖維化藥物的臨床前評(píng)價(jià)及青光眼術(shù)后瘢痕機(jī)制研究。未來通過微流控芯片技術(shù)構(gòu)建 “眼表瘢痕微環(huán)境模型”(目前單層培養(yǎng)的功能模擬度約 68%),結(jié)合單細(xì)胞測(cè)序技術(shù),有望更精準(zhǔn)重現(xiàn)成纖維細(xì)胞的異質(zhì)性活化過程。作為眼表纖維化研究的 “標(biāo)準(zhǔn)工具”,它將推動(dòng)抗瘢痕治療從經(jīng)驗(yàn)性用藥向精準(zhǔn)靶向治療的轉(zhuǎn)變,為提高眼科手術(shù)成功率和開發(fā)新型抗纖維化藥物提供可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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