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遠慕分享：細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的提取2022/11/11

細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的提?。?、Trixon-100或NP-40裂解液裂解；2、凍融裂解法；3、研磨法；“經(jīng)典的就是分子克隆2講的，用RIPA裂解，然后刮下來，冰裕30min，超生，4度離心10min”（1）單層貼壁細胞總蛋白的提取：1、倒掉培養(yǎng)液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液（或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫菏箽堄嗯囵B(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。2、每瓶細胞加3ml4℃預(yù)冷的PBS（0.01MpH7.2～7.3）。平放輕輕搖動1min洗滌細胞，然后棄去洗液。重復(fù)以上操作兩次，共洗細胞三次以洗去培

植物免疫受體蛋白可“雙重免疫”2022/11/11

當植物免疫系統(tǒng)監(jiān)測到有/病原菌入侵時，植物免疫受體蛋白就像“哨兵”一樣活躍起來，調(diào)動機體啟動免疫反應(yīng)。但是，植物免疫受體蛋白究竟是如何被激活的，一直成謎。9月21日晚，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)王源超教授團隊和清華大學(xué)柴繼杰教授團隊合作在國際權(quán)/威學(xué)術(shù)期刊《自然》發(fā)表的一篇論文，首/次揭示了細胞膜受體蛋白是如何一邊識別病原菌，一邊抑制病原菌“作惡”的，這為人類認識植物與病原菌互作機制提供了新的認知，對改良作物廣譜、持久抗病性具有重要指導(dǎo)意義。此份研究的焦點，是一對冤家：病原菌的核心致病因子XEG1和植物細胞膜

遠慕解析：轉(zhuǎn)運蛋白是不是就是載體蛋白2022/11/11

轉(zhuǎn)運蛋白：轉(zhuǎn)運蛋白是膜蛋白的一大類，介導(dǎo)生物膜內(nèi)外的化學(xué)物質(zhì)以及信號交換。脂質(zhì)雙分子層在細胞或細胞器周圍形成了一道疏水屏障，將其與周圍環(huán)境隔絕起來。盡管有一些小分子可以直接滲透通過膜，但是大部分的親水性化合物，如糖，氨基酸，離子，藥物等等，都需要特異的轉(zhuǎn)運蛋白的幫助來通過疏水屏障。因此，轉(zhuǎn)運蛋白在營養(yǎng)物質(zhì)攝取，代謝產(chǎn)物釋放以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等廣泛的細胞活動中起著重要的作用。載體蛋白：載體蛋白是多回旋折疊的跨膜蛋白質(zhì)，它與被傳遞的分子特異結(jié)合使其越過質(zhì)膜。其機制是載體蛋白分子的構(gòu)象可逆地變化，與被轉(zhuǎn)運分

胰酪蛋白胨質(zhì)量標準及其檢驗標準2022/11/11

胰酪蛋白胨（CaseinTryptone）是一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，亦稱胰酶消化酪蛋白胨（Pancreaticdigestofcasein），或稱胰蛋白胨。該蛋白胨系采用酪蛋白經(jīng)胰酶消化后，濃縮干燥而成的淺黃色粉末，具有色淺、易溶、透明、無沉淀等良好的物理性狀。可配制各種微生物培養(yǎng)基，用于細菌的培養(yǎng)、分離、增殖、鑒定，以及無菌試驗培養(yǎng)基、厭氧菌培養(yǎng)基等細菌生化特性試驗用培養(yǎng)基的配置。尤其該蛋白胨營養(yǎng)豐富，為生物基因工程高密度發(fā)酵技術(shù)提供了可能。胰酪蛋白胨質(zhì)量標準及其檢驗標準：常規(guī)各項理化指標：1.澄清度

遠慕科普：細胞系的建立要求2022/11/10

細胞系細胞系（cellline）指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)首/次傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。（由此便引申出了后來的有限細胞系（FiniteCellLine）、無限細胞系（InfiniteCellLine）），因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞（特定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細胞。也有認為細胞系(cellline）指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)首/次傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系(FiniteCellLine

