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化膿性心包炎動物模型2019/01/17

化膿性心包炎動物模型(1)復制方法體重為2.0～2.5kg新西蘭兔，將動物仰臥位固定后，用1％鹽酸普魯卡因局部浸潤麻醉，無菌手術作胸正中切口，橫斷肋骨，牽拉結扎線，顯露心包裸區(qū)。用7號針在劍突下經(jīng)皮向心尖方向刺入心包腔，注入1000000000個/ml青霉素敏感金葡菌溶液或生理鹽水1ml/kg?？p合切口。全部動物于術后21d麻醉放血處死。取心尖部的右室全層心肌3塊，肝、肺組織各1塊，心包1塊作病理學檢查。心包化膿粘連增厚程度的制定標準及量化。按心表面分為四區(qū)：心尖部、左心部(左心房及左心室)，右

皮膚過敏動物模型2019/01/17

皮膚過敏動物模型(1)復制方法體重為200～250g，4～5周齡的白色豚鼠，造模1和8日各進行1次致敏接觸，第15日進行激發(fā)。模型動物皮內注射5％三氯乙烯橄欖油溶液，涂皮誘導濃度為40％，激發(fā)濃度為20％。于激發(fā)后24h觀察和記錄模型動物皮膚反應情況，隨后麻醉動物并采血，無菌取皮膚固定后作常規(guī)組織切片，染色后光鏡下觀察。(2)模型特點模型動物血清總IgG含量明顯升高，大多數(shù)豚鼠皮膚可出現(xiàn)紅斑及水腫反應；鏡下病理組織學觀察結果顯示，模型動物表皮棘細胞層增厚，內毛細血管擴張并可見水腫，同時有嗜酸粒細

皮膚光老化動物模型2019/01/17

由環(huán)境因素引起的皮膚老化稱為時程性老化或自然老化。在環(huán)境因素中又以紫外線的作用大，所以又稱光老化。(1)復制方法BALB/c無毛小鼠按性別飼養(yǎng)于籠盒內，用40W中波紫外線燈管高度為40cm照射。*周隔日照射一次，每次照射2h，后10周每周照射5d，每次2h。總劑量為5.9J/cm2。(2)模型特點實驗小鼠出現(xiàn)皮膚粗糙、紋理加深加寬。光鏡見皮膚明顯增厚。表皮增生伴有角化過度及角化不全；部分區(qū)域呈乳頭樣增生，上皮角下延；皮淺層疏松水腫，毛細血管及纖維母細胞增生，附屬器明顯增生，可見局灶性及彌漫性單核

皮膚壓力潰瘍動物模型2019/01/17

皮膚壓力潰瘍動物模型(1)復制方法8月齡貴州香豬，按30mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉，動物麻醉后取腹臥位固定于手術臺上；動物背部備皮作常規(guī)無菌消毒，于背部兩側作與身體長軸平行長約50mm深達肌層深面的皮膚切口，然后采用自制的壓傷裝置，置入鈦板，在皮膚表面以螺釘為中心自下而上分別安置另一鈦板、彈簧、第三鈦板并固定于鈦板，縫合皮膚切口。調節(jié)加力螺母產(chǎn)生不同壓力，通過控制受壓面積的壓力及時間模擬皮膚組織不同程度的壓力潰瘍創(chuàng)面，并考察創(chuàng)面愈合情況及收縮率。術后動物常規(guī)條件下飼養(yǎng)，

帶血管胸腺移植動物模型2019/01/17

帶血管胸腺移植動物模型(1)復制方法供體組大鼠體重150～180g，受體組大鼠體重220～250g，按40mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉，麻醉后動物仰臥固定于手術板上，常規(guī)消毒腹部手術區(qū)域并去毛。供體大鼠手術：作肋弓下1.0cm橫行切口人腹，經(jīng)門靜脈內注入肝素鈉250U。切開膈肌，沿胸廓兩側向上翻起。游離升主動脈至降主動脈并分離主動脈弓上3條分支，結扎兩側頸總動脈及弓下血管分支，在兩側鎖骨下動脈分叉點處結扎切斷。于主動脈瓣遠端結扎升主動脈，向遠端灌注乳酸林格氏液10ml，切

