BY-1551 BT牛鼻甲骨細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1551
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- 更新時間 2025/8/6 12:01:22
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BT牛鼻甲骨細(xì)胞系
BT牛鼻甲骨細(xì)胞系作為牛源上呼吸道研究的核心貼壁模型，以其典型的鼻黏膜上皮特性和高效的呼吸道病毒應(yīng)答功能，在牛鼻甲骨生理機(jī)制解析、呼吸道病原體感染模型構(gòu)建及鼻用疫苗研發(fā)中具有不可替代的地位。與 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系的免疫細(xì)胞研究定位不同，該細(xì)胞系源自牛鼻甲骨黏膜組織，為探索上呼吸道第一道防線的防御功能及相關(guān)疾病提供了貼近在體狀態(tài)的實(shí)驗載體。
細(xì)胞起源與生物學(xué)特性
該細(xì)胞系源自健康成年牛的下鼻甲骨黏膜組織，通過 0.2% yi酶與 0.05% EDTA 聯(lián)合消化法獲得原代鼻黏膜上皮細(xì)胞后，經(jīng)鼻黏膜特異性標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白 18（CK18）免疫熒光篩選純化建立。其核心特征是高純度保留牛鼻甲骨上皮細(xì)胞的黏膜表型：CK18 陽性率達(dá) 98%，鼻黏膜黏液蛋白 MUC5AC 表達(dá)率 96%，而成纖維細(xì)胞標(biāo)志物波形蛋白陽性率低于 1%，細(xì)胞純度較傳統(tǒng)組織塊培養(yǎng)法提升 60%，顯著高于 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系的免疫細(xì)胞特性。
細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)典型的假復(fù)層柱狀上皮樣，胞體高度約 22-26μm，直徑約 10-13μm，較 BT 牛陀螺狀細(xì)胞更大，細(xì)胞核呈橢圓形（核質(zhì)比約 1:3.6），排列緊密且具有極性，與鼻甲骨黏膜上皮的在體結(jié)構(gòu)吻合度達(dá) 95%。培養(yǎng)體系需精準(zhǔn)調(diào)控：含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基（添加 20ng/mL 表皮生長因子和 10μg/mL 維生素 A），在 37℃、5% CO?、濕度 75% 環(huán)境下貼壁生長，倍增時間約 42-46 小時（長于 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系）。傳代需在細(xì)胞融合度達(dá) 80%-85% 時進(jìn)行，采用 1:3 比例接種，過度干燥會導(dǎo)致纖毛分化受阻（纖毛形成率下降 50%）。
功能驗證顯示，該細(xì)胞系保留關(guān)鍵鼻黏膜功能：纖毛擺動頻率穩(wěn)定在 10-12 次 / 秒，黏液分泌速率達(dá) 15μg/(10?細(xì)胞?24h)，連續(xù)傳代 25 次后仍保持核型穩(wěn)定（60 條染色體，與牛物種核型一致），無支原體及牛源呼吸道病原體污染，對牛鼻病毒的敏感性顯著高于 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系（感染率達(dá) 98%）。
核心應(yīng)用領(lǐng)域
鼻黏膜防御機(jī)制研究
BT 牛鼻甲骨細(xì)胞系是解析牛上呼吸道黏膜屏障功能的理想模型。在先天性免疫研究中，該細(xì)胞系表現(xiàn)出典型的黏膜特異性：脂多糖刺激后，鼻黏膜抗菌肽 β- 防御素 2 表達(dá)量增加 8.5 倍，而 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系在相同處理下僅上升 2.1 倍。通過該模型發(fā)現(xiàn)，牛鼻甲骨上皮細(xì)胞中存在獨(dú)te的 Toll 樣受體 3（TLR3）分布模式（基底膜高密度表達(dá)），是其快速識別鼻內(nèi)病毒的關(guān)鍵，為理解牛上呼吸道的病毒防御優(yōu)勢提供了直接證據(jù)。此外，其黏膜纖毛清除效率是氣管上皮細(xì)胞系的 1.4 倍，反映了鼻甲骨作為呼吸道門戶的高效防御特性。
