LS 180 (CL-187)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
LS 180 (CL-187)人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系源于人體結(jié)腸腺癌組織，作為腫瘤研究領(lǐng)域的經(jīng)典模型，其為揭示結(jié)腸腺癌奧秘、探索有效治療策略提供了重要支撐。在倒置顯微鏡下，LS 180 細(xì)胞宛如微觀世界里的 “異形兵團(tuán)”，呈現(xiàn)典型上皮樣形態(tài)，多邊形或不規(guī)則形狀的細(xì)胞邊界清晰，相互緊密貼合，常聚集成大小不一、形態(tài)各異的細(xì)胞團(tuán)，部分區(qū)域形成類似腺管的立體結(jié)構(gòu)，高度還原了結(jié)腸腺癌在體內(nèi)的組織學(xué)特征。細(xì)胞胞質(zhì)豐富，經(jīng) HE 染色后呈淡粉色弱嗜酸性，猶如裹著一層薄紗，其中線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器密集分布，線粒體為細(xì)胞feng狂增殖提供源源不斷的能量，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)則承擔(dān)著蛋白質(zhì)合成與運(yùn)輸?shù)闹厝?；?xì)胞核大而深染，占據(jù)細(xì)胞體積比例較高，核仁明顯且數(shù)量增多，雙核、多核細(xì)胞也較為常見，這些形態(tài)學(xué)特征充分彰顯其惡性腫瘤細(xì)胞的本質(zhì)。
在生物學(xué)特性方面，LS 180 細(xì)胞堪稱 “增殖與侵襲的能手”。細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制嚴(yán)重紊亂，Cyclin E 與 CDK2 蛋白過度表達(dá)，二者結(jié)合形成復(fù)合物，持續(xù)激活細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶，如同踩下細(xì)胞增殖的 “油門”，使細(xì)胞周期快速推進(jìn)，在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)環(huán)境下，其倍增時間僅需 36 - 48 小時 。侵襲轉(zhuǎn)移進(jìn)程中，LS 180 細(xì)胞大量分泌 MMP-7、MMP-9 等基質(zhì)金屬蛋白酶，這些蛋白酶如同 “拆遷隊”，對細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、層粘連蛋白等結(jié)構(gòu)進(jìn)行 “拆解”，破壞結(jié)腸組織基底膜的完整性，為癌細(xì)胞突破腸壁屏障、向周圍組織浸潤開辟道路。同時，細(xì)胞表面 E-cadherin 表達(dá)顯著下降，原本維持細(xì)胞間緊密連接的 “膠水” 減少，而 β-catenin 從細(xì)胞膜轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi)，激活 Wnt/β-catenin 信號通路，促使細(xì)胞發(fā)生上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT），獲得間質(zhì)細(xì)胞特性，運(yùn)動能力大幅提升；整合素家族蛋白表達(dá)上調(diào)，增強(qiáng)了細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的黏附力，輔助癌細(xì)胞脫離原發(fā)灶。此外，PI3K/AKT 信號通路在 LS 180 細(xì)胞中持續(xù)激活，不僅保障癌細(xì)胞存活與增殖，還調(diào)控著一系列侵襲相關(guān)基因的表達(dá)，推動腫瘤不斷惡化。
培養(yǎng) LS 180 細(xì)胞需嚴(yán)格遵循規(guī)范流程。以富含多種氨基酸和維生素的 McCoy's 5A 培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，添加 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，血清中豐富的生長因子、激素等物質(zhì)滿足細(xì)胞生長代謝需求；同時加入 1% 青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液，營造無菌培養(yǎng)環(huán)境。將細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中，模擬人體生理環(huán)境，維持細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡與酶活性。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時，使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液消化傳代，消化過程需在顯微鏡下實(shí)時觀察，防止過度消化損傷細(xì)胞，傳代比例一般控制在 1:3 - 1:4 。凍存時，采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液，按程序降溫，先于 - 80℃冰箱過夜，再轉(zhuǎn)入液氮中長期保存，確保細(xì)胞活性與生物學(xué)特性穩(wěn)定。
在科研應(yīng)用中，LS 180 細(xì)胞系發(fā)揮著核心作用。近年來，科研人員借助 CRISPR/Cas9 基因編輯技術(shù)，在 LS 180 細(xì)胞中深入研究發(fā)現(xiàn)，Notch 信號通路與 Wnt/β-catenin 信號通路存在協(xié)同作用，共同促進(jìn)癌細(xì)胞增殖與轉(zhuǎn)移。在藥物研發(fā)領(lǐng)域，新型靶向 KRAS G12C 突變的抑制劑在 LS 180 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中展現(xiàn)出良好的抑瘤效果；免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合hua療藥物的方案，經(jīng)該細(xì)胞系驗(yàn)證后，已逐步應(yīng)用于臨床，為結(jié)腸腺癌患者帶來新的希望。此外，通過構(gòu)建 LS 180 細(xì)胞裸鼠移植瘤模型，科學(xué)家們能夠深入探究腫瘤微環(huán)境對結(jié)腸腺癌生長、轉(zhuǎn)移的影響，加速結(jié)腸腺癌診療技術(shù)的創(chuàng)新發(fā)展。
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