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滴定分析法的滴定操作要點(diǎn)介紹2023/07/07: a滴定管在裝滿滴定液后，管外壁的溶液要擦干，以免流下或溶液揮發(fā)而使管內(nèi)溶液降溫（在夏季影響尤大）。手持滴定管時(shí)，也要避免手心緊握裝有溶液部分的管壁，以免手溫高于室溫（尤其在冬季）而使溶液的體積膨脹（特別是在非水溶液滴定時(shí)），造成讀數(shù)誤差。b使用酸式滴定管時(shí)，應(yīng)將滴定管固定在滴定管夾上，活塞柄向右，左手從中間向右伸出，拇指在管前，食指及中指在管后，三指平行地輕輕拿住活塞柄，無(wú)名指及小指向手心彎曲，食指及中指由下向上頂住活塞柄一端，拇指在上面配合動(dòng)作。在轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，中指及食指不要伸直，應(yīng)該微微彎曲，輕輕

ATCC菌株是什么？怎樣采購(gòu)ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株？2023/07/07: ATCC是美國(guó)的一個(gè)微生物菌株保藏中心。每種已經(jīng)定名的細(xì)菌都會(huì)有一個(gè)模式菌株,一般就是該種最早發(fā)現(xiàn)的那株菌株,稱為標(biāo)準(zhǔn)菌株,用來(lái)作為和其他細(xì)菌之間比較的對(duì)照物。新種鑒定的時(shí)候作為參比的實(shí)驗(yàn)菌株就必須是標(biāo)準(zhǔn)菌株。細(xì)菌（學(xué)名：Bacteria）是指生物的主要類群之一，屬于細(xì)菌域。也是所有生物中數(shù)量最多的一類，據(jù)估計(jì)，其總數(shù)約有5×10^30個(gè)。細(xì)菌的形狀相當(dāng)多樣，主要有球狀、桿狀，以及螺旋狀。細(xì)菌也對(duì)人類活動(dòng)有很大的影響。一方面，細(xì)菌是許多疾病的病原體，可以通過(guò)各種方式，如接觸、消化道、呼吸道、昆蟲(chóng)

NK細(xì)胞和K細(xì)胞的不同點(diǎn)分析2023/07/06: NK細(xì)胞和K細(xì)胞的不同點(diǎn)：1、數(shù)量不同K細(xì)胞占血液中淋巴細(xì)胞總數(shù)的5％～7％，NK細(xì)胞占血中淋巴細(xì)胞總數(shù)的2％～5％。2。免疫殺傷方式不同K細(xì)胞必須在抗體協(xié)助下才能具有免疫殺傷作用,NK細(xì)胞不需抗原激活,更不需抗體的協(xié)助,它可直接殺傷靶細(xì)胞。3、細(xì)胞體積不同K細(xì)胞體積略大,是中型淋巴細(xì)胞,其直徑約為9～12μm。NK細(xì)胞是大淋巴細(xì)胞,平均直徑為12～15μm,胞質(zhì)較多,在胞質(zhì)內(nèi)有許多大小不等的嗜天青顆粒。4、免疫性質(zhì)不同K細(xì)胞主要攻擊比微生物大的靶細(xì)胞,可以是病毒感染的細(xì)胞,如慢性活動(dòng)性肝炎中的

生物菌種凍干保存步驟介紹2023/07/06: 凍干機(jī)適用于大多數(shù)細(xì)菌、放線菌、病毒、噬菌體、立克次體、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏，但不適于霉菌的菌絲型、菇類、藻類和原蟲(chóng)等。生物菌種凍干保存步驟，其操作流程如下：1、安瓿管準(zhǔn)備安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時(shí)，先用2%鹽酸浸泡過(guò)夜，自來(lái)水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性，干燥后、貼上標(biāo)簽，標(biāo)上菌號(hào)及時(shí)間，加入脫脂棉塞后，121℃下高壓滅菌15-20分鐘，備用。2、保護(hù)劑的選擇和準(zhǔn)備保護(hù)劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護(hù)劑時(shí)，應(yīng)注意其濃度及pH值，以及滅菌方法。如血清，可用過(guò)濾滅菌

