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色素試劑-指示劑、顯色劑和染色劑介紹2022/11/04

在化學(xué)試劑中，把帶有顏色或可改變顏色的一類試劑統(tǒng)稱為色素試劑，它包括了指示劑、顯色劑和染色劑。酸堿指示劑是遇到酸、堿能改變試劑顏色的指示劑，主要用來指示溶液的PH值，指示酸堿滴定的終點，如：甲基橙、酚酞、甲基紅等。這些酸堿指示劑也是一種染料，但一般染料并不能直接作為酸堿指示劑，一般要進行提純，嚴格控制試劑中的雜質(zhì)含量，否則可造成PH值變色范圍的遷移，影響滴定分析的結(jié)果。氧化還原指示劑是指遇到氧化劑或還原劑能改變顏色的試劑，主要指示溶液中的氧化劑或還原劑的存在、用于指示氧化還原滴定分析的終點，如二

標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)溶液配制常見問題2022/11/04

小伙伴們平時做實驗時，有沒有被配制溶液難住過？不同狀態(tài)的溶質(zhì)應(yīng)注意哪些問題？如何正確的配制溶液？如果你還不確定，快跟遠慕生物一起來看看吧。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制常見問題1、能否直接將溶劑加入標(biāo)準(zhǔn)品的瓶子中進行溶解，再轉(zhuǎn)移到容量瓶中定容?不能。一般除非特別指明，所有標(biāo)準(zhǔn)品廠商給出的產(chǎn)品質(zhì)量和體積都不是精確數(shù)值，比如10mg的標(biāo)準(zhǔn)品，其瓶中的產(chǎn)品重量可能大于10mg，如10.5mg或11mg。如果產(chǎn)品的重量為精確數(shù)值，廠家一般會特別注明。2、溶劑選擇：根據(jù)已有的方法或者物質(zhì)的相關(guān)理化性質(zhì)選擇合適溶劑。不適當(dāng)?shù)?

標(biāo)準(zhǔn)品選購指南：8招教你選購合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)！2022/11/04

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是技術(shù)基礎(chǔ)中的核心和基礎(chǔ)部分，是分析測量結(jié)果質(zhì)量的重要保證。隨著分析測量的重要作用不斷加深，分析測量結(jié)果的質(zhì)量、結(jié)果的可靠性和有效性與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的依存度將更為顯著。那如何選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、在分析中如何正確使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)呢？是不是有很多疑問？下面一一解答。選擇、購買標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)考慮哪些要素？（1）特性量的種類及定值方法：某些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可能只適用某一特定方法或?qū)兕I(lǐng)域的應(yīng)用，某些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的值有特殊規(guī)定，如含結(jié)晶水的值，應(yīng)對證書中該類說明加以注意，防止誤選誤用；（2）特性量水平：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特

化學(xué)滴定法知識點，都給你整理在這了！2022/11/04

滴定分析法，作為一種簡便、快速和應(yīng)用廣泛的定量分析方法，在常量分析中有較高的準(zhǔn)確度，可以說是實驗室中最/常用的定量方法。滴定分析法的優(yōu)點：1.操作簡單；2.對儀器要求不高；3.有足夠高的準(zhǔn)確度誤差不高于0.2%；4.方便，快捷；5.便于普及與推廣。所以，大家掌握清楚它的知識點很有必要，下面讓我們一起來了解一下相關(guān)內(nèi)容：01.常見滴定分析法02.滴定的四個階段及酸堿指示劑的使用03.滴定分析操作及注意事項04.滴定結(jié)果超出誤差怎么處理一、滴定分析的分類1.酸堿滴定法滴定分析法中，酸堿滴定最基本。中