溶血性貧血動物模型2019/01/17

溶血性貧血動物模型溶血性貧血是由于紅細胞破壞增多、增速，超過造血代償能力時所發(fā)生的一組貧血。紅細胞的平均壽命為15～20d，紅細胞破壞速度遠遠超過骨髓的代償潛力時，則出現(xiàn)貧血。溶血性貧血發(fā)病的基本問題是紅細胞壽命縮短，易于破壞。主要通過以下三方面的機制：紅細胞膜的異常變化；血紅蛋白的異常；機械性因素。1乙酰苯肼誘發(fā)的溶血性貧血大鼠模型(1)復制方法體重為180～250g的雄性大鼠，大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水和進食。分別于造模的1,4,7日經(jīng)腹腔注射2％乙酰苯肼(Acetylphenylhydrazi

急性脊髓損傷動物模型2019/01/16

急性脊髓損傷動物模型1脊髓背側損傷模型(1)復制方法Allen于1911年采用重物墜落撞擊脊髓背側，開創(chuàng)了脊髓損傷的標準化實驗研究。其方法是背部正中切開，切除椎板，顯露脊髓硬膜。將重量重物從某一高度自由墜落，打擊于脊髓上，致脊髓損傷，其沖擊量以勢能克厘米gel(gram-cmforce)表示。(2)模型特點WD法的優(yōu)點為：①與人類脊髓損傷的性質相近。②脊髓損傷節(jié)段可以通過手術限度，撞擊力可以定量。③硬脊膜仍完整，可防止結締組織、組織間液或其他外源成分侵入脊髓損傷區(qū)。WD法也存在不足之處：①尚不能

（EAE）動物模型2019/01/16

反應性腦脊髓炎(EAE)動物模型反應性腦脊髓炎動物的癥狀、病理改變及免疫學特征與人類的脫髓鞘疾病如：多發(fā)性硬化癥(multiplesclerosis,MS)、急性播散性腦脊髓炎相似，常被看作是這類疾病的動物模型。Rivers等于1933年采用多次肌肉注射兔腦提取物的方法，次成功建立了反應腦脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis,EAE)模型。隨后Morgan和Kabat又把福氏佐劑(Freundadjuvant,FA)引入到EAE的建立過程中，即把抗原

大鼠不同程度腦損傷模型2019/01/16

大鼠不同程度腦損傷模型(1)復制方法健康雄性大鼠，體重為230～260g。采用改進的Feeney自由落體硬膜外撞擊方法。損傷裝置由底板、固定支架、垂直導桿、下落擊錘和聚乙烯撞擊圓錐組成。撞擊圓錐頭端直徑為4mm、高為2.5mm。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)麻醉。將其頭部固定于立體定向儀上，剪去頂部毛發(fā)，手術區(qū)域皮膚消毒。沿中線左側切開頭皮，分離骨膜，用牙科鉆于中線旁2mm、緊挨冠狀縫后開一直徑5mm的圓形窗，硬

高質量RNA提取條件之二2019/01/16

1.選擇好的RNA分離方法現(xiàn)有眾多的RNA分離方法也許令人難以取舍。目前簡單也是安全的方法是柱式分離，如RNApure因為操作簡單，時間短，純度高而受到大家的喜愛，RNApure不需要DNA酶消化DNA，節(jié)省了時間，避免RNA的降解，從而提高了產(chǎn)量；相對非柱式分離（如TRIZOL），去除蛋白及其他雜質干凈，提高了純度，對于細胞、組織、一般植物均非常適合。植物RNA的提取比較難抉擇，植物RNA提取受酚、多糖、蛋白雜質、次生代謝物含量的影響，一般用TRIZOL提取純度不高，而且很多植物用TRIZOL