配制微生物培養(yǎng)基的基本需求2023/07/05: 配置微生物培養(yǎng)基需要：1、根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2、注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比，保持合適滲透壓。3、將培養(yǎng)基的pH控制在適宜的范圍之內(nèi)，以利于不同類型微生物的生長(zhǎng)繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。4、要注意各種原料的配比，每種培養(yǎng)基的配比合適的配比，可以按照老師的要求去做。5、如需要加熱的時(shí)候注意時(shí)間的把握。步驟：(一)準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。(二)校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)

關(guān)于質(zhì)控菌株的基本分類及特點(diǎn)簡(jiǎn)介2023/07/05: 質(zhì)控菌株本質(zhì)上是標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)衍生產(chǎn)品，其應(yīng)有可靠的溯源證明追溯至其使用的標(biāo)準(zhǔn)菌株來(lái)源，在微生物實(shí)驗(yàn)室僅可作為工作菌株進(jìn)行使用，在使用前也應(yīng)進(jìn)行特性和純度的確認(rèn)。質(zhì)控定量菌株使用起來(lái)非常方便，基本就是用無(wú)菌水復(fù)溶帶菌小球，震蕩后即可或在其允許的存放條件及時(shí)間內(nèi)使用。自從2015版藥典生效后，質(zhì)控菌株這一標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)衍生物慢慢熱了起來(lái)，原來(lái)的微生物實(shí)驗(yàn)室，多數(shù)使用CMCC菌株，因此基本購(gòu)買(mǎi)中檢所的0代標(biāo)準(zhǔn)菌株制成1代標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株然后再制成工作菌株進(jìn)行使用，或購(gòu)買(mǎi)地方所制備的2-3代商業(yè)衍生物作為

細(xì)胞凍存液的原理及配制說(shuō)明2023/07/04: 細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以zui大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中，及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分

從凍存的細(xì)胞提取RNA操作步驟2023/07/04: 從凍存的細(xì)胞提取RNA1).將凍存管從液氮或冰箱中取出；2).不待細(xì)胞溶解，將Trizol500ul-1ml直接放入凍存管中，此時(shí)Trizol會(huì)凍成冰狀；3).將凍存管緩慢融化，并用加樣器吹打混勻；4).將細(xì)胞裂解液移至Eppendorf管中，16000′g離心1min，吸出管底絮狀沉淀;注釋：該步驟并非必要，多數(shù)Protocol省略該步驟，但加入該步中能明顯提高RNA的質(zhì)量；注意不能離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，否則沉淀難以吸出，將200ul黃槍頭尖部切去0.5cm操作；5).加入1/5體積的氯仿（約200u

滴定分析法的標(biāo)準(zhǔn)溶液制備要求2023/07/03: 制備要求滴定分析用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備，一般要求的內(nèi)容，依據(jù)GB/601-2002中的12條規(guī)定：1、試劑純度：分析純以上：2、實(shí)驗(yàn)用水：至少應(yīng)符合GB/T6682中三級(jí)水的規(guī)格；3、配制標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)的溫度：是指20℃時(shí)的溫度；4、分析天平、滴定管、容量瓶和移液管，均需定期校正；5、標(biāo)定使用時(shí)的滴定速度，一般應(yīng)保持在6~8ml/min；6、稱量基準(zhǔn)試劑的質(zhì)量：質(zhì)量小于0.5g，按精確至0.01mg稱量；質(zhì)量大于0.5g，按精確至0.1mg稱量；7、制備時(shí)的濃度值范圍：應(yīng)在規(guī)定濃度值的±5%范圍以內(nèi)；8、

怎樣給標(biāo)準(zhǔn)溶液“續(xù)命”？2023/07/03: 首先，請(qǐng)確保標(biāo)液按證書(shū)上建議的保存條件進(jìn)行保存，保證化合物的穩(wěn)定。溶劑揮發(fā)、化合物分解等各種因素會(huì)使標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度標(biāo)準(zhǔn)值發(fā)生改變，造成后續(xù)使用時(shí)定值不準(zhǔn)。因此遠(yuǎn)慕生物建議：1、標(biāo)液原液原則上不建議多次或者長(zhǎng)期使用，最好是一次性配制成儲(chǔ)備液。如需多次或長(zhǎng)期使用，請(qǐng)分裝成可供單次使用的包裝、在證書(shū)條件下保存，最重要的是，盡快用完！2、貯備液、工作液分裝成可供單次使用的包裝、在證書(shū)條件下保存為宜；3、化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的化合物，工作溶液現(xiàn)配現(xiàn)用；4、分裝需使用密封性好、化學(xué)穩(wěn)定性好的儲(chǔ)存瓶或進(jìn)樣瓶：●化合

