牛白細(xì)胞介素12（IL-12）elisa試劑盒目的 研究白細(xì)胞介素-12(IL-12),IL-18和IL-10在結(jié)核病免疫發(fā)病機(jī)制中的作用,為設(shè)計(jì)新的疫苗和開展輔助性免疫療法提供依據(jù).方法 用ABC-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ABC-ELISA)及雙抗體夾心ELISA試劑盒檢測(cè)39例結(jié)核性胸腔積液患者胸水中和血清中的IL-12,IL-18, IL-10水平.對(duì)結(jié)果進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)及相關(guān)性分析,并對(duì)治療好轉(zhuǎn)過(guò)程中的10例繼發(fā)型肺結(jié)核和5例結(jié)核性胸膜炎患者的這3種細(xì)胞因子在胸水中的變化進(jìn)行 觀測(cè).結(jié)果 除IL-18外,其他兩種細(xì)胞因子在胸水中與血清中含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;只有IL-12與IL-10之間有相關(guān)關(guān)系.治療好轉(zhuǎn)過(guò)程中,絕大多數(shù)患者有 IL-12,IL-18水平增高和IL-10水平降低.結(jié)論 IL-18用作疫苗佐劑可能優(yōu)于IL-12,這3種細(xì)胞因子均可用于開展免疫療法,但不可一概而論.

白細(xì)胞介素-18(IL-18)是一種重要的細(xì)胞因子,它能作用于I型輔助性T細(xì)胞(Th1),并在IL-12的協(xié)同作用下能強(qiáng)烈誘導(dǎo)其產(chǎn)生IFN-γ。近來(lái)研究表明:IL-18具有廣泛的生物學(xué)活性,在介導(dǎo)細(xì)胞免疫、抵抗微生物感染和抗腫瘤方面起著重要的作用。因此,IL-18在臨床上可作為免疫增強(qiáng)劑、抗微生物或抗腫瘤制劑得以應(yīng)用。到目前為止,國(guó)內(nèi)外已有人、小鼠、猴、豬、牛和羊等種屬的IL-18商品化制劑及其相應(yīng)的單克隆抗體(McAb)或多克隆抗體(PcAb)以及夾心ELISA試劑盒的商品化供應(yīng)。然而,有關(guān)馬IL-18(EIL-18)的研究較少且相對(duì)滯后,迄今為止,還未見有可供商品化的EIL-18和抗EIL-18 McAb或PcAb及其夾心ELISA試劑盒等相關(guān)產(chǎn)品。 本研究采用RT-PCR從經(jīng)ConA刺激的馬外周血單核細(xì)胞(PBMCs)中擴(kuò)增獲得編碼EIL-18前體蛋白(precursor EIL-18,pEIL-18)的DNA,然后克隆至載體pMD18-T中,鑒定正確的重組質(zhì)粒命名為pMD-EIL-18。自pMD-EIL-18中分別擴(kuò)增pEIL-18及其成熟蛋白(mature EIL-18,mEIL-18)基因,并將其亞克隆至原核表達(dá)載體pET-28a(+)和pET-26b(+)中,重組質(zhì)粒鑒定正確后命名為pET-pEIL-18、pET-EIL-18和pET-mEIL-18。然后分別轉(zhuǎn)化至大腸桿菌感受態(tài)BL21(DE3)中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)牛白細(xì)胞介素12（IL-12）elisa試劑盒