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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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如何繪制出完美的標(biāo)準(zhǔn)曲線?2021/03/05
標(biāo)準(zhǔn)曲線法也稱為外標(biāo)法或直接比較法,是一種簡便、快速的定量方法,在ELISA實驗中比較常用的一種分析方法。一、做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意ELISA試劑盒1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實驗樣
恒遠(yuǎn)技術(shù)產(chǎn)品文獻(xiàn):試劑-氨基甲酸乙酯引用文獻(xiàn)2021/03/05
【文獻(xiàn)標(biāo)題】AstragaluspolysaccharidesaffectinsulinresistancebyregulatingthehepaticSIRT1-PGC-1α/PPARα-FGF21signalingpathwayinmaleSpragueDawleyratsundergoingcatch-upgrowth【作者】CHENGYINGGU,YIPENGZENG,ZHAOSHENGTANG,et.al【作者單位】ShanghaiPudongHospital(上海市浦東醫(yī)院)【文獻(xiàn)中
蛋白質(zhì)如何提純呢?2021/03/04
1、超速離心法此法分離和純化抗原的原理是利用各顆粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度梯度層內(nèi),達(dá)到彼此分離的目的。常用的密度梯度介質(zhì)有蔗糖、甘油、CsCl等。用超速離心或梯度密度離心分離和純化抗原時,除個別成分外,極難將某一抗原成分分離出來,故只用于少數(shù)大分子抗原的分離,如IgM、C1q,甲狀腺球蛋白等,以及一些比重較輕的抗原物質(zhì)如載脂蛋白A、B等。多數(shù)的中、小分子量蛋白質(zhì)采用此種方法很難純化。2、選擇性沉淀法其原理多根據(jù)各蛋白質(zhì)理化特性的差異,采用各種沉淀劑或改變某
恒遠(yuǎn)為您講解ELISA實驗之空白孔的設(shè)置2021/03/04
今天上海恒遠(yuǎn)為大家講解ELISA實驗技巧中的空白孔對照。ELISA試劑盒ELISA空白對照有幾種:1.空氣空白水空白:一般是用于儀器調(diào)零的,所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值。2.底物空白:一般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數(shù)偏高,同樣所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值(只加底物和終止液)3.酶空白:一般在2步法實驗中使用,主要是看酶是否和板有非特異性結(jié)合的,一般不做這個。ELISA空白孔一般設(shè)一個,這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽性標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)2個復(fù)孔,雖然有點浪費,但為了確保實驗的可靠性,我認(rèn)為還是很有必要的。E
技術(shù)文獻(xiàn):小鼠CRH,ACTH,CORT ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)2021/03/02
【文獻(xiàn)標(biāo)題】Reducedgrowthcapacityofpreimplantationmouseembryosinchronicunpredictablestressmodel【作者】XiaoliZhao,RuihongMa,XiaoyuZhang,et.al【作者單位】天津中醫(yī)藥大學(xué)第YI附屬醫(yī)院(FirstTeachingHospitalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)E
ELISA常用方法大PK2021/03/02
ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗的標(biāo)準(zhǔn)程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(captureAb)固定在固相載體上,再加入一級檢測抗體(primarydetectionAb),形成一個抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶(enzyme)標(biāo)記了,即可用來直接測定抗原的量,若無,則可利用另一個酶標(biāo)記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)(substrate),作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原
你真的會培養(yǎng)細(xì)胞嗎?這些地方要注意了2021/03/02
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)又叫細(xì)胞克隆技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長,在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動物),今天的文章中跟大家介紹一些關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識!一.細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念體外培養(yǎng)(invitroculture)包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng),即:組織培養(yǎng)(tissueculture)、細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)和器官培養(yǎng)(organculture)。細(xì)胞培養(yǎng)(Cellculture)指從生物機體取出部分組織分散成單個細(xì)胞或直接從機體取出單個細(xì)胞,也可把體外培養(yǎng)細(xì)胞分散成單個細(xì)胞在體
ELISA加樣時為何要避免氣泡的原因以及避免方法介紹2021/03/01
相信大家在很多說明書或教科書上都看到過這樣的一條提示,就是加樣時要避免出現(xiàn)氣泡,這到底是什么原因呢?因為在做實驗的過程中,有時為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡,這樣對實驗結(jié)果會產(chǎn)生什么影響呢?1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍,導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。3.包被時有氣泡的話,將導(dǎo)致包被不*實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。4.封閉時有氣泡的話,將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性。5.加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--
ELISA雙抗體夾心法操作注意事項2021/03/01
做ELISA實驗,有幾種常見的實驗方法,他們分別是競爭法、捕獲法、間接法、夾心法、而夾心法又可以分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法!在今天的文章中,將詳細(xì)得跟大家講述雙抗體夾心法!雙抗體夾心法,其基本原理是將一定量的包被抗體以物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面,加入無關(guān)蛋白載體封閉未結(jié)合位點,然后加入待檢標(biāo)本,通過加入檢測抗體,酶標(biāo)記第二抗體后用TMB底物顯色,微孔板中顏色的深淺與待測物的濃度呈正相關(guān)。該方法的適用條件是:含有多個抗原表位的大分子物質(zhì)。因為這種檢測方法需要兩種抗體,所以就涉及抗體
完整版ELISA實驗教程,快快收藏!2021/02/26
