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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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比對試驗(yàn)中對樣品的標(biāo)準(zhǔn)要求2023/08/04
1、樣品要求:用于比對試驗(yàn)的樣品需要滿足以下要求:1)樣品用于比對試驗(yàn)的樣品需要滿足以下要求:1)樣品有充分的均勻性和穩(wěn)定性,在適合的條件下保存;2)樣品的數(shù)量應(yīng)能夠滿足所有測試項(xiàng)目的要求,必要時(shí)要留出附加測試的樣品;3)樣品的制備應(yīng)有文件化處理程序,在使用前應(yīng)對樣品進(jìn)行確認(rèn)。2、樣品的制備和準(zhǔn)備:比對試驗(yàn)的樣品可分為陰性樣品和陽性樣品。對于陽性樣品,可通過以下途徑獲得:1)自制樣品在對樣品制備方式了解的情況下,實(shí)驗(yàn)室可以利用自有的儀器設(shè)備進(jìn)行簡單樣品的制備,也可以合作制備。無論采用哪種制備方式
樣品的采集原則及檢測方法2023/08/04
采樣的基本原則采樣的基本原則是:為了掌握總體物料的成分、性能、狀態(tài)等特性,往往需要按一定方案從總體物料中采得能代表總體物料的樣品,通過對樣品的檢測了解總體物料的情況。因此,被采得的樣品應(yīng)具有充分的代表性。有時(shí)采樣的費(fèi)用較高,在設(shè)計(jì)采樣方案時(shí)可以適當(dāng)兼顧采樣誤差和費(fèi)用。但首先是要滿足對采樣誤差的要求一、保證采樣器具的無菌性1.玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌,保證恒溫、時(shí)間足夠(但不可時(shí)間過長,導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報(bào)廢)。2.取樣筐:使用前要用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒3.取樣勺、濃奶取樣提子:要保
pH計(jì)和pH試紙測試結(jié)果差距大的原因總結(jié)2023/08/03
曾經(jīng)有人做過這樣一些實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)一:強(qiáng)電解質(zhì)溶液的pH試驗(yàn)——在50mL去離子水中加入1.6g的Na2SO4,用NaOH和H2SO4調(diào)節(jié)pH,結(jié)果……實(shí)驗(yàn)二:中濃度緩沖渡pH的試驗(yàn)——250mL去離子水中加入pH6.86標(biāo)準(zhǔn)混合磷酸鹽2.5g,用NaOH和H2S04調(diào)節(jié)pH,結(jié)果……實(shí)驗(yàn)三:多種緩沖劑混合溶液的pH試驗(yàn)——250mL去離子水中加入pH4.008標(biāo)準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀1.25g,pH6.86標(biāo)準(zhǔn)混合磷酸鹽0.85g及pH9.18標(biāo)準(zhǔn)四硼酸鈉0.92g,用NaOH和H2s04調(diào)節(jié)pH。看了
標(biāo)準(zhǔn)曲線的正確繪制方法2023/08/03
分析檢測中繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線目的是可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出待測物質(zhì)的含量,所以標(biāo)曲的制定是實(shí)驗(yàn)室工作中bi不可少的工作。做標(biāo)準(zhǔn)曲線真的那么簡單?你所做的標(biāo)曲真的做好了嗎?導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲的原因是啥?RSD值、線性相關(guān)系數(shù)和線性方程如何?線性好與不好分別由于哪些原因造成的?是儀器、標(biāo)液,還是配制的問題?接下來遠(yuǎn)慕生物帶你來找找原因!前期測定時(shí)注意:1、儀器校驗(yàn)好。2、移取液體體積要精確,保證迅速準(zhǔn)確,盡可能用一根移液管;為減小人為誤差,同一種液體要一個(gè)人操作。3、保證標(biāo)準(zhǔn)品的純度,所用標(biāo)準(zhǔn)品最好是新打開的,
【微生物檢測】培養(yǎng)基的制備流程2023/08/02