淺談重組蛋白質(zhì)的表達、純化、復(fù)性和定量2022/11/03

一、重組蛋白質(zhì)的誘導(dǎo)表達1.挑取轉(zhuǎn)化有質(zhì)粒的單菌落，接種于3ml選擇性LB液體培養(yǎng)基中，37oC，250rpm/min振搖培養(yǎng)過夜。2.次日將培養(yǎng)過夜的菌液500μl再接種于10ml（1:::20）選擇性LB液體培養(yǎng)基中，37oC，250rpm/min振搖培養(yǎng)至光密度（OD600=0.6）時，取1ml樣本作為誘導(dǎo)前標(biāo)本，10000g離心1min收集菌體沉淀，－20oC凍存?zhèn)溆谩?.加入1mol/LIPTG于菌液中，使IPTG終濃度為1mM，37oC，250rpm/min振搖培養(yǎng)4～5小時。取1m

培養(yǎng)昆蟲細胞一定要注意這些！2022/11/03

昆蟲細胞是主要提取來自昆蟲的一類真核細胞。通過培養(yǎng)制造宿主的病毒，可以引起昆蟲流行病，但對人畜和植物無害，因而可作病毒殺蟲劑，還可以生產(chǎn)某些藥用蛋白。細胞培養(yǎng)瓶是培養(yǎng)昆蟲細胞常用的一種細胞培養(yǎng)耗材，那么在培養(yǎng)昆蟲細胞時需要注意哪些問題呢？1、溫度與環(huán)境：昆蟲細胞一般應(yīng)該在27℃、非濕化的環(huán)境中培養(yǎng)，建議不要進行二氧化碳交換，所以細胞培養(yǎng)瓶盡量選擇密閉的蓋子。2、培養(yǎng)基：不同細胞對培養(yǎng)基的需求也有所差異，應(yīng)該根據(jù)細胞生長特性，選擇昆蟲細胞專用的培養(yǎng)基。3、貼壁昆蟲細胞：細胞密度低于匯合狀態(tài)的20%

High Five昆蟲細胞 不僅僅是昆蟲細胞！2022/11/03

昆蟲細胞桿狀病毒載體表達系統(tǒng)是一種真核表達系統(tǒng)，可以在昆蟲細胞中表達真菌、細菌、病毒和植物在內(nèi)的多種外源基因。粉紋夜蛾H5（highfive）細胞系、草地貪夜蛾卵巢細胞系（sf21），或由sf21細胞克隆得到的sf9細胞都是在生物制品領(lǐng)域中常用的昆蟲細胞，通常用于使用桿狀病毒載體表達系統(tǒng)的重組蛋白表達。作為地球上生物多樣性較高的種群之一，昆蟲細胞有許多特化的器官和系統(tǒng)，在顯微鏡下昆蟲細胞為晶瑩透亮、大小均一的圓形細胞，使用含有或不含有血清培養(yǎng)基可在體外進行懸浮培養(yǎng)及貼壁培養(yǎng)，但是體外培養(yǎng)的昆蟲細

重組蛋白、融合蛋白、天然蛋白有哪些區(qū)別？2022/11/03

重組蛋白重組蛋白是利用基因工程技術(shù)產(chǎn)生的，通常是由轉(zhuǎn)基因動物的乳腺產(chǎn)生，其作為生物制藥在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中作用顯著。利用基因工程技術(shù)，可以使哺乳動物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”。方法：是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，通過顯微注射等方法，導(dǎo)入哺乳動物（哺乳動物才會泌乳）的受精卵中，然后，將受精卵送入母體內(nèi)，使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。轉(zhuǎn)基因動物進入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)所需要的蛋白質(zhì)藥品，因而稱為動物乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器。融合蛋白融合蛋白又稱為“標(biāo)簽蛋白”

