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上海源葉生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第16年
標(biāo)準(zhǔn)品的制備、鑒定、計(jì)量2010/11/06
1.標(biāo)準(zhǔn)品的制備:標(biāo)準(zhǔn)品的制備是非常復(fù)雜的問題,也是標(biāo)記免疫分析中比較難于制備的一個(gè)成分。以下討論的是實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)品(或商品化試劑中標(biāo)準(zhǔn)品)的制備。1)基質(zhì)的制備:如前所述,作為標(biāo)準(zhǔn)品的介質(zhì)(基質(zhì))成分應(yīng)與被測(cè)樣品相同。對(duì)大多數(shù)用于測(cè)定血清中某物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品,應(yīng)用不含被測(cè)物質(zhì)的零血清制備,以求反應(yīng)的介質(zhì)環(huán)境相當(dāng)。但有時(shí)零值血清的制備十分困難,所以有些標(biāo)準(zhǔn)品用適當(dāng)?shù)木彌_液制備,并在緩沖液中加入一定量的載體蛋白(一般用1%~2%的牛血清白蛋白),以便使其與樣品的介質(zhì)環(huán)境相近。零值血清的制備方法有:(1)
常用佐劑的種類和制備2010/11/06
佐劑主要可分為兩種:一種本身具有免疫原性,如百日咳桿菌、抗酸桿菌(結(jié)核分枝桿菌)以及革蘭陰性桿菌等;另一種本身無免疫原性,如氫氧化鋁、磷酸鈣、礦物油乳劑、表面活性劑等。目前應(yīng)用zui多的是弗氏佐劑(Freundadjuvant)。1.弗氏佐劑弗氏佐劑是目前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中zui常用的佐劑,分為不*弗氏佐劑和*弗氏佐劑。不*弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成,組分比為1~5:1,可根據(jù)需要而定,通常為2:1。不*佐劑中加卡介苗(zui終濃度為2~20mg/ml)或死的結(jié)核分枝桿菌,即為*弗氏佐劑。上述佐
ELISA等免疫學(xué)方法檢測(cè)飼料中的動(dòng)物源性成分2010/11/02
免疫學(xué)方法用于物種的鑒定已有很長(zhǎng)的歷史,早在20世紀(jì)初建立在特異性抗體—抗原反應(yīng)之上的免疫學(xué)方法就已經(jīng)被應(yīng)用于肉的種類鑒別,現(xiàn)在已有多種試劑盒被研發(fā)出來用于飼料中動(dòng)物源性成分的檢測(cè)。其主要原理是應(yīng)用抗原與抗體的特異性結(jié)合,即用一個(gè)物種的特異性抗原制作特異性抗體,然后用此抗體檢測(cè)樣品中有無特異性的抗原進(jìn)而用于檢測(cè)樣品中有無此物種的成分存在。然而,肉骨粉一般都要經(jīng)過高溫高壓處理,在這個(gè)過程中許多蛋白質(zhì)都發(fā)生了變性,失去了抗原性和水溶性,這就給檢測(cè)帶來了困難。為了使用免疫學(xué)方法鑒定動(dòng)物成分的種類,必須
DNA為基礎(chǔ)的方法檢測(cè)飼料中的動(dòng)物源性成分2010/11/02
以檢測(cè)DNA為基礎(chǔ)的方法主要有核酸探針雜交、DNA指紋分析、PCR-RFLP分析、PCR特異擴(kuò)增(常規(guī)PCR方法和Real-timePCR方法)。其主要原理都是對(duì)各物種內(nèi)特異的核酸序列進(jìn)行提取、鑒定,從而判定飼料內(nèi)有無該物種的成分,只是結(jié)果判別的信號(hào)條件不同。核酸探針雜交方法的原理是堿基配對(duì),即一條DNA鏈能與它的特異互補(bǔ)鏈配對(duì)形成雙鏈DNA。因此,用一個(gè)熒光物質(zhì)或放射性物質(zhì)標(biāo)記的單鏈核苷酸探針能夠很快地從許多其他DNA分子的混合物中檢測(cè)出它的互補(bǔ)單鏈。由于雜交探針需要用熒光物質(zhì)或放射性物質(zhì)進(jìn)行
近紅外光譜方法檢測(cè)飼料中的動(dòng)物源性成分2010/10/30