呼吸道病毒感染模型
在牛傳染性鼻氣管炎病毒（IBRV）感染研究中，該細(xì)胞系的應(yīng)用價值尤為突出。對比正常與感染細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)，后者的病毒滴度達(dá) 10??2TCID??/mL，凋亡率是正常細(xì)胞的 7.2 倍，與臨床病例的鼻黏膜病理特征吻合度達(dá) 94%。而 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系因細(xì)胞類型差異，IBRV 感染率僅為 12%，無法模擬鼻黏膜感染過程。在病毒入侵機(jī)制研究中，該細(xì)胞系證實(shí)了 IBRV 通過細(xì)胞表面 herpesvirus entry mediator (HVEM) 分子進(jìn)入細(xì)胞，且感染后會特異性抑制纖毛相關(guān)基因 DNAH9 表達(dá)，導(dǎo)致黏膜清除功能喪失，這一發(fā)現(xiàn)為抗病du藥物開發(fā)提供了精準(zhǔn)靶點(diǎn)。
鼻用疫苗研發(fā)與評價
該細(xì)胞系是牛上呼吸道鼻用疫苗研發(fā)的核心平臺。在牛流感鼻用疫苗測試中，其誘導(dǎo)的黏膜免疫應(yīng)答強(qiáng)度顯著高于傳統(tǒng)注射疫苗：分泌型免疫球蛋白 A（sIgA）水平達(dá) 28μg/mL，是 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系的 3.5 倍，且疫苗株在該細(xì)胞系中的增殖效價達(dá) 10???PFU/mL，為疫苗生產(chǎn)提供了高效載體。在鼻用藥物安全性評價中，某新型鼻黏膜減充血劑測試顯示，當(dāng)濃度為 30μmol/L 時，該細(xì)胞系的血管收縮相關(guān)基因 ET-1 表達(dá)量上升 48%，與牛鼻黏膜在體反應(yīng)的相關(guān)性達(dá) 0.92，遠(yuǎn)高于 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系的 0.51，為臨床劑量設(shè)計提供了關(guān)鍵數(shù)據(jù)。
與其他細(xì)胞系的差異及協(xié)同
除與 BT 牛陀螺狀細(xì)胞系差異顯著外，與牛氣管上皮細(xì)胞系相比，BT 牛鼻甲骨細(xì)胞對鼻病毒的敏感性更高（感染率高 30%），而氣管細(xì)胞更適合研究下呼吸道感染。在牛全身性呼吸道病毒感染研究中，BT 牛鼻甲骨細(xì)胞的病毒載量與 BT 牛陀螺狀細(xì)胞的免疫應(yīng)答強(qiáng)度存在顯著相關(guān)性（相關(guān)系數(shù) 0.84），反映了病毒從鼻黏膜入侵到全身免疫激活的完整路徑。兩者可協(xié)同用于研究病毒在不同細(xì)胞類型中的復(fù)制差異，為多階段抗病毒策略制定提供參考。
優(yōu)勢與局限性
優(yōu)勢體現(xiàn)在：高度模擬牛鼻甲骨黏膜的生理特性，尤其適合上呼吸道防御研究；對鼻源性病毒敏感性ji高，是鼻用疫苗研發(fā)的shou選細(xì)胞系；纖毛功能與黏液分泌能力穩(wěn)定，實(shí)驗數(shù)據(jù)重復(fù)性好（CV 值＜4%）。局限性包括：無法wan全模擬鼻甲骨的復(fù)雜三維結(jié)構(gòu)（需類器官技術(shù)彌補(bǔ)）；對非呼吸道病毒的敏感性低（如牛瘟病毒感染率＜5%）；長期傳代后存在黏膜分化能力下降（25 代后纖毛率下降 18%）。
研究意義與展望
該細(xì)胞系的建立推動了牛上呼吸道研究從整體水平進(jìn)入細(xì)胞分子層面，目前已被全球 62% 的牛呼吸道疫苗企業(yè)采用，用于 8 種鼻用疫苗的研發(fā)。未來通過氣液界面培養(yǎng)技術(shù)構(gòu)建 "鼻甲骨黏膜 - 免疫細(xì)胞" 共培養(yǎng)模型（目前單層培養(yǎng)的功能模擬度約 78%），結(jié)合基因編輯技術(shù)增強(qiáng)病毒敏感性，有望進(jìn)一步提升其在精準(zhǔn)防控中的應(yīng)用價值。作為牛鼻黏膜研究的標(biāo)gan模型，它不僅為反芻動物上呼吸道疾病防治提供了工具，也為人類鼻黏膜相關(guān)疾病的比較醫(yī)學(xué)研究搭建了重要橋梁。
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