VL3514 pLV- mKate2-luci（EF1a）載體
- 公司名稱 重慶英茂盛業(yè)生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) VL3514
- 產(chǎn)地 江北區(qū)港橋支路4號(hào)7-2
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2021/8/27 10:34:04
- 訪問(wèn)次數(shù) 105
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 2-3ug |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
載體特性 ：
類型：慢病毒基因過(guò)表達(dá)載體
基因啟動(dòng)子：EF1a IE promoter
報(bào)告基因：mKate2，F(xiàn)irefly luciferase
真核細(xì)胞篩選抗性：Puromycin
原核抗性：Ampicillin
pLV- mKate2-luci(EF1a)載體是基于 HIV1 的慢病毒基因過(guò)載體。載體高效表達(dá)紅色熒光蛋白 mKate2和螢火蟲(chóng)熒光素酶基因，可以用于活體動(dòng)物熒光成像及化學(xué)發(fā)光成像。EF1a 啟動(dòng)子來(lái)自人類 靶向延長(zhǎng)因子 1α （EF1A）基因，可在多數(shù)種類細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)，尤其是干細(xì)胞等 CMV 啟動(dòng)子會(huì)發(fā)生沉默的細(xì)胞。PGK 啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá) Puromycin 抗性基因。利用本載體包裝的慢病毒將表達(dá) Puromycin 抗性基因，可以方便地使用 Puromycin 篩選出穩(wěn)定細(xì)胞系。
pLV-mKate2-luci(EF1a)載體包含了生產(chǎn)慢病毒所必須的病毒原件以及提高病毒滴度及基因表達(dá)效率的原件。載體結(jié)構(gòu)緊湊，病毒包裝效率高。
用法說(shuō)明
pLV-mKate2-luci(EF1a)載體與包裝載體共轉(zhuǎn)染 HEK293T 細(xì)胞后（包裝體系貨號(hào) KLV3501 和 KLV3502），產(chǎn)生高滴度復(fù)制缺陷的慢病毒顆粒，可以直接用于感染細(xì)胞或者純化濃縮后感染細(xì)胞。
測(cè)序引物：
正向引物 EF-F：ATTCTCCTTGGAATTTGCCCT
反向引物 PGK-R：GGTGGATGTGGAATGTGTGCGA
原核培養(yǎng)特性
pLV-mKate2-luci(EF1a)載體為高拷貝質(zhì)粒，帶有氨芐抗性基因，可以在含有 100 μg/ml 氨芐抗生素的 LB培養(yǎng)基中增殖。宿主菌可以采用 DH5 α，JM109，TOP10 等常見(jiàn)大腸桿菌菌種。
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