科研中的miRNA研究方法總結2019/01/16

科研中的miRNA研究方法總結microRNA(miRNA)是一類長度在22nt左右的內源非編碼小RNA，廣泛存在于動物、植物、病毒等多種有機體中。1993年，Lee等人在秀麗新小桿線蟲(C.elegans)中發(fā)現(xiàn)了控制著線蟲時序性發(fā)育的lin-4。2000年，Reinhart等發(fā)現(xiàn)了另一個具有轉錄后調節(jié)功能的小分子RNA：let-7。隨后的幾年時間里，許多研究人員相繼發(fā)現(xiàn)了這類RNA，并將這些具有時空表達特異性的非編碼小分子RNA命名為microRNA(miRNA)。從長的初級miRNA(pr

科研有六重境界，你到第幾重了？2019/01/16

臨淵羨魚階組里的前輩們看起來個個都是牛人，各有各的事業(yè)，可是喂~誰來提挈小生則個！導師：“在咱們這個組的大框架下自己找個坑填上去~”——坑在哪？師姐：“問我問題之前不能先自己查一下嘛？你這個問題明明有現(xiàn)成答案呀~”——上哪查師兄：“去去去，小孩子一邊看文獻去！”——看不懂~_看什么文獻，怎么看？專業(yè)術語不懂怎么辦？好吧，大不了啃字典，先把組里發(fā)過的文章都過一遍好了。終于有一天組會討論時，哇我居然聽懂了躍躍欲試階已經(jīng)能相當熟練地在知網(wǎng)、NCBI等數(shù)據(jù)庫上查到自己想要的信息了，儀器不用會時也會查說明

八臂迷宮實驗2019/01/16

一、八臂迷宮實驗原理八臂迷宮（8-ArmMaze）用來檢測藥物或大腦受損狀態(tài)下學習和記憶方面的表現(xiàn)，它由八個相同的臂組成，這些臂從一個平臺放射出來，所以又被稱為放射迷宮（RadialMaze）。每個臂盡頭有食物提供裝置，根據(jù)分析動物取食的策略即進入每臂的次數(shù)、時間、正確次數(shù)、錯誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反映出實驗動物的空間記憶能力。相對而言，八臂迷宮操作簡便、可行，而且能區(qū)分短期的工作記憶和長期的參考記憶，現(xiàn)已被用于學習記憶認知實驗功能評價。二、八臂迷宮實驗方法及應用1)動物適應實驗環(huán)境1周后，稱重

Y迷宮實驗2019/01/16

一、Y迷宮實驗（Y-Maze）原理Y-迷宮由DelluF等發(fā)明，被應用于功能減退、趨向性、空間工作記憶等研究領域。Y迷宮主要用于研究嚙齒類動空間工作記憶，其是利用實驗動物對新異環(huán)境探索的天性，由于動物每次轉換探索方向時都需要記住前一次探索過的方向，因此Y型迷宮實驗能夠有效地測定動物的空間工作能力。二、Y迷宮實驗介紹Y形迷宮（Ymaze）即為三等分輻射式迷宮，由三個支臂一個連接區(qū)組成，三臂相互夾角為120°，每臂末部鋪以食物槽，用以盛放食物。各臂可依次分為起步區(qū)、錯誤臂以及正確臂。一般將動物經(jīng)訓練

曠場實驗2019/01/16

一、曠場實驗介紹曠場實驗是利用動物對新開闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動，在區(qū)域活動較少，但動物的探究特性又促使其產(chǎn)生在區(qū)域活動的動機，也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。藥物可以明顯增加自主的活動而減少探究行為，劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動。二、曠場實驗原理該實驗（openfieldtest)又稱敞箱實驗，是評價實驗動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實驗動物在新奇環(huán)境之中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時間等，反應實驗動物在陌生環(huán)境中的自主行為與探究行為，以尿便次