同樣是牛血清為啥胎牛血清比新生牛血清貴呢？2022/11/10

購買過牛血清的科研實驗人員都知道，胎牛血清和新生牛血清價格有很大不同。胎牛血清價格很貴，新生牛血清相對便宜。同樣是牛血清，為什么會產(chǎn)生這樣大的差異呢？先來看看牛血清大體的分類：胎牛血清、新生牛血清和小牛血清，而劃分三者之間的是根據(jù)對不同年齡段的牛采血所得到的不同的血清產(chǎn)品。胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個月時，通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自

血清使用效果千差萬別，是哪里出錯了？2022/11/10

剛買來的細胞，前幾代養(yǎng)著還行，這越養(yǎng)怎么狀態(tài)越差？后面的實驗可怎么辦？經(jīng)?！革曫B(yǎng)」細胞的小伙伴，應(yīng)該都遇到或聽說過上述這些情況。影響細胞狀態(tài)的潛在因素有很多，血清就是其中之一。血清對于細胞實驗的重要性毋庸置疑：提供細胞生長增殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)、提供結(jié)合蛋白、幫助細胞貼壁、提供蛋白酶抑制劑、調(diào)節(jié)培養(yǎng)體系理化特性等等功能。因此，可以這樣認為：血清品質(zhì)的優(yōu)劣，一定程度上決定了細胞生長狀態(tài)的好壞。很多從業(yè)者在挑選血清的時候，只關(guān)注到品牌、產(chǎn)地，甚至?xí)募掖蛘圪I哪家，忽略了血清的檢測指標、批次以及解凍儲存情

遠慕分享：動物細胞培養(yǎng)的原理2022/11/10

動物細胞培養(yǎng)是指細胞在體外條件下的生長，動物細胞在培養(yǎng)的過程中不再形成組織。從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。用途指動物、(包括哺乳動物、昆蟲、魚類、禽類等)細胞在體外的培養(yǎng)技術(shù)，即在無菌條件下，從機體中取出組織或細胞，模擬體內(nèi)正常生理狀態(tài)下生存的基本條件，讓它在培養(yǎng)器皿中繼續(xù)生存、生長和繁殖的方法。體外培養(yǎng)的細胞可分為原代細胞和傳代細胞。動物細胞培養(yǎng)給細胞生物學(xué)的研究帶來了極大的方便，解決了以人的活細胞材料作為研究對象或研究工具的問題

對照品的品牌有哪些？標準品（對照品）的選擇！2022/11/09

一、標準品：1、中檢所對照品（也叫CP對照品）中國食品藥品檢定研究院(以下簡稱中檢院，原名中國藥品生物制品檢定所)，是國家食品藥品監(jiān)督管理局的直屬事業(yè)單位，是國家檢驗藥品生物制品質(zhì)量的法定機構(gòu)和最高技術(shù)仲裁機構(gòu)。可提供國家藥品、生物制品、醫(yī)療器械標準物質(zhì)2900余種，其中，化學(xué)對照品2030種，對照藥材717種，生物標準品和生物參考品170種，這是14年的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，到18年總數(shù)已經(jīng)到3884種。主要產(chǎn)品：中國藥典（CP）化學(xué)對照品，對照藥材，生物標準品和標準菌株2、歐洲藥典標準品（也叫EP或ED

藥品研發(fā)中對照品/標準品采購注意事項2022/11/09

在新藥以及仿制藥研究過程中，對照品采購如果出現(xiàn)失誤，將對整個研發(fā)進度產(chǎn)生嚴重影響，為幫助采購人員更準確和規(guī)范地采購對照品/標準品，遠慕整理了標準品采購中常見問題和注意事項，希望可以幫助到大家。一、采購來源渠道多，不同申請人提供的對照品來源和渠道不統(tǒng)一怎么辦？由于較難獲得官/方渠道的對照品，其來源渠道一般包括：1、自制對照品；2、原料藥廠家精制提供；3、國外購進；4、第三方電商平臺購買（例如遠慕官/網(wǎng)）5、直接在原料藥基礎(chǔ)上提高質(zhì)量要求后進行對照。這些自行合成以及外購對照品由于主藥含量、水分、殘留