培養(yǎng)基的質(zhì)量是微生物實(shí)驗(yàn)室檢測工作的基礎(chǔ),事關(guān)檢測工作的準(zhǔn)確性、可靠性,在微生物實(shí)驗(yàn)室檢測工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量問題,都將導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果科學(xué)性、客觀性的偏離。因此,加強(qiáng)培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制,認(rèn)真地做好培養(yǎng)基的質(zhì)控工作,不斷完善和提高培養(yǎng)基的質(zhì)控水平,才能為微生物檢測實(shí)驗(yàn)室提供高質(zhì)量的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的制備流程1.培養(yǎng)基用水培養(yǎng)基制備用水應(yīng)使用電阻率不小于30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質(zhì)的水,最好不使用離子交換器生產(chǎn)的去離子水。2.稱量稱量時(shí)要用專用的角匙,避免交叉污染而影
關(guān)于倒平板、劃平板、涂布操作流程2023/08/02
一、無菌準(zhǔn)備:1、提前1個(gè)小時(shí)打開無菌室紫外燈消毒滅菌、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒;2、將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種的用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌;3、所有無菌操作都需在酒精燈旁操作。二、培養(yǎng)基配置:1、LB肉湯:肉湯粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸餾水;.2、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:瓊脂培養(yǎng)基粉300g、5g葡萄糖、1000ml蒸餾水。三、倒平板操作:1、將滅菌過的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶,使瓶口迅速通過火焰;2、用左手將培養(yǎng)皿打開-條稍大于
血清IgG的分離制備實(shí)驗(yàn)—鹽析法2023/08/01
實(shí)驗(yàn)原理IgG是免疫球蛋白(Immunoglobulin,簡稱IgG)的主要成分之一,分子量約為15萬~16萬,沉降生活費(fèi)數(shù)約為7s。IgG是動(dòng)物和人體血漿的重要成分之一。血漿蛋白質(zhì)的成分多達(dá)70余種,要從血漿中分離出IgG,首先要進(jìn)行盡可能除去其他蛋白質(zhì)成分的粗分離程序,使IgG在樣品中比例大為增高,然后再純化而獲得IgG。鹽析法是粗分離蛋白質(zhì)的重要方法之一。許多蛋白質(zhì)在純水或低鹽溶液中溶解度較低,若稍加一些無機(jī)鹽則溶解度增加,這種現(xiàn)象稱為“鹽溶”(Saltingin)。而當(dāng)鹽濃度繼續(xù)增加到某
五種蛋白質(zhì)含量測定方法介紹2023/08/01
蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ),沒有蛋白質(zhì)就沒有生命。蛋白質(zhì)主要用于維持、生長、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白質(zhì)含量的檢測成為一項(xiàng)日常性且必需性的工作。蛋白質(zhì)含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。接下來遠(yuǎn)慕生物帶你一一了解。蛋白質(zhì)含量測定的幾種方法1.紫外分光光度法蛋白質(zhì)分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質(zhì)對280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范圍內(nèi),蛋白質(zhì)溶液的吸光值與其濃度成正比,可作定量測定。該法操作簡單、快捷,并且測定的樣品可以回
胎牛血清的作用以及標(biāo)準(zhǔn)要求2023/07/31
對于研究細(xì)胞的科學(xué)人士來說,血清都不會(huì)陌生,其中胎牛血清是實(shí)驗(yàn)操作的??汀R话愣?,胎牛血清是指懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未wan全的胎牛心臟穿刺采血后,通過一系列工藝處理最終獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育wan全這些因子自動(dòng)消失。胎牛血清的作用胎牛血清具有極為重要的作用,其包括:1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.
