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2018
07-05

原子吸收光譜儀的保養(yǎng)
1.開(kāi)機(jī)前，檢查各插頭是否接觸良好，調(diào)好狹縫位置，將儀器面板的所有旋鈕回零再通電。開(kāi)機(jī)應(yīng)先開(kāi)低壓，后開(kāi)高壓，關(guān)機(jī)則相反。2.空心陰極燈需要一定預(yù)熱時(shí)間。燈電流由低到高慢慢升到規(guī)定值，防止突然升高，造成陰極濺射。有些低熔點(diǎn)元素?zé)羧鏢n、Pb等，使用時(shí)防止震動(dòng)，工作后輕輕取下，陰極向上放置，待冷卻后再移動(dòng)裝盒。裝卸燈要輕拿輕放，窗口如有污物或指印，用擦鏡紙輕輕擦拭。空心陰極燈發(fā)光顏色不正常，可用燈電流反向器（相當(dāng)于一個(gè)簡(jiǎn)單的燈電源裝置），將燈的正、負(fù)相反接，在燈大電流下點(diǎn)燃20－30min；或在大電
2018
07-04

親和層析法純化多克隆抗體
【實(shí)驗(yàn)原理】如圖所示，親和層析的高度選擇性使得從某一初始材料中純化，富集某一含量較低的目的蛋白成為可能，因此親和層析是蛋白質(zhì)分離純化過(guò)程中有效的方法之一。另外，如果配基與蛋白質(zhì)的親和能力很強(qiáng)，也可同時(shí)進(jìn)行樣品的濃縮。雖然多數(shù)情況下不需要將抗體與其他血清蛋白分開(kāi)，但如果一旦需要，蛋白A親和層析是一種非常有效的分離方法。蛋白A是從Staphylococcusaureus中獲得，可與抗體重鏈的Fc片段相結(jié)合?，F(xiàn)在已知蛋白A可與多種哺乳動(dòng)物的IgG相結(jié)合也可與某些IgM和IgA相結(jié)合。如果將蛋白A與固相
2018
07-04

離子交換樹(shù)脂在天然產(chǎn)物提取分離中的應(yīng)用
作者張東劉建華韓林宇陳晨王逸君（陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院生工091，陜西漢中723000）指導(dǎo)教師：馮自立【摘要】綜述了離子交換樹(shù)脂在核苷酸、核酸、抗生素等天然產(chǎn)物分離純化中應(yīng)用的研究現(xiàn)狀,展望了離子交換樹(shù)脂在天然產(chǎn)物提取分離中的應(yīng)用前景?！娟P(guān)鍵詞】離子交換樹(shù)脂天然產(chǎn)物分離提純離子交換樹(shù)脂自1933年開(kāi)始合成以來(lái),至今已獲得了長(zhǎng)足發(fā)展。目前交換樹(shù)脂的商品品種已達(dá)2000余種，廣泛應(yīng)用于化工生產(chǎn)、食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、環(huán)境保護(hù)等許多領(lǐng)域。用離子交換樹(shù)脂進(jìn)行交換、吸附、絡(luò)合，從而達(dá)到分離、提純、
2018
07-02

手性分離色譜
是采用色譜技術(shù)(TLC、GC和HPLC)分離測(cè)定光學(xué)異構(gòu)體藥物的有效方法。由于許多藥物的對(duì)映體(Enantiomer)之間在藥理、毒理乃至臨床性質(zhì)方面存在著較大差異，有必要對(duì)某些手性藥物進(jìn)行對(duì)映體的純度檢查。（一）原理和方法：對(duì)映體化合物之間除了對(duì)偏振光的偏轉(zhuǎn)方向恰好相反外，其理化性質(zhì)是*相同的，因而難以分離。傳統(tǒng)方法（分步結(jié)晶法、酶消化法等）有很大局限性，特別是難以進(jìn)行微量分離和測(cè)定。60年代前后，TLC、GC法逐漸用于對(duì)映體化合物的拆分。但這兩種方法只能拆分不多的化合物，且需要較復(fù)雜的樣品處
2018
07-02

