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2016
09-28

ELISA試劑盒分析
ELISA試劑盒分析在所有標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)的過程中，所用的儀器及加樣過程都處于正常狀態(tài)的情況下，步驟均按照各種試劑說明書的要求去做，排除實(shí)驗(yàn)所用儀器和操作步驟對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響外，ELISA試劑盒內(nèi)的空白、陰性和陽性對(duì)照以及室內(nèi)質(zhì)控值都很正常，只有檢測(cè)的血液標(biāo)本情況異常。根據(jù)國(guó)家和疾控中心報(bào)告陽性率的比例不應(yīng)該是很高的情況下，HBsAg在用ELISA之前都經(jīng)過了快速金標(biāo)試劑的檢測(cè)，陽性標(biāo)本得到了一定的控制。因此，原因可能是在標(biāo)本的處理，特別是放置時(shí)間、離心速度和離心時(shí)間方面的問題。所以，標(biāo)本的處理就成
2016
09-26

ELISA的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
ELISA的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或
2016
09-23

ELISA診斷試劑盒使用中常見問題及解決方法
ELISA診斷試劑盒使用中常見問題及解決方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)自問世以來，因其所需儀器化程度低、操作簡(jiǎn)便、敏感度高、特異性強(qiáng)、特別適合于對(duì)大量樣本的篩檢工作等優(yōu)點(diǎn)在獸醫(yī)臨床檢驗(yàn)中被廣泛地應(yīng)用。但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)也會(huì)得到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。筆者在ELISA試劑盒的和應(yīng)用過程中對(duì)經(jīng)常出現(xiàn)的一些問題進(jìn)行了分析和總結(jié)，現(xiàn)對(duì)ELISA試劑盒在使用過程中出現(xiàn)的一些問題談一點(diǎn)自己的見解，希望對(duì)廣大同行及試驗(yàn)操作者有所幫助。
2016
09-18

ELISA試劑盒的優(yōu)勢(shì)
ELISA試劑盒的優(yōu)勢(shì)：1，嚴(yán)格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性。2，產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有很好的靈敏度；3，綜合指標(biāo)特性，便捷操作的試劑盒；4，檢測(cè)驗(yàn)證樣本多樣；5，專業(yè)的團(tuán)隊(duì)為客戶提供個(gè)性化的定制服務(wù)；6，提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒，以及代測(cè)服務(wù)；7，多年實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)老師，保證勁馬生物ELISA試劑盒完善專業(yè)的售后服務(wù)；8，專業(yè)的代測(cè)服務(wù)：WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)代測(cè)，IHC實(shí)驗(yàn)代測(cè)，染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)。
2016
09-14

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的完善
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的完善①：評(píng)估試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否，對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)，判定試劑符合要求后方可使用。②：操作前仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)，比如洗板次數(shù)的掌握等。③：加樣要準(zhǔn)確、快速。加樣不準(zhǔn)確，酶生成物的量不能確定，直接影響顯色結(jié)果。另外，顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn)，如果
2016
09-12

干細(xì)胞老化的原因和預(yù)防
干細(xì)胞老化的原因和預(yù)防：接種密度的影響：部分干細(xì)胞具有一定的分泌性能，能夠分泌一些對(duì)細(xì)胞有支持能力的因子類物質(zhì)；所以必須維持一定的接種密度，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞增殖減慢，zui后出現(xiàn)老化；消化過度：消化細(xì)胞時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞的表面蛋白有較強(qiáng)的損傷，所以消化的時(shí)間不能過長(zhǎng)，使用合適濃度和pH值的消化酶，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞老化和分化；合適的密度的時(shí)候就要傳代：細(xì)胞如果過密，接觸抑制作用會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的活力減弱并影響增殖導(dǎo)致老化；使用合適的血清和培養(yǎng)基：不同的干細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基特別是血清的要求不同，所以使用不同的培養(yǎng)用的血清進(jìn)
2016
09-09

