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PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。那么它都有哪些注意事項呢？盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進行擴增反應(yīng)是謹慎認真，在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意：1.戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液，立即更換手套；2.使用一次性吸頭，嚴禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用，吸頭不要長時間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染；3.避免反應(yīng)液飛濺，打開反應(yīng)管時為避免此
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多功能酶標儀又稱多功能微孔板檢測儀，可對以微孔板為體系的實驗提供多種不同模式的檢測。通常，多功能酶標儀至少可提供“吸收光”、“熒光”、“發(fā)光”三種不同的檢測模式。一些中多功能酶標儀還可完成“時間分辨熒光”、“熒光偏振”、“熒光共振能量轉(zhuǎn)移”等熒光檢測實驗。如何使用多功能酶標儀？首先，多功能酶標儀需要放在一個干凈、平整的工作臺上，做到防塵、防潮、防曬、防震、防撞。在使用儀器時使用符合儀器需要的電壓，電壓不穩(wěn)定的則要使用穩(wěn)壓器，使輸入酶標儀的電壓保持穩(wěn)定。對于多功能酶標儀使用方法通常分為4個步驟：1
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簡單高效利用龍沙Nucleofector電轉(zhuǎn)技術(shù)重編程產(chǎn)生 iPSC
誘導多能干細胞(iPSC)是通過人工將干細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入預成熟或成熟的體細胞，從已經(jīng)分化的細胞類型中衍生的多能干細胞。由于其類似ESC的功能，iPSC已經(jīng)作為許多發(fā)育或疾病相關(guān)應(yīng)用的強大工具，幫助科學家進一步確定發(fā)展機制或疾病發(fā)病機制，或作為進行體外藥物篩選和毒性研究的新型人類疾病模型，并具有成為再生醫(yī)學新工具的巨大潛力?？茖W家通過病毒轉(zhuǎn)導或非病毒轉(zhuǎn)染將干細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入原代體細胞中，可以簡單地在實驗室中產(chǎn)生誘導的PSC。不同組合中使用的典型重編程因子是Oct4，Sox2，Klf4， -
細胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子（如DNA，RNA等）導入（真核）細胞的實驗技術(shù)之一。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。細胞轉(zhuǎn)染可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時轉(zhuǎn)染指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,通常只持續(xù)幾天，在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)分析結(jié)果，多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染指外緣DNA既可以整合到宿主染色體中。通常需要通過一些選擇性標記來篩選以得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系。根據(jù)轉(zhuǎn)染方法可以分為物理介導、化學介導和生物介導。我們常用的細 -
手持式近紅外光譜儀是利用物質(zhì)對不同波長的紅外輻射的吸收特性，進行一系列精密分析的儀器。手持式近紅外光譜儀各項性能穩(wěn)定，數(shù)據(jù)具有良好再現(xiàn)性；功能齊全的化學計量學軟件；很好的支持建立模型和分析；并適用范圍足夠?qū)挼哪Ｐ?。手持式近紅外光譜儀在使用過程中需要注意以下幾個事項：一、注意要符合規(guī)定的環(huán)境條件來使用，值得相信的紅外光譜儀廠家提醒要注意實驗室的溫度以及相對濕度都應(yīng)該在標準范圍以內(nèi)，所用電源應(yīng)配備有穩(wěn)壓裝置和接地線。為了更好的把關(guān)這些條件，紅外實驗室的面積不要太大，能放得下必須的儀器設(shè)備即可，但室內(nèi)
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細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可用于免疫細胞、干細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮細胞等較難轉(zhuǎn)染的原代細胞和各類細胞系中，其不依賴于病毒感染、不依賴于細胞有絲分裂，可加快基因表達，已成功轉(zhuǎn)染1200余種細胞系、130余種原代細胞，多數(shù)細胞系轉(zhuǎn)染效率可高達50-70%，部分原代細胞轉(zhuǎn)染效率可超過90%。目前，LONZA4D-Nucleofector已應(yīng)用于CAR-T細胞的研究中。轉(zhuǎn)染效率高，在經(jīng)典的電穿孔技術(shù)上，配合高效率細胞轉(zhuǎn)染液，可實現(xiàn)無語倫比的細胞轉(zhuǎn)染效率，尤其是針對一些原代細胞、干細胞和難轉(zhuǎn)染的細胞系?？蛇_99%，低在
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瑋馳小課堂丨終用在臨床的細胞復蘇儀怎么選？Barkey來支招
隨著細胞治療藥物向GMP商業(yè)化生產(chǎn)的過度，再到臨床患者靜脈注射前關(guān)鍵的一步為解凍復蘇工藝，復蘇過程的標準化直接影響到細胞復蘇后活率工藝一致性。細胞治療藥物是有活力的細胞，細胞在回輸前，需要從-196℃的液氮環(huán)境中快速回溫37℃，然后再回輸給人體。為滿足細胞治療藥物復蘇工藝的一致性，細胞復蘇設(shè)備的選擇尤為重要。細胞治療市場迫切需要一款既符合醫(yī)療器械的管理要求，同時有簡便的標準操作流程，以及信息化數(shù)據(jù)管理的復蘇設(shè)備，以細胞治療藥物從研發(fā)到生產(chǎn)臨床順利回輸給病人。BarkeyPlasmatherm無水 -
應(yīng)用案例 | 為什么支原體快檢要選 Lonza MycoAlert
細胞培養(yǎng)在科研和生物制藥中被廣泛應(yīng)用，支原體污染問題頻繁出現(xiàn)，污染會影響細胞的生長、形態(tài)、生化特點和遺傳特征。因此，為了提高生物制品的有效性和安全性，各國監(jiān)管機構(gòu)和法規(guī)都建議使用適當?shù)臋z測方法對細胞進行檢測，以確保使用的細胞無支原體污染。迄今為止，已經(jīng)有多種支原體檢測方法，包括培養(yǎng)法、指示細胞法、基于核酸擴增（NAT）的方法和基于酶促反應(yīng)的方法（生化法），每種方法都有各自的特點和應(yīng)用范圍。培養(yǎng)法作為經(jīng)典方法，通過有無支原體生長進行判斷，直接，但是檢測時間是一個的挑戰(zhàn)；指示細胞法檢測時間稍微有所縮