近紅外光譜測(cè)定(NIRS)是飼料界zui廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一,可以將它用于飼料中動(dòng)物源性成分的檢測(cè)。NIRS的原理是飼料中的分子物質(zhì)可以吸收不同波長(zhǎng)的光線。其優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)快速,不使用有害的試劑,所需樣品量少,為非破壞性檢測(cè),經(jīng)濟(jì)重復(fù)性好以及具有可以開發(fā)為商業(yè)化的儀器的潛力。主要缺點(diǎn)是這項(xiàng)技術(shù)是間接檢測(cè),因此需要大量樣品的參考值來形成一個(gè)校正和參考模型。目前,世界上許多國(guó)家特別是歐盟國(guó)家,為了防止瘋牛病已制定了各種法律來確保飼料的生物安全,主要是控制動(dòng)物源性成分在飼料中的應(yīng)用,禁止在反芻動(dòng)物的飼料中添
酶聯(lián)免疫吸附法(EIASA)測(cè)定克倫特羅殘留2010/10/30
(1)試劑和材料以下所有試劑,除特別注明外,均為分析純?cè)噭?;水為符合GB/T6682規(guī)定的二級(jí)水。①鹽酸克倫特羅對(duì)照品:含鹽酸克倫特羅不得少于98.5%②鹽酸③無水甲醇④氫氧化鈉⑤磷酸二氫鉀⑥磷酸⑦鹽酸溶液取鹽酸4.2ml,加水至1000ml,即得。⑧o.5mol/L磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀68g,加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3.O,用水稀釋至1000ml,即得。⑨0.05mol幾磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀6.88,加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3.0,用水稀釋至1000mi,即
液相色譜法測(cè)定克倫特羅殘留2010/10/26
(1)試劑和材料①鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品②乙醚;分析純③正己烷:分析純④甲醇:色譜純⑤鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)液⑥lmol/I。鹽酸溶液⑦0.05mol/L乙酸緩沖液⑧0.3mol/L乙酸緩沖液⑨lmol/LNaOH溶液’⑩甲醇液:甲醇—重蒸水(75+25)(2)儀器和設(shè)備①液相色譜儀②勻漿機(jī)③旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀④電子天平:感量O.00001g⑤紫外分光光度計(jì)⑥離心機(jī)⑦Silioa小柱⑧AluminaA小柱(3)測(cè)定步驟①提取和凈化取組織樣品10g,加入30mllmol/L鹽酸溶液勻漿,超聲波振蕩3h,5000r/
5種磺胺類藥物殘留的液相色譜法2010/10/26
(1)試劑和材料除特別注明外,所用試劑均為分析純;水為超純水。①磺胺類藥物對(duì)照晶(SMM、SDM、SMz、SMZ和SQ)②甲醇色譜純③乙腈色譜純④正己烷⑤正丙醇⑥無水硫酸鈉⑦堿性氧化鋁SPE柱每根柱填料量為28⑧磺胺類藥物貯備液(1mg/mi)分別取上述磺胺類藥物對(duì)照晶各約50mg,精密稱定,置同一50ml量瓶,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。置一20~C以下冰箱中保存,有效期3個(gè)月。⑨磺胺類藥物工作液(5Ps/mi)精密量取磺胺類藥物貯備液o.5ml,置100ml量瓶,用甲醇稀釋至刻度,搖
磺胺甲氧噠嗪殘留檢驗(yàn)的薄層色譜測(cè)定方法2010/10/23
1)試劑和材料除另有規(guī)定外,所用試劑均為分析純?yōu)檎麴s水。1.乙酸乙酯2.二氯甲烷3.正己烷4.三氯甲烷5.特丁醇6.甲醇7.丙酮8.濃鹽酸:密度約1.19g/ml9.氫氧化鈉溶液:10mol/L水溶液10.熒光胺溶液:30rug熒光胺溶于250ml丙酮中,可用于6~9塊展開板11.二乙胺12.展開溶劑:三氯甲烷—特丁醇(80+20),當(dāng)日新配13.甘氨酸緩沖液:0.2mol/I水溶液。使用前用10mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值達(dá)到12.25(本步驟需在使用前、在20C室溫的蒸氣浴上進(jìn)行)。14.