堿性成纖維生長因子（bFGF）的藥理作用和臨/床應(yīng)用2022/11/02

堿性成纖維生長因子（簡稱bFGF）是哺乳動物和人體內(nèi)存在的一種微量物質(zhì)，在多種組織細胞中分布有bFGF受體，因而其生理作用廣泛，是一種多功能細胞生長因子，bFGF于1974年首先由美國科學(xué)家Gospodarowicz從牛垂體中分離出，方法復(fù)雜，價格昂貴?，F(xiàn)在運用基因工程技術(shù)，由大腸桿菌可大量表達生產(chǎn)高活性、高純度的bFGF，從而使之大規(guī)模應(yīng)用于臨/床。國內(nèi)外大量研究結(jié)果表明，bFGF通過促進與創(chuàng)傷修復(fù)有關(guān)的幾乎所有細胞的迅速增殖而推動創(chuàng)面主動修復(fù)，顯著縮短創(chuàng)面愈合時間，全面提高創(chuàng)傷愈合質(zhì)量，特別

細胞培養(yǎng)中血清能起到什么作用？2022/11/02

血清主要作用：提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質(zhì)。提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化可*松、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞

培養(yǎng)細胞生長減慢和死亡的原因2022/11/02

培養(yǎng)細胞生長減慢這種情況可能的原因包括：1．由于更換了不同培養(yǎng)液或血清，細胞需要重新適應(yīng)。2．試劑保存不當(dāng)，培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。3．培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染。4．接種細胞起始濃度太低。5．細胞已老化。6．支原體污染。建議解決方法：1．比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。2換入新鮮配制培養(yǎng)液，或補加谷氨酰胺及生長因子。3．用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，更換培養(yǎng)物。4．培養(yǎng)液需在2-8℃避光

正確認識支原體污染以及檢測與防治2022/11/02

一．什么是支原體污染支原體是一種大小僅為0.2~0.3um，無細胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45um）的原核生物，在細胞培養(yǎng)過程中，支原體感染發(fā)生率達到63%，因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。當(dāng)細胞（特別是傳代細胞）被支原體污染后，細胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達發(fā)生改變，而細胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響，因而細胞被支原體污染一般難以察覺。二．支原體污染從哪來細胞培養(yǎng)中有幾種支原體污染與人、牛和豬有關(guān)。實驗室的工作人員是口腔支原體、發(fā)酵支原體和人型支原體的主要來源

免疫熒光染色的染料需具備的條件2022/11/01

用于免疫熒光染色的染料需具備以下幾個條件：熒光染料應(yīng)有較高的量子產(chǎn)額和消光系數(shù)；熒光染料對488nm的激發(fā)光波長有較強的吸收；發(fā)射光波長與激發(fā)光波長之間應(yīng)有較大的波長差；容易與被標(biāo)記的單克隆抗體結(jié)合而不影響抗體自身的特異性。1.異硫氰酸熒光素（FITC）：可產(chǎn)生亮綠色熒光。FITC是免疫熒光標(biāo)記最/常用的熒光探針。2.德州紅：與生物素偶聯(lián)的抗體有很強的親和力，產(chǎn)生紅色熒光。3.藻膽蛋白類：主要包括藻紅蛋白（PE）、藻青蛋白（PC）、別藻青蛋白（APC）三類。多發(fā)生橙色至紅色熒光。4.能量傳遞復(fù)合

免疫熒光實驗需要注意的環(huán)節(jié)2022/11/01

1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。2、組織切片固定：切好片風(fēng)干后立即用冰丙酮等固定液進行固定5-10min，尤其要較長時間保存的白片，一定要及時固定和適當(dāng)保存。3、血清封閉：為防止內(nèi)源性非特異性蛋白抗原的結(jié)合，需要在一抗孵育前先用血清（與二抗來源一致）封閉，減弱背景著色。血清封閉的時間是可以調(diào)整的，一般10-30min。4、一抗孵育條件：在免疫組化反應(yīng)中最重要，包括孵育時間和抗體濃度。一抗孵育溫

實驗室二氧化碳培養(yǎng)箱使用注意事項2022/11/01

二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%)，來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。二氧化碳培養(yǎng)箱使用注意事項1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能打開電源開關(guān)，否則會損壞加熱元件。2、培養(yǎng)箱運行數(shù)月后，水箱內(nèi)的水因揮發(fā)可能減少，當(dāng)?shù)退恢甘緹?WLow12)亮?xí)r應(yīng)補充加水。先打開溢水管，用漏斗接橡膠管從注水孔補充加水使低水位指示燈熄滅，再

