第3章 AFB1酶免試劑盒的操作

    之前我們介紹了試劑盒操作前的一些準(zhǔn)備工作，現(xiàn)在，開始進(jìn)去試劑盒的操作。不同的試劑盒組成不同，操作也會有些區(qū)別，現(xiàn)在，我們先來介紹一下AFB1酶免試劑盒的具體操作流程。

流程1---實驗方案擬定：根據(jù)實驗需要，擬定相應(yīng)實驗方案，填報AFB1 酶免實驗數(shù)據(jù)分析表。反應(yīng)孔編號：根據(jù)實驗方案，取相應(yīng)的包被反應(yīng)條放在框架上。設(shè)定1~6 號孔為AFB1 標(biāo)準(zhǔn)對照孔，其余孔為樣品孔。

流程2---洗滌操作1：每孔加入250μL（約5 滴）洗滌液，放置1min。用力甩干3 下，將反應(yīng)孔中的試劑甩到廢水池中，并在吸水紙上拍干3 下。

流程3---實驗*次加樣：

（1）1~6 號孔分別加入50μL【AFB1 標(biāo)準(zhǔn)溶液】（0，0.1，0.25，0.5，1，2ppb），其余孔加入相應(yīng)的待測樣液。

（2）各反應(yīng)孔均加入50μL【酶標(biāo)抗原】工作溶液。輕輕振搖或敲擊酶標(biāo)板框架，使反應(yīng)孔中的試劑充分混勻。

流程4---恒溫*次孵育：將反應(yīng)孔蓋上蓋子，放入37℃培養(yǎng)箱，孵育30min。注意反應(yīng)溫度37℃！溫度過高將引起實驗誤差。

流程5---洗滌操作2：取出反應(yīng)板，用力甩干3下，將反應(yīng)孔中的試劑甩到廢水池中，并在吸水紙上拍干3 下。往每孔加入250μL（約5滴）洗滌液，放置1min。用力甩干3 下，將反應(yīng)孔中的洗滌液甩到廢水池中，并在吸水紙上拍干3 下。按上述操作再重復(fù)洗滌4 次。

流程6---實驗第二次加樣：反應(yīng)板拍干后，每孔分別加入50μL 【底物液】和50μL 【顯色液】。輕輕振搖或敲擊酶標(biāo)板框架，使反應(yīng)孔中的試劑充分混勻。流程7---恒溫第二次孵育：將反應(yīng)孔蓋上蓋子，放入37℃培養(yǎng)箱，孵育15min。

流程8---實驗第三次加樣：取出反應(yīng)板，每孔準(zhǔn)確加入50μL【終止液】。輕輕振搖敲擊酶標(biāo)板框架，使反應(yīng)板中的試劑充分混勻。

流程9---結(jié)果處理：放入450nm 酶標(biāo)儀中讀取各孔的吸光度（OD 值）數(shù)值。將實驗數(shù)據(jù)輸入數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行處理。整理實驗臺，關(guān)閉儀器。

以上是由百奧森技術(shù)人員整理的簡單操作流程，具體可參照說明書及網(wǎng)上相關(guān)視頻！如有問題，可以我們！