磺胺甲氧嘧啶和磺胺喹惡啉殘留檢驗(yàn)的氣相色譜測(cè)定方法2010/10/23
(1)試劑和材料①乙腈:分析純,重蒸餾,收集81—82℃餾分。②正己烷:分析純,重蒸餾,收集67—69℃餾分。③乙酸乙酯:分析純,重蒸餾,收集76~陽℃餾分④丙酮:分析純。⑤乙醚:分析純,重蒸餾。收集33~34℃餾分,⑥磷酸二氫鉀溶液:1mo1/l,⑦無水硫酸鈉:分析純,經(jīng)650℃灼燒4L。置于密封容器內(nèi)備用。⑧氯化鈉:優(yōu)級(jí)純。⑨重氮甲烷—乙醚溶液:將裝有氫氧化鉀水溶液(6g/10ml、35ml乙醇(分析純)及10m1乙醚的混合液的燒瓶置于70℃水浴上,邊用磁力攪拌器攪拌邊通過漏斗滴下N—甲基—
磺胺間二甲氧嘧啶殘留檢驗(yàn)的氣相色譜測(cè)定方法2010/10/19
(1)試劑和材料除特殊規(guī)定外,所有試劑均為分析純,水為蒸餾水①乙腈:用全玻璃器皿重蒸餾,收集81—82~C餾分。②正己烷:用全玻璃器皿重蒸餾,收集67~69~C餾分。③三氯甲烷:用全玻璃器皿重蒸餾,收集61—62~C餾分④乙酸乙酯:用全玻璃器皿重蒸餾,收集76~78~C餾分⑤丙酮⑥乙醚:用全玻璃器皿重蒸餾,收集33、34~C餾分。⑦檸檬酸三鈉溶液:取檸檬酸三鈉,用水制備成飽和溶液。⑧無水硫酸鈉:650℃灼燒4L。冷卻后貯于密封容器中備用。⑨重氮甲烷—乙醚溶液:在125ml的蒸餾瓶中,加入35ml
L-苯甘氨酸2010/09/14
英文名稱:L-Phenylglycine其他名稱:右旋苯甘氨酸;L-氨基苯基乙酸;L-(+)-α-苯甘氨酸CAS號(hào):2935-35-5C8H9NO2=151.16含量:≥98.0%比旋光度:157°(c=2,2NHCl)熔點(diǎn):~300℃性狀:白色或類白色結(jié)晶性粉末用途:科研、實(shí)驗(yàn)。工業(yè)上用于制造氨芐青霉素和頭孢氨芐等藥物。本產(chǎn)品僅供科研使用保存:RT
BOC-L-苯丙氨酸2010/09/14
英文名稱:BOC-L-Phenylalanine其他名稱:N-叔丁氧羰基-L-苯丙氨酸CAS號(hào):13734-34-4C14H19NO4=265.31含量:≥99.0%比旋光度:+25±1°(c=1%inethanol)熔點(diǎn):85~88℃層析:合格性狀:結(jié)晶性粉末用途:科研、實(shí)驗(yàn)。用于蛋白質(zhì)及多肽等的合成,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、生物化學(xué)、食品、化妝品等多種產(chǎn)品。本產(chǎn)品僅供科研使用保存:RT
DL-苯丙氨酸2010/09/11
10063DL-苯丙氨酸|DL-β-苯丙氨酸BR銳谷英文名稱:DL-Phenylalanine其他名稱:DL-β-苯丙氨酸;DL-2-氨基-3-苯基丙酸;DL-α-氨基-β-苯丙酸;DL-α-氨基氫化肉桂酸CAS號(hào):150-30-1C9H11NO2=165.19含量:≥99.0%層析:合格性狀:白色結(jié)晶,甜味。在真空中升華。水中溶解度(g/L):0℃時(shí)為9.97、25℃時(shí)為14.11、50℃時(shí)為21.87、75℃時(shí)為37.08、100℃時(shí)為68.9。極微溶于乙醇和甲醇,難溶于乙醚。熔點(diǎn)271~2
D-苯丙氨酸2010/09/11