試劑總結(jié)：試劑的定義、分類、存放2022/11/09

1.試劑定義：試劑(reagent)，又稱生物化學(xué)試劑或試藥。主要是實現(xiàn)化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究試驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品。一般按用途分為通用試劑、高純試劑、分析試劑、儀器分析試劑、臨床診斷試劑、生化試劑、無機離子顯色劑試劑等。2.試劑常見規(guī)格：有四種常用規(guī)格:優(yōu)級純或一級品(GR，精密分析和科學(xué)研究工作);分析純或二級品(AR，重要分析和一般研究工作);化學(xué)純或三級品(CP，工礦及學(xué)校一般化學(xué)實驗);實驗試劑(L.P.)基準試劑含量應(yīng)該是99.9%~100%。隨著科學(xué)技術(shù)和新興工

遠慕分享：溶液濃度的表示方法一覽！2022/11/09

關(guān)于溶液濃度的表示方法，我們熟悉的有質(zhì)量分數(shù)、質(zhì)量濃度、物質(zhì)的量濃度等等，但在后續(xù)的實際工作中還有很多表示方法也是常用到的，下面遠慕就把這些方法給大家做一個總結(jié)。1.物質(zhì)的量濃度溶液中溶質(zhì)B的物質(zhì)的量濃度等于溶質(zhì)B的物質(zhì)的量除以混合物溶液的體積。常用到的單位有：mol/L，mmol/L物質(zhì)的量濃度一般用于標準溶液、基準溶液的表示。2.質(zhì)量濃度溶液中溶質(zhì)B的質(zhì)量濃度等于溶質(zhì)的質(zhì)量除以溶液的體積。用到的單位：g/L，mg/L，mg/ml，ug/ml，ng/ml一般用于標準滴定液、基準溶液或者一般溶液

瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)要注意的小細節(jié)2022/11/08

瓊脂糖凝膠電泳是利用DNA、RNA分子帶負電荷磷酸基團的特性，通過電流使得片段大小不同的核酸由負極的凝膠孔中緩慢向正極移動，最終達到分離核酸分子的技術(shù)。由于分子量小的核酸片段在凝膠中移動速度較快，分子量大的核酸片段移動相對較慢的特點，就可以將分子量不同的核酸片段區(qū)分開，再結(jié)合DNAMarker，即DNA分子量固定已知的標準品進行分析，就可以準確識別和判斷核酸片段大小，也就是跑出來的“小東西”到底是不是我們想要的目的基因。瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)目前在生物學(xué)科中有非常廣泛的應(yīng)用，但是在這個過程中有幾點小

菌落總數(shù)的誤操作及避免方法！2022/11/08

菌落總數(shù)是評價食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標，其檢測工作在某種程度上具有相當?shù)牟豢杀刃?，這就要求檢測人員要嚴格執(zhí)行科學(xué)的操作程序，重視檢測過程中的每一個細節(jié)。今天小編匯總一些，以供大家參考學(xué)習(xí)。1、樣品的制備和稀釋倍數(shù)的選擇對于冰凍的樣品，在接種前要放到0~4℃的冰箱中解凍。固體樣品要用滅菌刀或鑷子從不同部位采取試驗材料并混合，在無菌操作下充分研細，混勻，做成均勻稀釋液。樣品制備的整個過程都應(yīng)在無菌狀態(tài)下進行，以防污染。任何樣品在打開包裝前，都要在取樣開口處的周圍表面進行消毒。以上過程的誤操作是：冰凍樣

微生物在常見選擇性培養(yǎng)基上的菌落特征2022/11/08

微生物培養(yǎng)，在選擇性分離培養(yǎng)基、顯色培養(yǎng)基上的菌落特征，皆由微生物生長繁殖及代謝產(chǎn)物決定，培養(yǎng)基所含營養(yǎng)物質(zhì)，皆為了滿足微生物生長和代謝所需。培養(yǎng)基簡介：培養(yǎng)基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素，用于各種微生物培養(yǎng)和鑒定。一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中含有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸膏、氯化鈉、瓊脂等基本營養(yǎng)萬分。一些選擇、鑒定培養(yǎng)基根據(jù)用途不同，則需加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于