雙向電泳樣品制備程序
一、培養(yǎng)細(xì)胞（culturecell）樣品處理方法：培養(yǎng)動(dòng)物組織細(xì)胞由于沒(méi)有細(xì)胞壁，因此可以將細(xì)胞收集下來(lái)，直接加入裂解緩沖液（Lysisbuffer）抽提總蛋白。裂解緩沖液有多種配方，本實(shí)驗(yàn)室主要采用如下成份：1.7MUrea，2MThiourea，4％（w/v）CHAPS，40mMTris-Base，40mMDTT，2％PharmalytepH3-10.其他常用的裂解緩沖液如下：2.9.5Murea,2%(w/v)CHAPS,0.8%(w/v)PhamarlytepH3-10,1%(w/v)
2018
06-29

阿貝折射儀
儀器用途阿貝折射儀是能測(cè)定透明、半透明液體或固體的折射率nD和平均色散nF-nC的儀器（其中以測(cè)透明液體為主），如儀器上接恒溫器，則可測(cè)定溫度為0℃～70℃內(nèi)的折射率nD。折射率和平均色散是物質(zhì)的重要光學(xué)常數(shù)之一，能借以了解物質(zhì)的光學(xué)性能、純度、及色散大小等。本儀器能測(cè)出蔗糖溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（錘度Brix）（0～95%，相當(dāng)于折射率為1.333～1.531）。故此儀器使用范圍甚廣，是石油工業(yè)、油脂工業(yè)、制藥工業(yè)、制漆工業(yè)、日用化學(xué)工業(yè)、制糖工業(yè)和地質(zhì)勘察等有關(guān)工廠、學(xué)校及有關(guān)科研單位*的常用設(shè)備之
2018
06-29

流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)
流式細(xì)胞儀（flowcytometer）是一種能夠探測(cè)和計(jì)數(shù)以單細(xì)胞液體流形式穿過(guò)激光束的細(xì)胞檢測(cè)裝置，由于在檢測(cè)中使用的細(xì)胞標(biāo)志示蹤物質(zhì)為熒光標(biāo)記物，因此，用來(lái)分離、鑒定細(xì)胞的流式細(xì)胞儀有被稱(chēng)為熒光激活細(xì)胞分類(lèi)儀，是分離和鑒定細(xì)胞群及亞群的一種強(qiáng)而有力的應(yīng)用工具。流式細(xì)胞儀實(shí)驗(yàn)方法原理流式細(xì)胞儀的使用一般分為三個(gè)步驟。，是儀器前階段，包括試劑的準(zhǔn)備，細(xì)胞制備、細(xì)胞的熒光染色；第二，是流式細(xì)胞儀階段，主要是儀器的操作；第三，是結(jié)果分析階段。實(shí)驗(yàn)材料淋巴細(xì)胞外周血的白細(xì)胞試劑、試劑盒FACS緩沖液
2018
06-28

色譜儀分離方法的選擇原則
色譜儀分離方法的選擇原則：一、根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量選擇：1、相對(duì)分子質(zhì)量很低的樣品采用氣相色譜。2、液液分配色譜、液固吸附色譜和離子交換色譜適合分析相對(duì)分子質(zhì)量為200～2000的樣品。3、相對(duì)分子質(zhì)量大于2000的樣品，采用凝膠色譜為優(yōu)。二、根據(jù)溶解度選擇：1、溶于水并能離解的樣品，采用離子交換色譜。2、溶于烴類(lèi)（如苯或異辛烷等）的樣品，可采用液固吸附色譜。3、溶于CCl4的樣品，多采用液液分配色譜和液固吸附色譜。4、既溶于水又溶于異丙醇的樣品，常用水和異丙醇的混合液作液液分配色譜的流動(dòng)相，以疏水
2018
06-28

液相色譜儀的應(yīng)用
液相色譜儀是利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異，使各組分在作相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離。液相色譜儀在食品分析、環(huán)境分析、生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和無(wú)機(jī)分析等領(lǐng)域得到廣泛使用。一般來(lái)說(shuō)，80%～85%的有機(jī)物原則上可采用液相色譜儀分析。一、在食品分析中的應(yīng)用：1、食品營(yíng)養(yǎng)成分分析：蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類(lèi)、色素、維生素、香料、有機(jī)酸（鄰苯二甲酸、檸檬酸和蘋(píng)果酸等）、有機(jī)胺和礦物質(zhì)等分析。2、食品添加劑分析：甜味劑、防腐劑、著色劑（檸檬黃、莧菜紅
2018
06-28

