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BY-0617 DF-1雞胚成纖維細胞系

具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號 BY-0617
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時間 2025/8/5 10:44:41
  • 訪問次數(shù) 242
產(chǎn)品標簽

雞胚成纖維細胞DF-1

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供貨周期 現(xiàn)貨
DF-1雞胚成纖維細胞系
在禽類細胞模型研究領域,DF-1雞胚成纖維細胞系以其獨te的生物學特性,成為病毒培養(yǎng)、疫苗研發(fā)及基因功能研究的核心工具。與哺乳動物來源的平滑肌細胞系(如 CCC-SMC-2)不同,該細胞系源自禽類胚胎組織,在禽類病毒宿主 - 病原體相互作用研究中具有不可替代的優(yōu)勢。
細胞起源與生物學特性
DF-1 細胞系建立于 1996 年,源自 10 日齡 SPF(無特定病原體)雞胚的肢芽與軀干組織,通過原代培養(yǎng)結(jié)合自發(fā)性永生化篩選獲得(未經(jīng)過外源性永生化基因轉(zhuǎn)染)。這一特性使其保留了原代雞胚成纖維細胞的生物學特征,同時具備無限增殖能力(連續(xù)傳代超過 200 次仍保持穩(wěn)定表型),解決了原代雞胚成纖維細胞傳代受限(僅 5-7 代)的難題。
細胞形態(tài)呈典型的長梭形成纖維樣,胞質(zhì)豐富,細胞核呈橢圓形(核質(zhì)比約 1:4.8),較 CCC-SMC-2 細胞更為纖細。在培養(yǎng)特性上,DF-1 對營養(yǎng)條件要求較低,最適體系為含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基(添加 1% 雙抗),在 37℃、5% CO?環(huán)境下貼壁生長,倍增時間約 22-24 小時(顯著短于 CCC-SMC-2 的 56 小時)。細胞融合度達 80%-90% 時需傳代,推薦比例 1:4,過度密集會導致細胞形態(tài)纖維化(波形蛋白表達量上升 2.3 倍)。
功能鑒定顯示,DF-1 高表達成纖維細胞標志物波形蛋白(Vimentin,99% 陽性),低表達上皮細胞標志物細胞角蛋白(<5%),且無內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒污染(經(jīng) RT-PCR 與病毒分離實驗驗證),這一特性使其成為生物安全級疫苗生產(chǎn)的關鍵細胞基質(zhì)。
核心應用領域
病毒培養(yǎng)與分離
DF-1 對禽類病毒具有廣譜敏感性,是禽liu感病毒(H5N1、H9N2)、新城疫病毒、馬立克氏病毒等的理想宿主細胞。與傳統(tǒng)雞胚培養(yǎng)相比,該細胞系可通過定量 PCR 與空斑實驗精確測定病毒滴度(如 H9N2 病毒滴度可達 10???PFU/mL),且能穩(wěn)定傳代病毒超過 15 次(雞胚培養(yǎng)僅能傳代 5-6 次)。研究顯示,DF-1 禽liu感病毒后,48 小時內(nèi)即可觀察到明顯的細胞病變(CPE),表現(xiàn)為細胞融合、脫落(病變率達 85%),而 CCC-SMC-2 等哺乳動物細胞對禽類病毒幾乎無敏感性。
疫苗研發(fā)與生產(chǎn)
作為 WHO 推薦的禽類疫苗生產(chǎn)細胞系,DF-1 已廣泛應用于滅活疫苗與減毒活疫苗研發(fā)。在禽liu感疫苗生產(chǎn)中,該細胞系的病毒增殖效率是 VERO 細胞的 3.8 倍,且表達的病毒血凝素(HA)蛋白活性更高(血凝效價達 1:128)。2023 年某禽liu感疫苗候選株通過 DF-1 細胞培養(yǎng)實現(xiàn)規(guī)?;a(chǎn),疫苗效價較雞胚培養(yǎng)提升 40%,生產(chǎn)成本降低 25%。
基因功能研究
DF-1 的無限增殖能力使其成為禽類基因編輯的理想模型。通過 CRISPR/Cas9 技術敲除 IFN-α 基因后,細胞對新城疫病毒的敏感性提升 5.2 倍(病毒滴度從 10??1 升至 10???),證實干擾素通路在抗病毒免疫中的核心作用。此外,該細胞系可高效表達外源基因(轉(zhuǎn)染效率達 65%),常用于禽類病毒蛋白的表達與純化(如禽liu感病毒 NP 蛋白產(chǎn)量達 15mg/L)。
優(yōu)勢與局限性
與其他禽類細胞系相比,DF-1 的核心優(yōu)勢在于:1)無內(nèi)源性病毒污染,生物安全性高;2)病毒敏感性強,適用于多種禽類病毒研究;3)培養(yǎng)成本低,易于規(guī)?;瘮U增。其局限性在于對哺乳動物病毒敏感性低(如豬瘟病毒無法在 DF-1 中增殖),且長期傳代(>150 次)可能出現(xiàn)染色體不穩(wěn)定(畸變率升至 3.2%)。
研究意義與展望
DF-1 雞胚成纖維細胞系的建立,推動了禽類病毒學研究從傳統(tǒng)雞胚培養(yǎng)向細胞水平的轉(zhuǎn)變。與 CCC-SMC-2 等專注于特定病理過程的細胞系不同,DF-1 以其廣譜適用性成為禽類生物醫(yī)學研究的 “多面手”。未來,通過基因編輯技術改造 DF-1(如敲除病毒受體基因),有望構(gòu)建耐藥性病毒研究模型;結(jié)合 3D 培養(yǎng)技術,可進一步提升疫苗生產(chǎn)效率(初步實驗顯示 3D 微球培養(yǎng)的病毒產(chǎn)量是平面培養(yǎng)的 2.1 倍)。作為禽類細胞模型的標gan,DF-1 正為動物疫病防控與公共衛(wèi)生安全提供關鍵技術支撐。

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