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）詳細(xì)實(shí)驗(yàn)步驟2023/06/30: 一、準(zhǔn)備工作1、實(shí)驗(yàn)器具與材料：（1）移液槍：200ul、10ul（2）吸頭：200ul、20ul（3）吸頭臺(tái)：放置200ul和20ul的吸頭一個(gè)（4）EP管1.5ml、100ul2、實(shí)驗(yàn)器具的處理與準(zhǔn)備塑料制品：（包括吸頭、EP管等）送至高壓3次，試驗(yàn)前將槍頭放入吸頭臺(tái)。3、試劑配制和準(zhǔn)備：（1）雙蒸水：100ml鹽水瓶?jī)?nèi)裝40ml蒸餾水，送至高壓，后分裝到幾個(gè)1。5mlEP管中，-20℃中保存?zhèn)溆?。?）PCR中所需要的各種試劑二、PCR時(shí)注意事項(xiàng)：佩戴一次性手套，同時(shí)避免戴上的一次性的手套

?pH計(jì)的原理、使用、維護(hù)及數(shù)字不穩(wěn)定現(xiàn)象原因總結(jié)！2023/06/30: pH計(jì),酸度計(jì)主要指實(shí)驗(yàn)室酸度計(jì),主要分為臺(tái)式pH計(jì)|酸度計(jì)，便攜式pH計(jì)|酸度計(jì)，筆式pH計(jì)|酸度計(jì)三大類別。一、pH計(jì)|酸度計(jì)原理用pH計(jì)|酸度計(jì)進(jìn)行電位測(cè)量是測(cè)量pH最jing密的方法。pH計(jì)|酸度計(jì)由三個(gè)部件構(gòu)成：1.一個(gè)參比電極；2.一個(gè)玻璃電極，其電位取決于周?chē)芤旱膒H值；3.一個(gè)電流計(jì)，該電流計(jì)能在電阻極大的電路中測(cè)量出微小的電位差。由于采用最新的電極設(shè)計(jì)和固體電路技術(shù)，現(xiàn)在最hao的pH計(jì)|酸度計(jì)可分辨出0.005pH單位。參比電極的基本功能是維持一個(gè)恒定的電位，作為測(cè)量各種偏

逆轉(zhuǎn)錄PCR的實(shí)驗(yàn)步驟2023/06/29: 一、實(shí)驗(yàn)器具與材料：1、移液槍：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸頭：1ml、200μl、20μl3、勻漿管：5ml4、吸頭臺(tái)：放置1ml吸頭的一個(gè)，放置20μl吸頭的一個(gè)5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl6、試劑瓶：2個(gè)60ml的棕色試劑瓶（廣口，帶蓋）；1個(gè)125ml的白色試劑瓶（放無(wú)水乙醇）7、量筒：50ml、250ml、500ml8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml9、試管架：5ml、1.5ml、20μl10、鹽水瓶：250ml、500ml各2個(gè)

生物素標(biāo)記蛋白操作方法2023/06/29: 下面的操作方法可以使約3~5分子的生物素與1分子的蛋白結(jié)合，對(duì)某些蛋白來(lái)說(shuō)，生物素與蛋白的分子比可根據(jù)不同的生物素化要求進(jìn)行調(diào)整。1.溶解2~10mg蛋白于1ml的BuphTm磷酸鹽緩沖液中，并計(jì)算溶解的毫摩爾數(shù)。如果蛋白含有不恰當(dāng)?shù)木彌_液（如Tris或者甘氨酸），可以通過(guò)在PBS中透析或濃縮的方法除去。計(jì)算：蛋白質(zhì)量（mg）/蛋白分子量（MW）＝蛋白質(zhì)的毫摩爾數(shù)。2.在打開(kāi)之前，平衡生物素至室溫。加2mgSulfo-NHS-Biotin于100ul超純水中，加入足夠量濃度的生物素，一般對(duì)于10