多黏菌素B、多黏菌素E、多黏菌素E甲磺酸的區(qū)別，一文掌握！2022/11/08

多黏菌素類抗生素，作為治療多重耐藥的革蘭陰性菌引起嚴重感染的"最后一道防線"，臨床地位越來越重要。那么，多黏菌素B、硫酸多黏菌素E、多黏菌素E甲磺酸鈉之間有何區(qū)別呢？一、抗菌譜多黏菌素B和多黏菌素E屬于殺菌劑。主要通過破壞G-菌細胞膜的完整性，導(dǎo)致內(nèi)容物外漏和菌體死亡。多黏菌素B和多黏菌素E僅具有抗G-菌活性，對G+菌、專性厭氧菌、非典型病原體無效。多黏菌素主要用于：1.多重耐藥的銅綠假單胞菌。2.碳青霉烯類耐藥的腸桿菌科細菌、碳青霉烯耐藥的不動桿菌（如鮑曼不動桿菌）。溫馨提示：多黏菌素具有一定

遠慕生物：核酸凝膠電泳觀察法實驗介紹2022/11/07

實驗原理：瓊脂糖是海藻中提取的線狀高聚物，不同濃度的瓊脂糖密度不同，一般PCR產(chǎn)物使用2%濃度，0.5Kb-10Kb的DNA使用1%濃度，基因組DNA使用0.3%-0.7%濃度；不同大小的核酸在同一濃度的凝膠中遷移率不同，因為分子越大其受瓊脂糖的阻力越大，遷移率與堿基對的對數(shù)值成反比；同分子量不同構(gòu)象的核酸遷移率也不同，超螺旋環(huán)狀DNA遷移率〉線狀DNA遷移率〉帶切口環(huán)狀DNA遷移率。熒光染料溴化乙錠可嵌入DNA堆積堿基間，DNA吸收的254nm的紫外輻射與溴化乙錠在302nm和366nm處的光

瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧與異常分析2022/11/07

跑電泳是分子生物學(xué)實驗的一項基本技術(shù)。只要做分子生物學(xué)方面的實驗，可能或多或少，或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳的材料是瓊脂糖，瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收，DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質(zhì)粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳實驗的一些小技巧小細節(jié)。1凝膠制作1．1凝膠濃度配制凝膠的濃度據(jù)實驗需要而變，一般在0．8％～2．0％之間，如果一次配制凝膠100ml，沒用完的凝膠可以再次融化，但隨著融化次數(shù)的增加，水分丟失也越多，凝膠濃度則會越來越高，導(dǎo)致實驗結(jié)果不穩(wěn)定，補水辦法：一

關(guān)于溶液配制的注意事項，遠慕給您整理好了！2022/11/07

標準溶液就是已確定其主體物質(zhì)濃度或其他量值的溶液。不同的情況需使用不同的標準溶液，可千萬別一概而論。溶液配制的注意事項1.分析實驗所用的溶液應(yīng)用純水配制，容器應(yīng)用純水洗滌三次以上，特殊要求的溶液應(yīng)事先做純水的空白檢驗。2.溶液要用帶塞的試劑瓶盛裝;見光易分解的溶液要裝于棕色瓶中;揮發(fā)性試劑(如，有機試劑)配制的溶液，瓶塞要嚴密;見空氣易變質(zhì)及放出腐蝕性氣體的溶液也要蓋緊，長期存放要用蠟封住;濃堿溶液應(yīng)用塑料瓶裝，如裝在玻璃瓶中，要用橡皮塞塞緊，不能用玻璃磨口塞。3.每瓶試劑瓶必須有標明名稱、規(guī)格

實驗中稀釋血清樣本的原因及方法2022/11/07

在ELISA實驗過程中，樣本稀釋是一個重要的步驟，為何樣本都需要稀釋呢？今天就先向大家著重介紹一下血清樣本稀釋的原因以及稀釋的方法。一、稀釋血清的原因：1、比賽按捺對比明顯，應(yīng)稀釋比賽物。2、以下降非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，血清的稀釋倍數(shù)一定要事前確認，但也不必一點點，做一個預(yù)實驗即可，挑選OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即ELISA中陰性孔OD在1.0，這么做出來的曲線對比會比較靈敏。二、稀釋血清的方法