大腸桿菌細(xì)胞制備流程
大腸桿菌細(xì)胞制備流程*天：1.將適合菌株(如XL1-Blue,DH5α)置于LB或其他營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上，在37°C下培養(yǎng)2.高溫滅菌大的離心瓶(250-500ml)以備第二天搖瓶用3.準(zhǔn)備幾瓶滅菌水(總量約1.5升)，保存于冷凍室中以備第二天重懸浮細(xì)胞用第二天：4.轉(zhuǎn)移0.2-1ml培養(yǎng)物至裝有500mlLB(或其他營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基)的1-2升搖瓶5.37°C下劇烈振蕩培養(yǎng)2-6小時(shí)6.定時(shí)監(jiān)控OD600值(培養(yǎng)1小時(shí)后每半小時(shí)測(cè)定一次)7.當(dāng)OD600值達(dá)到0.5-1.0時(shí)，從搖床中取出搖瓶
2016
09-07

ELISA試劑盒的組成
ELISA試劑盒的組成完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；（6）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；（7）酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的zui終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。
2016
09-05

做大鼠ELISA試劑盒的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
做大鼠ELISA試劑盒的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)1.正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、大鼠ELISA試劑盒兔血清或BSA等封閉。2.在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，大鼠ELISA試劑盒其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選
2016
09-02

菌株的保存使用
菌株又稱品系,表示任何由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞(即單個(gè)病毒粒子)繁殖而成的純種群體及其后代。因此,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。根據(jù)菌株的定義,菌株實(shí)際上是某一微生物達(dá)到“遺傳性純”的標(biāo)志,一旦菌株發(fā)生變異,均應(yīng)標(biāo)上新的菌株名稱。當(dāng)進(jìn)行菌種保藏、篩選或科學(xué)研究時(shí),在進(jìn)行學(xué)術(shù)交流或發(fā)表論文時(shí),在利用菌種進(jìn)行時(shí),都必須同時(shí)標(biāo)明該菌種及菌株名稱。菌株間在某些特性上存在著或多或少的差異.有一定的編號(hào).如蛋白酶的為枯草桿菌1398，淀粉酶的為枯草桿菌7658，同M屬枯草桿菌，
2016
08-31

培養(yǎng)基主要原料介紹
培養(yǎng)基主要原料介紹蛋白胨是一種外觀呈淡黃色的粉劑，具有肉香的特殊氣息。它作為微生物培養(yǎng)基的主要原料，在抗生素，醫(yī)藥工業(yè)，發(fā)酵工業(yè)，生化制品及微生物學(xué)科研等領(lǐng)域中的用量均很大；不同的生物體需要特定的氨基酸和多肽，因此存在各種蛋白胨，一般來說，用于蛋白胨的蛋白包括動(dòng)物蛋白（酪蛋白、肉類）和植物蛋白（豆類）兩種。蛋白胨當(dāng)中不僅含有豐富的氨基酸，特別是含硫氨基酸較多，而且含有更多的細(xì)菌生長(zhǎng)需要的維生素和其它生長(zhǎng)因子。是生物制藥發(fā)酵及各種培養(yǎng)基制備的基礎(chǔ)原材料。在培養(yǎng)基當(dāng)中它起的主要作用是提供氮源。胰酪蛋
2016
08-31

免疫組化中抗體選擇要求
免疫組化中抗體選擇要求1、一抗選擇要點(diǎn)（1）選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體，單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一特異抗原決定簇結(jié)合，就象地命中目標(biāo)一樣。另一方面，即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中，一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對(duì)小，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)較低；而多克隆抗體特異性稍弱，抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高，但易出現(xiàn)非特異性染色（可以通過封閉等有所避免）。（2）種屬來源。一般家兔來
2016
08-29

如何靈活的挑選ELISA測(cè)試盒
如何靈活的挑選ELISA測(cè)試盒怎樣靈活應(yīng)用ELISA這個(gè)檢測(cè)方法以及怎樣去挑選ELISA測(cè)試盒。ELISA這個(gè)方法的原理，大家都很明白，網(wǎng)上的資料很多。可真正用起來的時(shí)候，偶然間就會(huì)有點(diǎn)犯糊涂，我談一下自己的理解。1、有些客戶會(huì)用OVA（卵清卵白）做一些哮喘，過敏性腸炎的模型，然后會(huì)檢測(cè)粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG，IgE等指標(biāo)。2、NO的檢測(cè)，一般都是采用經(jīng)典的Greiss法，如今市場(chǎng)上竟然有NOELISA試劑盒，真是徹夜未眠也搞不明白。另外還有做氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA的檢測(cè)，我推薦EL
2016
08-26