胎牛血清白蛋白提取操作步驟2023/06/28: 胎牛血清白蛋白（BSA），又稱第五組分，是牛血清中的一種白蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA，通過(guò)提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性。是胎牛血清中的一種球蛋白，一般獲取胎牛血清白蛋白，常常運(yùn)用的方法是加熱法。下面一起來(lái)看

牛血清白蛋白的各種分類與作用2023/06/28: 牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等電點(diǎn)4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。牛血清蛋白溶液可以作為測(cè)量蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線用。一般買(mǎi)回來(lái)的牛血清蛋白是細(xì)小片狀的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以鐵為基本原料。1、特純級(jí)牛血清蛋白用途：用作酶標(biāo)、金標(biāo)等診斷試劑的封閉劑，生化試驗(yàn)等。

凝膠層析分離物質(zhì)的優(yōu)缺點(diǎn)分析2023/06/27: 凝膠層析分離物質(zhì)的優(yōu)缺點(diǎn)1.凝膠層析操作簡(jiǎn)便，所需設(shè)備簡(jiǎn)單。有時(shí)只要有一根層析柱便可進(jìn)行工作。分離介質(zhì)—凝膠wan全不需要像離子交換劑那樣復(fù)雜的再生過(guò)程便可重復(fù)使用。2.分離效果較好，重復(fù)性高。最tu出的是樣品回收率高，接近100%。3.分離條件緩和。凝膠骨架親水，分離過(guò)程又不涉及化學(xué)鍵的變化，所以對(duì)分離物的活性沒(méi)有不良影響。4.應(yīng)用廣泛。適用于各種生化物質(zhì)，如肽類、激素、蛋白質(zhì)、多糖、核酸的分離純化、脫鹽、濃縮以及分析測(cè)定等。分離的分子量范圍也很寬，如SephadexG類為102～105d；S

生物素標(biāo)記抗體和蛋白使用方法2023/06/27: 生物素，是一個(gè)分子量只有244.31Da的小分子，經(jīng)活化后可與蛋白、抗體等生物大分子結(jié)合，不僅可以很好地保持大分子的生物活性，而且與親和素結(jié)合使用時(shí)具有多級(jí)放大作用，使其廣泛應(yīng)用于微量抗原、抗體定性、定量檢測(cè)及定位觀察研究。那么如何使用生物素標(biāo)記抗體或蛋白呢？下面遠(yuǎn)慕給大家分享一下。工具/原料1.10ul，50ul，200ul，1000ul可調(diào)高精度移液器2.恒溫箱（37℃）3.離心機(jī)（離心力可達(dá)到12,000×g）4.生物素標(biāo)記試劑盒（Cata.No:EBLK0002,Elabscience)

DAB染色液的使用方法及注意事項(xiàng)2023/06/26: DAB染色液用于免疫組化染色，應(yīng)用在Dako自動(dòng)染色系統(tǒng)上。DAB染色液的使用方法1.DAB顯色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3，3-二氨基聯(lián)苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,顯色時(shí)加入5-10mL30%H2O2混勻后立即使用2.顯色準(zhǔn)備好含有待測(cè)蛋白的固相膜：包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過(guò)氧化酶（HRP）標(biāo)記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟。3.加入適量的DAB顯色液，鋪滿整個(gè)固相膜表面（

辣根過(guò)氧化物酶的簡(jiǎn)介和用途2023/06/26: 辣根過(guò)氧化物酶（HorseradishPeroxidase,HRP），是臨床檢驗(yàn)試劑中的常用酶。該產(chǎn)品不但廣泛用于多個(gè)生化檢測(cè)項(xiàng)目，也廣泛運(yùn)用于免疫類（ELISA）試劑盒。過(guò)氧化物酶作為多個(gè)試劑盒顯色體系的關(guān)鍵成分，對(duì)試劑盒的質(zhì)量有重要影響。辣根過(guò)氧化物酶（HorseradishPeroxidase,HRP）比活性高，穩(wěn)定，分子量小，純酶容易制備，所以最chang用。HRP廣泛分布于植物界，辣根中含量高，它是由無(wú)色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白，糖含量18%。HRP由多個(gè)同工酶組成，分子

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