細胞培養(yǎng)為何需要在CO2培養(yǎng)箱中？2022/11/01

細胞培養(yǎng)為何需要在CO2培養(yǎng)箱中？二氧化碳不僅是細胞生長的必需成分，還與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。細胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境，氧氣、二氧化碳是細胞生存的必要條件。氧氣參與細胞的三羧酸循環(huán)，為細胞生存、代謝與合成提供能量；二氧化碳既是細胞的代謝產(chǎn)物，是細胞生長的必需成分，又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)。大多數(shù)細胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4。在開放式培養(yǎng)中，以5%的二氧化碳氣體比例為宜。細胞污染的預(yù)防①實驗用品防止污染。細胞培養(yǎng)所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要徹/底，各種溶液滅菌要仔細，并在無

DNA與RNA有哪些異同？2022/10/31

一、DNA和RNA異同點1.核酸是攜帶遺傳信息的物質(zhì)；在生物體的遺傳、變異和蛋白質(zhì)的生物合成中有極其重要的作用。核酸有DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）兩種核酸。2.真核細胞DNA主要分布在真核細胞的細胞核中，少部分分布在線粒體和葉綠體中；RNA主要分布在細胞質(zhì)中，少部分分布在細胞核中。3.DNA的基本單位是脫氧核糖核苷酸，RNA的基本單位是核糖核苷酸。4.DNA是由脫氧核糖核苷酸連接而成的長鏈，是雙鏈螺旋；RNA由核糖核苷酸組成，是單鏈構(gòu)成。二、注意1.核苷酸的數(shù)量不限、排列順序千變?nèi)f

關(guān)于RNA提取時RNA降解的原因2022/10/31

1)新鮮細胞：裂解液的量不足，使得裂解不充分。2)新鮮組織：某些含有內(nèi)源性核酸酶的樣品，很難避免RNA酶的降解，建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎，并且，勻漿時采用更多的裂解液。3)冷凍樣品：樣品取材后應(yīng)該迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放。如果未經(jīng)液氮速冷直接轉(zhuǎn)移到-70℃冰箱存放，會造成RNA緩慢降解。樣品研磨后，在液氮剛剛揮發(fā)完時，將樣品迅速轉(zhuǎn)移到含裂解液的容器中，立即混勻勻漿。4)外源RNA酶的污染：試劑、器械等實驗用品應(yīng)該采用DEPC水滅菌處理。5)內(nèi)源RNA酶的污

遠慕教你血液各類抗凝劑怎么選！2022/10/31

抗凝是用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝血/因子的活性，以阻止血液凝固。能夠阻止血液凝固的物質(zhì)，稱為抗凝劑或抗凝物質(zhì)。常用抗凝劑和使用方法如下：1.乙二胺四乙酸（EDTA）鹽常用有鈉鹽或鉀鹽，能與血液中鈣離子結(jié)合成螯合物，使ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。根據(jù)國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會（ICSH）建議，CBC抗凝劑用量為EDTA-K.2H2O1.5～2.2mg／ml血液。不適于凝血檢查、血小板功能試驗。2.草酸鹽常用有草酸鈉、草酸鉀、草酸銨，溶解后解離的草酸根離子能與樣本中鈣離子形成草酸鈣

配制微生物培養(yǎng)基, 應(yīng)該注意哪些？2022/10/31

配置微生物培養(yǎng)基需要：1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比，保持合適滲透壓。3、將培養(yǎng)基的pH控制在適宜的范圍之內(nèi)，以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。4、要注意各種原料的配比，每種培養(yǎng)基的配比合適的配比，可以按照老師的要求去做。5、如需要加熱的時候注意時間的把握。操作步驟：(一)準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。(二)校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補充水分