細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)污染的預(yù)防措施2023/07/31
防止細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)污染的方法如下:1、從培養(yǎng)箱取放細(xì)胞前,用酒精清潔雙手(或手套),盡量縮短開門時(shí)間和減少開門次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精揮發(fā)后再放入,以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。2、操作的時(shí)候防護(hù)服、口罩、手套缺一不可。操作前,準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)所需物品,以減少走動(dòng),物品需有序擺放在超凈臺(tái)觸手可及的地方,同時(shí)空留足夠操作空間。3、操作時(shí),試劑不用盡量及時(shí)蓋上蓋子,移至操作區(qū)外圍,盡量不要從開口容器上經(jīng)過。4、使用移液槍時(shí),將容器傾斜以便于移液,切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁。一
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)各種添加物的具體作用介紹2023/07/28
細(xì)胞培養(yǎng)的秘密法寶——添加物,通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清,以維持細(xì)胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1subclone14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細(xì)胞加入量會(huì)有差異,需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。胰島素(Insulin)作用廣泛,包括調(diào)節(jié)脂肪和蛋白質(zhì)的代謝以及促進(jìn)細(xì)胞生長等。胰島素功能的發(fā)揮源于其對細(xì)
細(xì)胞分裂與細(xì)胞分化的區(qū)別2023/07/28
細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化是多細(xì)胞生物個(gè)體發(fā)育過程中的兩個(gè)重要事件,兩者之間有密切的關(guān)系。通常細(xì)胞在分裂的基礎(chǔ)上進(jìn)行分化,而早期胚胎細(xì)胞的不對稱分裂所引起的細(xì)胞質(zhì)中轉(zhuǎn)錄因子的差異制約著細(xì)胞分化方向和進(jìn)程。細(xì)胞分化發(fā)生于細(xì)胞分裂的G1期,在早期胚胎發(fā)育階段特別是卵裂過程中,細(xì)胞快速分裂,G1期很短或幾乎沒有G1期,此時(shí)細(xì)胞分化減慢。細(xì)胞分裂旺盛時(shí)細(xì)胞分化變緩,分化較高時(shí)分裂速度減慢是個(gè)體生長發(fā)育的一般規(guī)律。例如,哺乳動(dòng)物的表皮角質(zhì)層細(xì)胞等終末細(xì)胞分化程度較高,分裂頻率明顯減慢,而高度分化的細(xì)胞,如神經(jīng)元和
凝膠遷移實(shí)驗(yàn)(EMSA)看這篇就夠了!2023/07/27
概念EMSA稱凝聚阻滯實(shí)驗(yàn)或凝膠電泳遷移率檢測,是一種用于研究轉(zhuǎn)錄因子和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),能對各類轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合活性進(jìn)行定性和半定量分析,是一項(xiàng)研究細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)技術(shù)。這一技術(shù)最初用于研究DNA結(jié)合蛋白,目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。原理EMSA主要基于蛋白-探針復(fù)合物在在凝膠電泳過程中遷移較慢的原理。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特異性和非特異性探針,當(dāng)核酸探針與樣本蛋白混合孵育時(shí),樣本中可以與核酸探針結(jié)合的蛋白質(zhì)與探針形成蛋白-探針復(fù)合物;這種
免疫核糖核酸的制備及鑒定實(shí)驗(yàn)2023/07/27
實(shí)驗(yàn)概要本實(shí)驗(yàn)通過免疫動(dòng)物,制備了免疫核糖核酸(iRNA),并進(jìn)行了鑒定。實(shí)驗(yàn)原理iRNA是用某種抗原免疫動(dòng)物后,從免疫動(dòng)物的免疫活性細(xì)胞中提取出來的RNA。它具有傳遞相應(yīng)抗原特異性免疫信息的能力,因而注入體內(nèi)后,可發(fā)揮對該抗原的免疫清除作用。iRNA的免疫學(xué)作用機(jī)理目前尚無定論,一般認(rèn)為iRNA具有直接模板作用,即iRNA以mRNA的形式在受體細(xì)胞中起模板作用,從而合成與免疫反應(yīng)有關(guān)的蛋白質(zhì),使正常非致敏的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)變成致敏淋巴細(xì)胞。另外,也有人認(rèn)為iRNA具有逆轉(zhuǎn)錄作用、免疫調(diào)控作用及“超抗
抗體保存注意事項(xiàng)和保存條件2023/07/26
抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。以abcam抗體保存方法為主,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分的抗體產(chǎn)品!1.收到抗體后請務(wù)必在12000rpm離心1-5min后再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存!質(zhì)優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管,只有在12000rpm離心1-5min才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會(huì)導(dǎo)致離心不wan全,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!2.對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存
試驗(yàn)樣品稀釋倍數(shù)的計(jì)算方法了解一下2023/07/26
稀釋是指對現(xiàn)有溶液加入更多溶劑而使其濃度減小的過程。在稀釋后溶液的濃度減小,但溶質(zhì)的總量不變。例如將一摩爾(約58.5克)的食鹽(溶質(zhì))溶在一升的水(溶劑)中,溶液的體積摩爾濃度為1M,若再加入一升的水,溶液的體積摩爾濃度變?yōu)?.5M,但溶液食鹽的總量仍為一摩爾。稀釋倍數(shù)的公式稀釋倍數(shù)就是稀釋前溶液濃度除以稀釋后的溶液濃度所得的商。要想知道如何配置稀釋液,需要知道你原液的濃度。稀釋倍數(shù)=原液濃度/(原液濃度×移取體積/定容體積)例如,你有一瓶100mg/L的溶液,要稀釋3倍、5倍、10倍、20倍
WB實(shí)驗(yàn)中——很難不愛預(yù)制膠!2023/07/25
相信從事生命科學(xué)研究領(lǐng)域的小伙伴對于WesternBlot一定不陌生吧,這是一個(gè)步驟繁多的常用基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),其中電泳過程至關(guān)重要,稍有不慎我們就只能對著「微笑線」和「皺眉線」嘆氣,而質(zhì)量好的電泳能讓目的條帶整齊,結(jié)果圖讓人眼前一亮。電泳的支持介質(zhì)為聚丙烯酰胺凝膠,該凝膠的聚合則由丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺單體在自由基的催化下完成。丙烯酰胺介質(zhì)為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),小孔尺寸與生物大分子具有相似的結(jié)構(gòu),帶負(fù)電荷的蛋白,在電場的驅(qū)動(dòng)下從電極負(fù)極向正極遷移。分子量大的蛋白滯留在上方,小分子蛋白繼續(xù)遷移,從而分離不同分子
【細(xì)胞培養(yǎng)】還有誰不會(huì)細(xì)胞爬片制備?2023/07/25
細(xì)胞爬片是一種將細(xì)胞培養(yǎng)在玻璃或塑料表面上,使其附著并擴(kuò)展的技術(shù)。這種技術(shù)可以用于觀察細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞-細(xì)胞相互作用等。我們在做免疫熒光(IF),激光共聚焦(Confocal),凋亡檢測(TUNEL)時(shí),免不了要制備細(xì)胞爬片,爬片質(zhì)量wan全決定了最后拍照的質(zhì)量以及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)性。今天,遠(yuǎn)慕生物就教大家如何制備好的細(xì)胞爬片。爬片的準(zhǔn)備1.爬片可用一般的蓋玻片,也可用專用細(xì)胞爬片(價(jià)格比較昂貴)但是細(xì)胞貼壁牢固,拍出照片效果好;2.可根據(jù)自己的需要,到染色時(shí)再將之切開,這樣既保證了細(xì)胞均
什么是酶的抑制劑?酶抑制劑的作用和抑制原理說明2023/07/24
什么是酶的抑制劑?酶反應(yīng)抑制劑,簡稱“抑制劑”。一類能降低酶促反應(yīng)速率的物質(zhì)。會(huì)使酶的必需基團(tuán)或活性部位的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而導(dǎo)致酶活性降低或喪失。按與酶結(jié)合的強(qiáng)度和方式,分可逆抑制劑和不可逆抑制劑。和酶分子以非共價(jià)結(jié)合而起抑制作用,并可用物理方法將其除去而使酶活力恢復(fù)者,稱“可逆抑制劑”;反之,稱“不可逆抑制劑”。在生物體內(nèi)起到調(diào)節(jié)、控制代謝速率的作用。利用抑制劑作為酶的修飾劑則可獲得有關(guān)活性部位結(jié)構(gòu)及反應(yīng)機(jī)理等信息。酶的抑制劑分類酶的抑制劑分為不可逆抑制劑和可逆抑制劑兩大類。不可逆抑制劑
蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析方法及概括說明2023/07/24
一、蛋白質(zhì)組學(xué)概述“蛋白質(zhì)組”一詞的英文是Proteome,它是proteins和genome兩個(gè)詞的組合,意思是proteinsexpressedbyagenome,即為基因組表達(dá)的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組的概念是1994年由Wilkins首先提出,并在1995年7月的“Electrophoresis”上發(fā)表,指“一個(gè)細(xì)胞或一種組織基因組所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)”,蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)是從整體水平上研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成及其活動(dòng)規(guī)律。與基因固定不變的基因組不同,蛋白質(zhì)組作為相應(yīng)基因組所表達(dá)的產(chǎn)
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