10906 通用型TOPO克隆試劑盒(兼容平末端/TA末端)
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 10906
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/2/7 13:36:27
- 訪問次數(shù) 426
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企業(yè)簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進化技術為驅動，聚焦生命科學產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術企業(yè)，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發(fā)路徑，成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應用于生命科學研究領域、診斷與檢測領域和生物醫(yī)藥領域。
主營業(yè)務
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進化領域的技術優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗，構建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養(yǎng)系列、細胞轉染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應用于生命科學研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領域。
發(fā)展歷程
榮譽資質(zhì)
翌圣生物通過申請商標和軟件著作權的方式保障核心技術和市場競爭力，不斷加強公司品牌建設。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權18項（其中發(fā)明14項、實用新型1項、外觀設計3項）和45項與生物試劑相關的軟件著作權，擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權局商標局核準的注冊商標權37項以及4項境外注冊商標，是國家高新技術企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺
經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術經(jīng)驗的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開展“產(chǎn)學研”合作，與擁有生物催化與酶領域國家重點實驗室的湖北大學、擁有教育部工業(yè)生物領域重點研究基地的江南大學展開合作，優(yōu)化生物試劑關鍵原料的生產(chǎn)和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術、生物信息技術、細胞生物學技術、免疫學技術、生化分析技術等生命科學領域的共性生物技術為基礎，建立了六大核心技術平臺——雙向分子酶理性設計與定向進化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關鍵原料研發(fā)平臺、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應用研發(fā)平臺，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項核心技術，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發(fā)路徑，覆蓋技術研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設運營的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲運輸?shù)葘ιa(chǎn)線進行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時的響應能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學研究實驗室提供應用于科學研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學院、清華大學、北京大學、復旦大學、上海交通大學、浙江大學等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學工具領域全球Top⑩
◎ 具備驅動產(chǎn)業(yè)變革的技術創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學習型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術創(chuàng)新和產(chǎn)品升級，不斷拓展核心技術的應用領域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務，助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時，翌圣生物將進一步推進國際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻力量。
分子生物學試劑，細胞生物學試劑，免疫學試劑，蛋白組學試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit是利用新一代拓撲異構酶(Topoisomerase)高效快速連接DNA片段的原理進一步研發(fā)而成，搭配高效的平末端化因子，兼容平末端產(chǎn)物及粘性末端產(chǎn)物的快速克隆。與傳統(tǒng)的連接酶相比，具有以下優(yōu)勢：1) 快速，僅需5分鐘即可完成連接反應。2) 高效，無自連現(xiàn)象，陽性克隆率接近100%，無需設置藍白斑篩選；3) 可連接長達5 kb目的產(chǎn)物。
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 10906ES08 | 10906ES20 | 10906ES50 |
10906-A | 2× Hieff Clone® Universal TOPO Cloning Premix | 25 μL | 100 μL | 250 μL |
10906-B | 1 kb control insert (40 ng/μL) | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
10906-C | M13 Forward Primer(10 μM) | 50 μL | 200 μL | 500 μL |
10906-D | M13 Reverse Primer(10 μM) | 50 μL | 200 μL | 500 μL |
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說明
反應體系
組分 | 用量 |
2× Hieff Clone® Universal TOPO Cloning Premix | 5 μL |
插入片段* | 0.5-5 μL |
ddH2O | To 10 μL |
*PCR 產(chǎn)物不能磷酸化。如擴增模板為質(zhì)粒，模板質(zhì)粒會在后續(xù)實驗中引起假陽性，因此推薦PCR產(chǎn)物進行膠回收后連接。0.1-1 kb片段投入量推薦20-50 ng，1-2 kb片段投入量推薦50-100 ng，2-4 kb片段投入量推薦100-200 ng，4-5 kb片段投入量推薦200-300 ng。
反應條件
混勻上述體系，于室溫(20-37℃)反應5 min。連接反應不可于冰上進行。室溫(20-37℃)下孵育時，建議孵育時間不超過5 min，如果PCR產(chǎn)物濃度較低或者片段較長，則可以適當延長孵育時間，不宜超過15 min（推薦使用25℃，PCR儀控溫）。
轉化
1）在冰上解凍克隆感受態(tài)細胞（如：DH5α Chemically Competent Cell，Cat#11802ES）。
2）取10 μL冷卻重組產(chǎn)物，加入到100 μL感受態(tài)細胞中，輕彈管壁數(shù)下混勻，在冰上放置25 min。
3）42℃熱激60 sec，冰上孵育2 min。
4）加入500 μL SOC或LB培養(yǎng)基，37℃，200 rpm，搖菌60 min。
5）5000 rpm離心4 min，棄上清至100 μL，用剩余培養(yǎng)基重懸菌體。用無菌涂布棒將菌液均勻涂抹在含有正確抗性的平板上。待菌液被培養(yǎng)基吸收后，倒置平板，于37℃過夜培養(yǎng)。
克隆鑒定
可選擇測序法或酶切法進行鑒定。用無菌的槍頭或牙簽將單個菌落挑至菌落PCR Mix中混勻（如：2×Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)，Cat#10157ES），加入引物直接進行PCR反應。測序引物：
M13F ：GTAAAACGACGGCCAGT
M13R ：CAGGAAACAGCTATGAC
載體信息
注意事項
需自備的材料：
1）自備試劑（僅羅列部分）：
超級感受態(tài)：轉化效率＞108 cfu/μg，如翌圣DH5α超級感受態(tài)細胞（Cat#11802ES）。
高保真酶：2× Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)（Cat#10154ES）或其他等效產(chǎn)品。
菌落PCR mix：2× Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)（Cat#10157ES）或其他等效產(chǎn)品。
核酸染料：YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)（Cat#10202ES）或其他等效產(chǎn)品。
2）自備儀器耗材（僅羅列部分）：PCR儀，水平電泳槽，切膠儀，EP管等。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅作科研用途！
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