1、聚合酶反應(yīng)分析儀溫度校準(zhǔn)裝置校準(zhǔn)的范圍

本規(guī)范適用于測(cè)量范圍為(0～120)℃以?xún)?nèi)的聚合酶鏈反應(yīng)分析儀溫度校準(zhǔn)裝置的校準(zhǔn)。

2、引用文件

本規(guī)范引用下列文件：

YYT  1173-2010  聚合酶鏈反應(yīng)分析儀

凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本規(guī)范；凡是不注日期的引用文件，

其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。

3、術(shù)語(yǔ)

3.1聚合酶鏈反應(yīng)分析儀(polymerase chain reaction analyzer)

基于聚合酶鏈反應(yīng)(PCR) 技術(shù)原理，模擬DNA或RNA的復(fù)制過(guò)程，在模板、引物、聚 合酶等存在的條件下，特異擴(kuò)增已知序列，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)分析的儀器設(shè)備。也稱(chēng)基因擴(kuò)

增儀。

4、聚合酶反應(yīng)分析儀溫度校準(zhǔn)裝置校準(zhǔn)的概述

聚合酶鏈反應(yīng)分析儀溫度校準(zhǔn)裝置由單通道或多通道測(cè)溫模塊、數(shù)據(jù)采集模塊、數(shù)據(jù)線(xiàn)和顯示器(計(jì)算機(jī))等組成，其測(cè)溫模塊的結(jié)構(gòu)能夠模擬聚合酶鏈反應(yīng)分析儀(以下簡(jiǎn)稱(chēng)PCR儀)樣品反應(yīng)管的外形結(jié)構(gòu)，主要用于校準(zhǔn)PCR儀的溫度特性，其組成框圖如

圖1所示。

a) 測(cè)溫模塊   b) 數(shù)據(jù)采集模塊    c) 顯示器

圖1PCR儀溫度校準(zhǔn)裝置組成框圖

5、計(jì)量特性

5.1 溫度示值

PCR 儀溫度校準(zhǔn)裝置溫度示值的最大允許誤差為±0.20℃。

注：上述指標(biāo)不作為合格判定依據(jù)。

6、校準(zhǔn)條件

6.1環(huán)境條件

6.1.1環(huán)境溫度：(15～25)℃;

環(huán)境濕度：≤85 %RH。

6.1.2電測(cè)設(shè)備對(duì)環(huán)境溫濕度等另有要求時(shí)，應(yīng)滿(mǎn)足其相應(yīng)規(guī)定。

6.1.3校準(zhǔn)時(shí)，供PCR儀溫度校準(zhǔn)裝置、恒溫設(shè)備和電測(cè)設(shè)備使用的電源應(yīng)分別符合相應(yīng)要求。

6.2測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備

校準(zhǔn)時(shí)，可選用表1所示的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備。

表1校準(zhǔn)用測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備

7、校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法

7.1校準(zhǔn)項(xiàng)目

PCR儀溫度校準(zhǔn)裝置的校準(zhǔn)項(xiàng)目為溫度示值。

7.2校準(zhǔn)方法

7.2.1校準(zhǔn)前的檢查

7.2.1.1外觀檢查

目測(cè)檢查PCR儀溫度校準(zhǔn)裝置應(yīng)外觀良好，各通道溫度傳感器無(wú)彎折、斷裂、污染，傳感器封裝、引線(xiàn)插件接觸良好。

7.2.1.2  顯示功能檢查

可在溫度示值校準(zhǔn)時(shí)進(jìn)行檢查。

PCR 儀溫度校準(zhǔn)裝置各通道溫度顯示應(yīng)符合其分辨力要求，顯示數(shù)字及圖像應(yīng)清晰，小數(shù)點(diǎn)和狀態(tài)顯示應(yīng)正確。當(dāng)溫度超出測(cè)溫范圍或傳感器發(fā)生故障時(shí)，應(yīng)能實(shí)時(shí)顯示其相應(yīng)的通道號(hào)。

7.2.2校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備

a)開(kāi)啟電測(cè)設(shè)備進(jìn)行預(yù)熱，預(yù)熱時(shí)間至少20min或滿(mǎn)足其使用說(shuō)明書(shū)的相應(yīng)要求；

b)預(yù)先凍制好水三相點(diǎn)瓶；

c)將標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)放入凍制好的水三相點(diǎn)瓶中，測(cè)量其水三相點(diǎn)值。將新測(cè)

得的水三相點(diǎn)值輸入配套電測(cè)設(shè)備使用；

d)按恒溫槽使用說(shuō)明書(shū)的要求，保證其工作區(qū)域的液面處于規(guī)定液位；

e)備好圖2所示的PCR儀溫度校準(zhǔn)裝置校準(zhǔn)用的全浸式專(zhuān)用等溫塊或局浸式專(zhuān)用等溫塊，并保持其內(nèi)部清潔。

a) 局浸式等溫塊b) 全浸式等溫塊

圖2 專(zhuān)用等溫塊示意圖

f) 將PCR儀溫度校準(zhǔn)裝置的測(cè)溫模塊安裝于專(zhuān)用等溫塊中，如圖3所示。測(cè)溫模塊的溫度傳感器應(yīng)無(wú)縫隙置入等溫塊測(cè)試孔內(nèi)，保證溫度傳感器與等溫塊貼合緊密。無(wú)自重結(jié)構(gòu)的測(cè)溫模塊需在其上方加壓封條，使其與等溫塊接觸緊密。等溫塊內(nèi)應(yīng)填充脫脂棉、泡沫塑料、真空隔熱板等絕熱材料，使測(cè)溫模塊與外部環(huán)境絕熱。

 a) 局浸式等溫塊  b)全浸式等溫塊

圖3 測(cè)溫模塊在專(zhuān)用等溫塊中的安裝示意圖

g) 將安裝了測(cè)溫模塊的等溫塊放置于恒溫槽內(nèi)，等溫塊的浸沒(méi)深度應(yīng)不低于180mm。

h) 將標(biāo)準(zhǔn)鉑電阻溫度計(jì)插入專(zhuān)用等溫塊驗(yàn)證孔內(nèi)，插入深度應(yīng)不低于180mm, 其感

溫部分應(yīng)與等溫塊底部保持水平。

i)將PCR儀溫度校準(zhǔn)裝置的測(cè)溫模塊與其主機(jī)相連，并開(kāi)機(jī)預(yù)熱，進(jìn)入測(cè)量狀態(tài)，預(yù)熱時(shí)間至少10min。