BY-1584 MPC-L4果子貍肺細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1584
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/8/7 8:56:32
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MPC-L4果子貍肺細胞系
MPC-L4果子貍肺細胞系作為果子貍呼吸系統(tǒng)的特異性體外模型,憑借其支氣管上皮細胞的典型表型與冠狀病毒受體的高表達特性,成為解析冠狀病毒呼吸道感染機制、跨物種傳播路徑及野生動物疫病防控研究的核心工具。相較于 Hed68 果子貍腎上皮細胞系的腎臟靶向性,該細胞系源自肺組織,更精準模擬了冠狀病毒在中間宿主呼吸道的自然感染過程,為揭示病毒從動物到人的傳播鏈條提供了不可替代的實驗載體。
細胞起源與生物學特性
該細胞系分離自 1 歲健康果子貍的肺葉組織,采用 0.2% 膠原酶與 0.25% yi酶分步消化法獲取支氣管上皮細胞,經(jīng)細胞角蛋白 19(CK19)和 Clara 細胞分泌蛋白(CC16)雙標篩選(共陽性率>98%)純化建立。其最xian著特征是保留果子貍肺部對冠狀病毒的高易感性:ACE2 受體表達量為 Hed68 腎細胞的 1.8 倍,絲an酸蛋白酶 TMPRSS2 表達量達 Hed68 的 2.3 倍,這種受體 - 蛋白酶的協(xié)同高表達,為病毒刺突蛋白的高效切割與細胞入侵提供了分子基礎,wan美體現(xiàn)了呼吸道作為冠狀病毒首要感染門戶的生物學特性。
細胞形態(tài)呈現(xiàn)典型的支氣管上皮細胞特征:柱狀胞體長 20-25μm、寬 7-9μm,胞質(zhì)內(nèi)纖毛密度為 Hed68 細胞的 3.2 倍(掃描電鏡觀察),細胞核呈橢圓形(核質(zhì)比 1:3.5),排列成假復層結(jié)構(gòu),與果子貍肺組織切片中支氣管上皮的形態(tài)吻合度達 96%。培養(yǎng)體系需精準模擬肺部微環(huán)境:含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基(添加 10ng/mL 氣道上皮生長因子),在 37℃、5% CO?、95% 濕度條件下貼壁生長,倍增時間 52-56 小時(略長于 Hed68)。傳代需在細胞融合度 75% 時進行,1:2 比例接種,在 8% 低氧環(huán)境中活性保持率達 88%(Hed68 為 82%),充分適應肺部的生理氧分壓環(huán)境。
功能驗證證實其保留關(guān)鍵肺部功能:黏液分泌量 28μg/(10?細胞?24h)(Hed68 為 12μg),纖毛擺動頻率 12 次 / 秒(Hed68 無纖毛結(jié)構(gòu));連續(xù)傳代 30 次后核型穩(wěn)定(44 條染色體,含果子貍特異性標記),無支原體污染,病毒受體表型保留率 93%(高于 Hed68 的 92%),為長期病毒學研究提供了穩(wěn)定可靠的模型保障。
核心應用價值
冠狀病毒呼吸道感染的分子機制解析
MPC-L4 細胞系在冠狀病毒肺部感染研究中展現(xiàn)出獨te優(yōu)勢。SARS-CoV-2 感染實驗顯示,其病毒復制滴度達 10?.2 TCID??/mL(Hed68 為 10?.1 TCID??/mL),細胞間傳播效率是 Hed68 的 2.5 倍(共聚焦顯微鏡追蹤)。研究發(fā)現(xiàn),果子貍支氣管上皮細胞的 ACE2 存在肺部特異性剪切變體(缺失 Exon3),使與病毒 S 蛋白的結(jié)合能降低 4.1kcal/mol,入侵效率提升 5.2 倍。與 Hed68 對比,MPC-L4 的先天免疫響應呈現(xiàn) “精準靶向” 特征:RLR 家族基因(RIG-I、MDA5)表達量為 Hed68 的 3.1 倍,而 NF-κB 通路激活強度僅為 Hed68 的 60%,這種調(diào)控模式既保證了抗病毒應答的有效性,又避免了過度炎癥對呼吸道的損傷,揭示了呼吸道細胞te有的免疫平衡策略。
跨物種傳播的肺部路徑研究
在冠狀病毒宿主跳躍機制研究中,該細胞系的應用具有突破性意義。對比果子貍與人類支氣管上皮細胞發(fā)現(xiàn),MPC-L4 的病毒刺突蛋白切割效率為人類細胞的 1.7 倍(依賴 TMPRSS2),但病毒組裝效率僅為人類細胞的 65%。通過該模型構(gòu)建的 “物種 - 組織” 傳播屏障圖譜顯示,果子貍肺部 O - 糖基轉(zhuǎn)移酶表達量為人類的 2.3 倍,導致病毒粒子表面糖基化修飾差異,成為限制跨物種傳播的關(guān)鍵分子屏障。氣液界面培養(yǎng)實驗中,MPC-L4 的病毒氣溶膠釋放量為 Hed68 的 4.8 倍,且氣溶膠中活病毒比例達 32%(Hed68 為 15%),直接證實了呼吸道是冠狀病毒空氣傳播的主要源頭。
野生動物疫病監(jiān)測與防控
作為果子貍呼吸系統(tǒng)疫病研究的標準模型,MPC-L4 在疫病預警中發(fā)揮重要作用。對 5 種蝙蝠冠狀病毒的交叉感染實驗顯示,其易感率達 78%(Hed68 為 52%),TLR3 基因啟動子區(qū)的果子貍特異性干擾素激活元件,
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