鑒定血清質(zhì)量
鑒定血清質(zhì)量1．親和性（affinity）是指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強(qiáng)度，常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正／逆向反應(yīng)速度常數(shù)的比值，單位為稀釋度單位（L／mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結(jié)合下降50％；而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)（Kd），其單位為濃度單位（mol／L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，需選用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清。2．特異性（specificity）是指一種抗體識(shí)別相應(yīng)抗原決定簇的
2016
08-24

病理技術(shù)如何解決這些問題
1、首先技術(shù)員要正確認(rèn)識(shí)自己，擺正自己的位置，要自尊，自強(qiáng)，自愛！增強(qiáng)技術(shù)員的自信心，要相信自己能做到，能做的。2、多學(xué)習(xí)理論知識(shí)，多向同行學(xué)習(xí)，學(xué)會(huì)總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，學(xué)會(huì)理論與實(shí)際相結(jié)合，學(xué)會(huì)用腦干活。3、科學(xué)的管理和規(guī)范化操作，是解決質(zhì)量問題的關(guān)鍵。病理技術(shù)很多是憑經(jīng)驗(yàn)工作，由于經(jīng)驗(yàn)的隨意性較大，導(dǎo)致質(zhì)量的不穩(wěn)定性。和接軌，是我們的奮斗目標(biāo)，在這背景下，中華病理學(xué)會(huì)提出了病理技術(shù)規(guī)范化操作。病理技術(shù)有很多小竅門，有的是在犧牲制片質(zhì)量的前提下發(fā)明的，使用者往往自己不知道。每個(gè)地方操作方法不同，導(dǎo)致制片
2016
08-22

豬ELISA試劑盒的操作步驟
豬ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。每孔
2016
08-19

Masson三色染色液產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Masson三色染色液產(chǎn)品簡(jiǎn)介：結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：肔原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維，而肔原纖維(collagenfiber)是分布zui廣、含量zui多的一種纖維。Masson三色染色又稱馬松染色，是結(jié)締組織染色中zui經(jīng)典的一種方法，是肔原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示肔原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高
2016
08-17

血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的鑒別方法及作用您知道嗎？今日，上海恒遠(yuǎn)就為您詳情解說：鑒別方法：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸
2016
08-15

生物制藥領(lǐng)域的不懈探索者
HRP分子中與酶活性無關(guān)的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基，再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發(fā)生自身偶聯(lián)，在標(biāo)記前先用2，4-二硝基氟苯（DNFB）封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結(jié)合反應(yīng)后，再加入硼氫化鈉還原成穩(wěn)定的結(jié)合物。（1）取HRP5mg溶于0.2mol/L，pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中，加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml，室溫下輕微攪拌1h；（2）加入新鮮配置的0.1mol/LNaIO40.5ml，此時(shí)溶液由原棕色變?yōu)槟G色，置4℃放置30mi
2016
08-12

雷帕霉素雙重作用
一種化合物，多種作用雷帕霉素作用廣泛，比如zui初雷帕霉素實(shí)時(shí)被研究作為低毒性抗真菌藥物的，1989年開始把RAPA作為治療器官移植的排斥反應(yīng)的新藥進(jìn)行試用。在大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)雷帕霉素是一種安全有效的新型免疫移植劑后，2000年以來已進(jìn)行大量臨床觀察，試驗(yàn)采用雷帕霉素聯(lián)合MMF或Aza及類固醇與CsA、FK506等做藥效對(duì)比，或者是雷帕霉素聯(lián)合CsA或FK506等藥物以探討聯(lián)合用藥的療效。2010年美國(guó)德克薩斯州大學(xué)的一項(xiàng)研究還顯示，雷帕霉素可用于治療阿爾茨海默癥，該藥物成分也存在于復(fù)活島土壤

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