采用D-半乳糖誘導白內障模型2019/01/16

(1)復制方法將D-半乳糖用生理鹽水配制成50％注射液，常規(guī)滅菌后待用；復方托品酰胺滴眼劑供鏡檢前擴瞳用。用3周齡體重25g左右大鼠，經(jīng)復方托品酰胺滴眼劑散瞳后，裂隙燈檢查晶狀體透明。造模大鼠均采用常規(guī)消毒，然后于頸背部每日經(jīng)皮下按30ml/kg體重的劑量注射50％半乳糖，每天1次，連續(xù)30d。于次注射后第7,14,21,30日分別以復方托品酰胺滴眼劑散瞳后用裂隙燈觀察晶狀體的動態(tài)變化。(2)模型特點注射D-半乳糖7d后，大鼠開始出現(xiàn)白內障早期改變，即晶狀體周邊皮質出現(xiàn)空泡；給藥14d、21d及

腎虛黃體抑制動物流產(chǎn)模型2019/01/16

(1)復制方法雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配，次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進食。妊娠1～10日，孕鼠每日按450mg/kg體重的劑量灌服羥基脲以造成腎虛模型，在妊娠10日按3.75mg/kg體重的劑量灌注米非司酮以造成流產(chǎn)模型。腎虛模型大鼠妊娠后出現(xiàn)納差、活動減少、反應遲鈍、體重呈負增長。孕鼠體內過氧化物歧化酶(SOD)減少，蛻膜孕激素受體表達下降。(2)模型特點羥基脲是核苷酸還原酶抑制劑，使用后使大鼠SOD明顯減少。有研究提示自

脾虛黃體抑制動物流產(chǎn)模型2019/01/16

(1)復制方法雌性成年大鼠與雄性大鼠隔夜同籠飼養(yǎng)交配，次日早晨觀察交配后陰栓脫落情況，將發(fā)現(xiàn)陰栓日定為妊娠1日，然后單籠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進食。妊娠1～10日，孕鼠每日按0.15mg/kg體重的劑量肌注利血平建立脾虛模型，在妊娠第10日按3.75mg/kg體重的劑量經(jīng)口灌注米非司酮以造成流產(chǎn)模型。脾虛大鼠造模第5日即出現(xiàn)納差、嗜睡、便軟、肛門污穢等脾虛癥候，形體消瘦，體重減輕，流產(chǎn)率增加。部分流產(chǎn)子宮內見淤血，胎盤不完整；流產(chǎn)子宮呈竹節(jié)樣改變。光鏡下，流產(chǎn)模型子宮蛻膜組織壞死出血。卵巢黃體直徑

自身免疫性內耳病動物模型2019/01/16

自身免疫性內耳病動物模型(1)復制方法取4周齡近交系雄性C57BL/6小鼠，以及體重為300～400g，經(jīng)檢查耳郭反射正常，無中耳感染的豚鼠。豚鼠麻醉后心臟灌注，斷頭取顳骨，在4℃無菌含1mg/L抑肽酶的10mmol/LTris緩沖液中剝離全部內耳膜性組織，勻漿。勻漿液離心，取上清液-20℃凍存；沉淀在含0.5％十二烷基硫酸鈉、0.5％β-巰基乙醇、1％甘油、2mmol/L苯甲丨基丨磺丨酰丨氟、10mmol/LN-己基順丁烯二甲亞胺的50mmol/LTris緩沖液中勻漿，計算蛋白含量，-80℃分

神經(jīng)性耳聾動物模型2019/01/16

神經(jīng)性耳聾動物模型(1)復制方法健康普通級雜色豚鼠，雌雄不拘，體重為400～500g，耳郭反射靈敏.耳鏡檢查排除外耳、中耳炎癥。方法①：G-菌內毒素脂多糖1g/L,顯微鏡下實驗組每只動物經(jīng)雙耳鼓膜注入大腸桿菌脂多糖；對照組注入等量生理鹽水做對照。方法②：經(jīng)肌肉注射卡那霉素(或慶大霉素)400mg/kg體重，1次/d，共7～10d。分別檢查造模前和造模后1d、10d耳郭聽力反射和腦干誘發(fā)電位。處死動物，解剖耳顳部組織，從圓窗及蝸尖分別灌注1％硝酸銀或3％戊二醛固定，作耳蝸鋪片及掃描電鏡觀察。(2)