T47D人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
T47D人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系源于女性乳腺導(dǎo)管癌組織,自建立以來,已成為乳腺癌基礎(chǔ)研究與藥物開發(fā)領(lǐng)域的核心工具。在顯微鏡下,T47D 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的上皮樣形態(tài),細(xì)胞多為多邊形或短梭形,彼此緊密相連,形成鋪路石狀的細(xì)胞單層。細(xì)胞胞質(zhì)豐富,經(jīng)蘇木精 - 伊紅染色后呈淡嗜酸性,細(xì)胞核大且圓,核仁明顯,部分細(xì)胞還可見雙核或多核現(xiàn)象,這些形態(tài)學(xué)特征與乳腺導(dǎo)管癌組織中的癌細(xì)胞高度相似,為研究乳腺癌細(xì)胞的形態(tài)變化提供了直觀樣本。
從生物學(xué)特性來看,T47D 細(xì)胞具有du特的生物學(xué)行為。作為激素受體陽性乳腺癌細(xì)胞系,T47D 細(xì)胞高表達(dá)雌激素受體 α(ERα)和孕激素受體(PR),這一特性使其對(duì)雌激素等甾體激素高度敏感。在雌激素作用下,ERα 與雌激素結(jié)合形成復(fù)合物,進(jìn)入細(xì)胞核后與 DNA 上的雌激素反應(yīng)元件(ERE)結(jié)合,調(diào)控下游基因表達(dá),驅(qū)動(dòng)細(xì)胞增殖。研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)培養(yǎng)基中添加雌激素后,T47D 細(xì)胞的增殖速率提升約 40%,而使用選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)或芳香化酶抑制劑,可顯著抑制細(xì)胞生長(zhǎng)。在侵襲轉(zhuǎn)移方面,T47D 細(xì)胞可分泌基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9,降解乳腺組織中的細(xì)胞外基質(zhì)成分,為癌細(xì)胞突破基底膜創(chuàng)造條件。同時(shí),細(xì)胞表面上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)蛋白表達(dá)變化,E-cadherin 表達(dá)下調(diào),N-cadherin 和 Vimentin 表達(dá)上調(diào),使細(xì)胞獲得間質(zhì)細(xì)胞特性,增強(qiáng)其遷移能力。此外,T47D 細(xì)胞中 PI3K/AKT 信號(hào)通路常處于激活狀態(tài),該通路激活后可抑制促凋亡蛋白 Bad 活性,促進(jìn)抗凋亡蛋白 Bcl-2 表達(dá),幫助癌細(xì)胞逃避凋亡,進(jìn)一步推動(dòng)腫瘤發(fā)展。
培養(yǎng) T47D 細(xì)胞需嚴(yán)格把控條件。常用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)體系,胎牛血清提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液防止細(xì)菌污染。培養(yǎng)環(huán)境設(shè)定為 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱,維持細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡和酶活性。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液進(jìn)行傳代,消化時(shí)需在顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓、間隙增大時(shí)及時(shí)終止消化,傳代比例一般為 1:3 - 1:4 。凍存時(shí),采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜組成的凍存液,先置于 - 80℃冰箱過夜,再轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期保存,以保證細(xì)胞活性。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,T47D 細(xì)胞系發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在乳腺癌發(fā)病機(jī)制研究中,科研人員通過基因編輯技術(shù),敲低或過表達(dá) T47D 細(xì)胞中的 ERα、PI3K 等關(guān)鍵基因,深入探究乳腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制,發(fā)現(xiàn) Wnt/β-catenin 信號(hào)通路與 ERα 協(xié)同調(diào)控癌細(xì)胞增殖。在藥物研發(fā)方面,T47D 細(xì)胞系是篩選抗乳腺癌藥物的重要模型。例如,他mo昔芬、氟維司群等經(jīng)典內(nèi)分泌治療藥物,均通過 T47D 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了其對(duì) ER 陽性乳腺癌細(xì)胞的抑制作用;新型靶向 PI3K/AKT/mTOR 通路的抑制劑在 T47D 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,能顯著降低細(xì)胞增殖活性、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,為乳腺癌精準(zhǔn)治療提供了新方向。此外,利用 T47D 細(xì)胞系開展的腫瘤微環(huán)境研究,探索癌細(xì)胞與乳腺間質(zhì)細(xì)胞、免疫細(xì)胞的相互作用,也為開發(fā)多維度聯(lián)合治療策略奠定了基礎(chǔ),持續(xù)推動(dòng)乳腺癌診療技術(shù)的進(jìn)步。
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