氣相色譜儀應(yīng)用領(lǐng)域
(一)白酒中有關(guān)醛、醇、酯的分析：采用氫焰離子化檢測(cè)器，使用20%DNP+7%吐溫-80，或蘭州化物所大口徑￠0.53mm毛細(xì)管柱，完成濃香型白酒和清香型白酒中主要的醇、醛、酸、酯各個(gè)組分的分析。使用毛細(xì)管柱除提高了分析效率外，還能檢出有機(jī)酸，為復(fù)雜的釀造發(fā)酵工藝提供了更多有價(jià)值的信息。分析結(jié)果*符合國(guó)標(biāo)GB10345.7-89/GB10345.8-89。(二)植物油中殘留溶劑的檢測(cè)：可以按照國(guó)標(biāo)GB/T5009.37-2003頂空氣相色譜法對(duì)浸出油中6號(hào)溶劑殘留量進(jìn)行測(cè)定。采用氫焰離子化檢測(cè)器
2018
06-27

離心分離方法專(zhuān)題介紹
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，由于樣品的各種性質(zhì)差異，只有選擇了正確的離心方法，才能獲得預(yù)期的分離純化結(jié)果。常用的離心方法主要有差速離心法、密度梯度離心法。其中密度梯度離心法又可細(xì)分為速率區(qū)帶離心和等密度梯度離心法。離心方法——差速離心差速離心法(differebtialvelocitycentrifugationmethod)又稱(chēng)離心力差分離法。原理是利用樣品中各組分沉降系數(shù)的差異，對(duì)不同的微粒施以不同的離心力，經(jīng)過(guò)多次離心，離心速度逐步加大，將不同的微粒依次沉降，從而實(shí)現(xiàn)離心分離。如果分離樣品中有大中小三種
2018
06-27

超聲波提取原理
超聲波提取技術(shù)超聲波是指頻率為20千赫～50兆赫左右的電磁波，它是一種機(jī)械波，需要能量載體—介質(zhì)—來(lái)進(jìn)行傳播。超聲波在傳遞過(guò)程中存在著的正負(fù)壓強(qiáng)交變周期，在正相位時(shí)，對(duì)介質(zhì)分子產(chǎn)生擠壓，增加介質(zhì)原來(lái)的密度；負(fù)相位時(shí)，介質(zhì)分子稀疏、離散，介質(zhì)密度減小。也就是說(shuō)，超聲波并不能使樣品內(nèi)的分子產(chǎn)生極化，而是在溶劑和樣品之間產(chǎn)生聲波空化作用，導(dǎo)致溶液內(nèi)氣泡的形成、增長(zhǎng)和爆破壓縮，從而使固體樣品分散，增大樣品與萃取溶劑之間的接觸面積，提高目標(biāo)物從固相轉(zhuǎn)移到液相的傳質(zhì)速率。在工業(yè)應(yīng)用方面，利用超聲波進(jìn)行清洗、
2018
06-26

細(xì)胞培養(yǎng)中無(wú)菌操作技術(shù)
細(xì)胞培養(yǎng)中的無(wú)菌技術(shù)：1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。2.無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、
2018
06-26

神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)
一、神經(jīng)干細(xì)胞的分離和傳代無(wú)菌條件下取新生SD大鼠(出生48h內(nèi))腦組織，D-Hanks液充分漂洗后，在解剖顯微鏡下剝離腦膜，準(zhǔn)確分離海馬，用眼科剪將海馬剪碎后，再轉(zhuǎn)移到DMEM/F12(1:1)加B27和bFGF(20ng/ml)的無(wú)血清培養(yǎng)基，吸管吹打機(jī)械分離制作單細(xì)胞懸液，臺(tái)盼藍(lán)染色后細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5×104~5個(gè)/ml，置于24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，每孔加入細(xì)胞懸液500μl。待神經(jīng)球形成后再次機(jī)械分離克隆制作單細(xì)胞懸液，仍以5×104個(gè)/ml的細(xì)胞濃度置于24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)，每孔加
2018
06-25

