LTEP-s人肺鱗癌細(xì)胞系
LTEP-s人肺鱗癌細(xì)胞系源自人體肺鱗癌組織,是探索肺鱗癌發(fā)病機(jī)制、開(kāi)發(fā)有效治療手段的關(guān)鍵模型。在顯微鏡下,LTEP-s 細(xì)胞呈現(xiàn)出典型的鱗狀上皮細(xì)胞形態(tài)特征,細(xì)胞多為多邊形,胞質(zhì)豐富,經(jīng)染色后呈強(qiáng)嗜酸性,宛如披上一層橘紅色外衣,這與鱗狀細(xì)胞富含角蛋白的特性相契合。細(xì)胞邊界清晰,部分細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞間橋,形似微觀世界里細(xì)胞間的 “牽手游廊”,緊密連接形成大小不一的細(xì)胞巢,巢中央有時(shí)可見(jiàn)角化珠結(jié)構(gòu),高度模擬了肺鱗癌在體內(nèi)的組織學(xué)形態(tài)。細(xì)胞核大而不規(guī)則,染色質(zhì)粗糙,核仁明顯,部分細(xì)胞還可見(jiàn)核分裂象,這些形態(tài)學(xué)特征直觀展現(xiàn)了其惡性腫瘤細(xì)胞的本質(zhì)。
從生物學(xué)特性來(lái)看,LTEP-s 細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移能力。在增殖方面,細(xì)胞周期調(diào)控基因 Cyclin D1、CDK4 異常高表達(dá),打破正常細(xì)胞周期調(diào)控,激活細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶,促使細(xì)胞快速且持續(xù)地分裂增殖,在適宜培養(yǎng)條件下,其倍增時(shí)間約為 36 - 48 小時(shí)。侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中,LTEP-s 細(xì)胞宛如 “破壞者”,大量分泌基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2、MMP-9,這些蛋白酶能夠高效降解肺組織細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、層粘連蛋白等成分,破壞基底膜完整性,為癌細(xì)胞突破肺組織屏障創(chuàng)造條件。同時(shí),細(xì)胞表面整合素 αvβ6 表達(dá)上調(diào),增強(qiáng)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附能力,輔助癌細(xì)胞遷移;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β(TGF-β)信號(hào)通路在 LTEP-s 細(xì)胞中異常激活,誘導(dǎo)上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),使細(xì)胞 E-cadherin 表達(dá)下調(diào),N-cadherin 和 Vimentin 表達(dá)上調(diào),獲得間質(zhì)細(xì)胞特性,侵襲能力進(jìn)一步增強(qiáng)。此外,LTEP-s 細(xì)胞中 PI3K/AKT、MAPK 等信號(hào)通路持續(xù)激活,為癌細(xì)胞的存活、增殖與轉(zhuǎn)移提供 “燃料”。
培養(yǎng) LTEP-s 細(xì)胞需嚴(yán)格把控條件。常用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)體系,胎牛血清富含胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白等多種生長(zhǎng)因子,能滿足細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝需求;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,可有效預(yù)防細(xì)菌污染。將細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,模擬人體生理環(huán)境,維持細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡與酶活性。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進(jìn)行消化傳代,消化過(guò)程需在顯微鏡下實(shí)時(shí)觀察,避免過(guò)度消化損傷細(xì)胞,傳代比例通??刂圃?1:3 - 1:4 。凍存時(shí),采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,遵循程序降溫原則,先于 - 80℃冰箱過(guò)夜,再轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期保存,以最da程度保留細(xì)胞活性。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,LTEP-s 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用??蒲腥藛T借助基因編輯技術(shù),在 LTEP-s 細(xì)胞上深入研究發(fā)現(xiàn),F(xiàn)GFR1 基因擴(kuò)增與肺鱗癌細(xì)胞的增殖、耐藥密切相關(guān),為揭示肺鱗癌發(fā)病機(jī)制提供了新線索。在藥物研發(fā)方面,LTEP-s 細(xì)胞系是篩選抗肺鱗癌藥物的重要模型,新型的靶向 FGFR1 的小分子抑制劑,在該細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)中,能夠顯著抑制細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合hua療藥物的相關(guān)實(shí)驗(yàn),也在 LTEP-s 細(xì)胞上驗(yàn)證了其協(xié)同增強(qiáng)抗癌效果的可行性,為肺鱗癌的臨床治療提供了堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)與創(chuàng)新方向,持續(xù)推動(dòng)肺鱗癌診療技術(shù)的革新與進(jìn)步。
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