英文名稱:D-Phenylalanine其他名稱:D-2-氨基-3-苯基丙酸;D-α-氨基-β-苯丙酸;D-α-氨基氫化肉桂酸CAS號(hào):673-06-3C9H11NO2=165.19含量:≥99.0%比旋光度:+33.5~+35.2o層析:合格性狀:白色或類白色結(jié)晶性粉末。16℃時(shí)1g溶于35.5ml水,微溶于甲醇,不溶于乙醇、乙醚和丙酮。熔點(diǎn)285℃(分解)。半數(shù)致死量(大鼠,靜脈)5452mg/kg用途:科研、實(shí)驗(yàn)保存:RT,有效期3年
L-苯丙氨酸2010/09/07
英文名稱:L-Phenylalanine其他名稱:L-2-氨基-3-苯基丙酸;L-α-氨基-β-苯丙酸;L-α-氨基氫化肉桂酸CAS號(hào):63-91-2C9H11NO2=165.19含量:≥99.0%性狀:溶液用途:苯丙氨酸瓊脂培養(yǎng)基配套試劑,苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)保存:RT
DL-甲硫氨酸2010/09/07
英文名稱:DL-Methionine其他名稱:DL-蛋氨酸;DL-2-氨基-4-甲硫基丁酸CAS號(hào):59-51-8C5H11NO2S=149.21含量:≥99.0%熔點(diǎn):270~273°C性狀:白色片狀結(jié)晶或粉末。溶于水、稀酸和稀堿,極微溶于95%乙醇,不溶于乙醚。相對(duì)密度1.340。熔點(diǎn)281℃(分解)用途:科研、實(shí)驗(yàn)保存:RT
D-甲硫氨酸2010/09/04
英文名稱:D-Methionine其他名稱:D-蛋氨酸;D-2-氨基-4-甲硫基丁酸;D-甲硫基丁氨酸CAS號(hào):348-67-4C5H11NO2S=149.21含量:≥99.0%比旋光度:-24°(c=8,6NHCl)熔點(diǎn):273~275°C性狀:白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末;溶于水、稀酸和稀堿;極微溶于乙醇;不溶于乙醚用途:科研、實(shí)驗(yàn)保存:RT
多聚右旋賴氨酸15-30萬2010/09/04
英文名稱:Poly-D-lysinehydrobromide其他名稱:多聚-D-賴氨酸;聚-D-賴氨酸氫溴酸鹽;多聚賴氨酸氫溴酸鹽CAS號(hào):27964-99-4分子式:D-Lys-(D-Lys)n-D-Lys?xHBr分子量:150,000~300,000水分:≤10.0%性狀:白色或類白色粉末或固體用途:科研、實(shí)驗(yàn)。usefulinpromotingcelladhesiontosolidsubstrates保存:-20℃
多聚右旋賴氨酸7-15萬|聚-D-賴氨酸氫溴酸鹽7-15萬2010/08/31
英文名稱:Poly-D-lysinehydrobromide其他名稱:多聚-D-賴氨酸;聚-D-賴氨酸氫溴酸鹽;多聚賴氨酸氫溴酸鹽CAS號(hào):27964-99-4分子式:D-Lys-(D-Lys)n-D-Lys?xHBr分子量:70,000~150,000水分:≤10.0%溶解性:Clearcolorlesssolutionat50mg/mlinwater性狀:白色或類白色粉末或固體用途:科研、實(shí)驗(yàn)。usefulinpromotingcelladhesiontosolidsubstrates保存:
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