近紅外光譜儀的優(yōu)點(diǎn)
1、分析速度快，一般分析一個(gè)樣品的時(shí)間約為1分鐘。2、不需要對(duì)樣品進(jìn)行化學(xué)處理，分析步驟簡(jiǎn)單。3、無(wú)消耗品，無(wú)環(huán)境污染，不破壞樣品，經(jīng)濟(jì)。4、一次測(cè)試能夠同時(shí)得到多種成分或指標(biāo)，甚至開(kāi)發(fā)多種新指標(biāo)而沒(méi)有"通道"限制。5、分析結(jié)果度比濕化學(xué)方法高，因?yàn)閮x器具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，高重現(xiàn)性，操作環(huán)節(jié)少，所以數(shù)據(jù)更可靠。6、儀器用途廣泛，能夠放到現(xiàn)場(chǎng)使用，甚至能夠在線實(shí)時(shí)檢測(cè)。7、可檢測(cè)的樣品廣泛，通常是固態(tài)的片煙、煙絲或粉末，也可以是液態(tài)，還可開(kāi)發(fā)檢測(cè)其他輔料的方法。在真假鑒別方面也取得了進(jìn)展。8、可透過(guò)
2018
06-25

EB注意事項(xiàng)
分子式：C21H20BrN3分子結(jié)構(gòu)英文名：Ethidiumbromide分子量：394.3139g/mol熔點(diǎn)：260-262°C為芳香族熒光化合物EB（Ethidiumbromide，溴化乙錠）溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑，用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標(biāo)準(zhǔn)302nm紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號(hào)，可用Polaroid底片或帶CCD成像頭的凝膠成像處理系統(tǒng)拍攝。溴化乙錠可以嵌入堿基分子中,導(dǎo)致錯(cuò)配。溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑,具有高致癌性!普通實(shí)驗(yàn)手套（淺黃色乳膠手套
2018
06-25

瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對(duì)于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。原理瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的主要區(qū)別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過(guò)時(shí)會(huì)受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動(dòng)時(shí)受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當(dāng)大，對(duì)大多數(shù)蛋白質(zhì)
2018
06-22

固相pH梯度
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模悍蛛x蛋白質(zhì)混合物，將樣品進(jìn)行電泳后，為了不同目的在它的直角方向再進(jìn)行一次電泳。常說(shuō)的雙向電泳是根據(jù)蛋白質(zhì)所帶的電荷和分子大小對(duì)蛋白質(zhì)混合物進(jìn)行分離。實(shí)驗(yàn)原理：向等電聚焦的基本原理是利用蛋白質(zhì)分子或其他兩性分子的等電點(diǎn)不同，在一個(gè)穩(wěn)定的、連續(xù)的、線性的pH梯度中進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離和分析。第二向運(yùn)用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳根據(jù)分子量大小對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分離?；具^(guò)程：等電聚焦、平衡及轉(zhuǎn)移到二向、SDS-Page試劑或儲(chǔ)液：IPGbuffer、礦物油、DTT、碘代乙酰胺、過(guò)硫酸銨、TEMED、1M
2018
06-22

離子色譜分離柱
與HPLC一樣，分離柱是離子色譜儀重要的組成部分。離子色譜的分離機(jī)理主要是離子交換，基于離子交換樹(shù)脂上可離解的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子之間進(jìn)行的可逆交換，不同的離子因與交換劑的親和力不同而被分離，與HPLC不同的是，離子色譜選擇性的改變主要是通過(guò)采用不同的固定相來(lái)實(shí)現(xiàn)的。1陰離子交換分離柱陰離子交換分離柱使用的填料主要是表面附聚薄殼型陰離子交換樹(shù)脂。樹(shù)脂的內(nèi)核是苯乙烯一二乙烯苯的共聚物(PS-DVB)，核外是一層磺化層，外層是粒度均勻的單層季銨化乳膠顆粒，以離子鍵結(jié)合在磺化層上。由于
2018
06-21

免疫復(fù)合物的純化
實(shí)驗(yàn)試劑裂解緩沖液抗體蛋白A或蛋白G微球(用含0.02％疊氮鈉裂解緩沖液配成10％(V／V)的混懸液，4℃保存)不含DTT的Laemmli樣品緩沖液(2％SDS、10％甘油、60mmol／LTris，pH6.8和0.02％溴酚藍(lán))1mol／LDTT(保存于-20℃)實(shí)驗(yàn)設(shè)備搖床、抽吸裝置(大多是通過(guò)導(dǎo)管與負(fù)壓瓶一室內(nèi)真空器連接)實(shí)驗(yàn)步驟1．準(zhǔn)備工作蛋白A或蛋白G微珠混懸液可在用前準(zhǔn)備，4℃保存于含疊氮鈉的溶液中。2．操作步驟1)將小量裂解物樣本分別置于適當(dāng)數(shù)量的1.5mlEP管中，加入裂解緩沖液

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