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人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基

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上海聯(lián)贏生物科技有限公司是一家實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品專業(yè)服務(wù)商,致力于為生命科學(xué)、生物技術(shù)、藥物研究、醫(yī)學(xué)診斷、醫(yī)療器械等領(lǐng)域提供專業(yè)技術(shù)服務(wù)。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等,期待與志同道合的行業(yè)精英共同合作,技術(shù)創(chuàng)新,為中國生命科學(xué)領(lǐng)域研究者提供更好的綜合解決方案。

分析儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、耗材

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1 kit
貨號 CS-20003-100 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合
產(chǎn)品介紹

人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基是為在體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)人單核細(xì)胞向成熟CD1c+cDC2樹突狀細(xì)胞(DC)亞群分化發(fā)育而專門設(shè)計(jì)的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可在7天內(nèi)誘導(dǎo)人cDC2(CD11c+ HLA-DR+ CD1c+CD14-)亞群產(chǎn)生,是研究人cDC2分化發(fā)育和功能、以及產(chǎn)生人DC疫苗的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基


產(chǎn)品特點(diǎn)

針對人單核細(xì)胞向成熟CD1c+cDC2樹突狀細(xì)胞(DC)亞群分化發(fā)育而設(shè)計(jì),


產(chǎn)品成分

產(chǎn)品名稱

Catlog#

規(guī)格

儲存條件

人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒

CS-20003-100

1 kit

人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

CS-20003-B

100ml

4℃

人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞分化補(bǔ)充因子

CS-20003-DES

0.5ml

-20℃

人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟補(bǔ)充因子

CS-20003-MTS

0.5ml

-20℃

預(yù)篩選樹突狀細(xì)胞專用胎牛血清

CS-DCF-1010ml-20℃


其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑

人CD14+單核細(xì)胞磁珠分選試劑


*培養(yǎng)基配制

(在無菌生物安全柜中,開展以下操作)

1.在4度冰箱解凍補(bǔ)充因子和胎牛血清,混勻后使用。

注:解凍后的補(bǔ)充因子和血清可放置于4 oC冰箱,在1個(gè)月內(nèi)使用;或者分裝至合適體積后,保存于-20℃冰箱,不可反復(fù)凍融!

2.分化培養(yǎng)基配制:將1體積的分化補(bǔ)充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻,得到人cDC2樹突狀細(xì)胞分化培養(yǎng)基。如取100ul補(bǔ)充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基,以此類推。

成熟培養(yǎng)基配制:將1體積的成熟補(bǔ)充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻,得到人cDC2樹突狀細(xì)胞成熟培養(yǎng)基。

注:配好的*培養(yǎng)基請于4℃保存,且于1個(gè)月內(nèi)使用完畢。


使用說明

(請?jiān)敿?xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實(shí)驗(yàn))

1.使用磁珠分選人外周血單個(gè)核細(xì)胞中單核細(xì)胞(參考所使用試劑盒的說明書),計(jì)數(shù)。

注:健康供體每1ml外周血中約含有1-3*10^5單核細(xì)胞。

2.D0:使用分化培養(yǎng)基重懸單核細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度至1*10^6/ml,按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板:

培養(yǎng)板

*培養(yǎng)基體積

單核細(xì)胞數(shù)/孔

24孔板

1.0ml

1.0*10^6

6孔板

4.0ml

4.0*10^6

3.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱,37℃,5%CO2,靜置培養(yǎng)。

4.D3:半量換液。小心貼培養(yǎng)板側(cè)壁用槍尖吸走1/2體積舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充加入新鮮分化培養(yǎng)基至初始培養(yǎng)體積(步驟2表格)。

注:*培養(yǎng)基請恢復(fù)至室溫后使用,減少對細(xì)胞的刺激。

5.D5:誘導(dǎo)成熟。小心貼培養(yǎng)板側(cè)壁用槍尖吸走1/2體積舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充加入新鮮成熟培養(yǎng)基至初始培養(yǎng)體積(步驟2表格)。

6.D7:輕輕吹打細(xì)胞,收集懸浮細(xì)胞,即為分化成熟的人CD1c+cDC2,可進(jìn)行后續(xù)操作和分析。

注:如需研究特定刺激對DC的影響,可提前加入相應(yīng)刺激,待D7收集細(xì)胞進(jìn)行分析。


數(shù)據(jù)展示

圖:人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)鑒定。磁珠分選的人單核細(xì)胞按照上述說明培養(yǎng),至第6天時(shí),加入100ng/ml LPS刺激,第7天收集懸浮細(xì)胞進(jìn)行流式染色分析。




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