每一位科研人員都希望自己做的實驗?zāi)艿玫揭粋€完美的結(jié)果,但是在操作過程中難免出現(xiàn)一些或大或小的問題。ELISA檢測可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中廣泛靈敏的技術(shù)手段,但是也免不了出現(xiàn)花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空白還低等等的問題。今天上海恒遠(yuǎn)為您總結(jié)7步ELISA檢測實驗經(jīng)驗,希望對ELISA新手們有所幫助。1、包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時,師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被
胎牛血清與小牛血清區(qū)別何在?2021/02/26
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿.血清的種類有很多,牛血清、豬血清、兔血清、馬血清等等。在牛血清中,比較常見的就是胎牛血清和小牛血清,那么你知道胎牛血清和小牛血清的區(qū)別在哪嗎?如果胎牛血清和小牛血清兩種可選,更多的研究生物細(xì)胞培養(yǎng)員會選擇胎牛血清,這是為什么呢?下面上海恒遠(yuǎn)就為大家做個簡單的介紹!一、來源不同胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(
血清的作用以及如何避免血清中產(chǎn)生沉淀物!2021/02/25
說到血清,相信大家都不會陌生,血清就是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋原白已被除去的血漿。血清的作用非常多,所以在科學(xué)研究中時常會用到。今天的文章中,將為大家講解血清的作用以及怎么避免血清中沉淀物的產(chǎn)生!主要作用1提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。2提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3
植物葉綠素(Chlorophyll)ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)2021/02/25
【文獻(xiàn)標(biāo)題】Cytological,physiological,andtranscriptomicanalysesofgoldenleafcolorationinGinkgobilobaL【作者】Wei-xingLi,Shun-boYang,ZhaogengLu,et.al【作者單位】揚州大學(xué)(YangzhouUniversity)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】植物葉綠素(Chlorophyll)ELISA試劑盒【DOI】doi.org/10.1038/s41438-018-0015-4【影響因子(IF)】
ELISA試劑盒:抗體包被和封閉2021/02/24
常用的封鎖劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封鎖劑的。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。ELISA試劑盒抗原或抗體包被時所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的曠地空閑,封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗的特點和材料的性質(zhì)而選定。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過夜,37℃中
上海恒遠(yuǎn)為您分享:elisa試劑盒使用注意事項2021/02/24
ELISA試劑盒因為具有靈敏度高、特異性強,酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定,操作方法簡便快速、無放射性污染以及應(yīng)用范圍廣等很多優(yōu)點,受到很多科研工作者的喜愛,但是Elisa試劑盒的測定,受很多方面影響,所以在使用前一定要做好實驗準(zhǔn)備工作以及多看看文獻(xiàn)!elisa試劑盒使用注意事項:1、Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,
關(guān)于免疫組化你必須要知道的2021/02/23
免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。今天上海恒遠(yuǎn)為大家整理了一些一些免疫組化的常見問題,下面我們來看看吧!1.在什么情況下使用TritonX-100?(1)TritonX-100化學(xué)名稱為聚乙二醇
ELISA試劑盒:造成假陽性的錯誤操作有哪些?2021/02/23
ELISA實驗中造成假陽性的錯誤操作主要有如下幾點:1、加樣對于間接ELISA標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋,如果加樣不準(zhǔn)就會造成誤差,尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時,很小的誤差,會導(dǎo)致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標(biāo)本呈陽性(或陰性)。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本,可較好地避免以上誤差。2、洗滌在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步,應(yīng)引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作,得出不
知道離心機的您,知道超速離心嗎?2021/02/22
離心機是借離心力分離液相非均一體系的設(shè)備。根據(jù)物質(zhì)的沉降系數(shù)、質(zhì)量、密度等的不同,應(yīng)用強大的離心力使物質(zhì)分離、濃縮和提純的方法稱為離心。一般說,離心機轉(zhuǎn)速在30000r/min以上的稱為超速離心。離心技術(shù),特別是超速離心技術(shù)是分子生物學(xué)、生物化學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中*的手段。今天上海恒遠(yuǎn)特地為大家整理了超速離心概要的相關(guān)內(nèi)容,希望大家看后有一定的了解。超速離心是分離亞細(xì)胞及蛋白質(zhì)大分子的有效手段,往往是進(jìn)一步純化的第yi次過篩。超速離心又分差速離心和梯度離心。差速離心系指低速與高速離心交替進(jìn)行,用于
常見指標(biāo)——干擾素的性質(zhì)以及類型2021/02/22
干擾素是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛的抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用的可溶性糖蛋白。干擾素在整體上不是均一的分子,可根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞分為3種類型:白細(xì)胞產(chǎn)生的為α型;成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的為β型;T細(xì)胞產(chǎn)生的為型。根據(jù)干擾素的產(chǎn)生細(xì)胞、受體和活性等綜合因素將其分為2種類型:Ⅰ型和Ⅱ型。1.Ⅰ型干擾素又稱為抗病毒干擾素,其生物活性以抗病毒為主。Ⅰ型干擾素有3種形式:IFNα、IFNβ和IFNω。IFN主要由白細(xì)胞產(chǎn)生,含有至少14種不同基因編碼的蛋白質(zhì),各成分之間氨基酸順序的同源性約為90%,成熟的IFNα的分子
ELISA試劑盒操作中應(yīng)該注意哪些問題?2021/02/20
ELISA試劑盒銷售的過程中客戶的任何問題都應(yīng)該細(xì)心答復(fù),無論購買與否,每個客戶都是一次緣分的邂逅,您的每一個訂單都是對我們的信任與陪伴,您的每一份包裹都見證了我們成長的足跡,上海恒遠(yuǎn)感謝客戶給予我們的信任,今天、明天、未來都將做得更好,更專業(yè)?,F(xiàn)在讓我們來講一下elisa試劑盒在實驗操作過程中操作員應(yīng)養(yǎng)成的那些好習(xí)慣。建議ELISA試劑盒實驗操作員養(yǎng)成這些好習(xí)慣:1、試驗之前看資料的時候,歸類存放,看過后記下重點內(nèi)容,并將出處標(biāo)明,以免日后找不到。1、實驗前認(rèn)真設(shè)計,作實驗時不胡思亂想,做完后
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