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普通PCR引物 VS qPCR 引物有什么區(qū)別呢？2022/09/20: 說(shuō)起引物，大家都再熟悉不過(guò)了。引物，在核苷酸聚合作用的起始時(shí)，可以刺激合成另一種大分子，并與反應(yīng)物以共價(jià)鍵形式連接的序列。在核酸化學(xué)中，引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段，可結(jié)合在核酸鏈上與之互補(bǔ)的區(qū)域，其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點(diǎn)，核酸聚合酶可由其3′端開(kāi)始合成新的核酸鏈。無(wú)論是做普通PCR還是熒光定量PCR，設(shè)計(jì)合適的引物是非常關(guān)鍵的一步。普通PCR和熒光定量PCR的檢測(cè)方式具有較大的差別。熒光定量PCR實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)與DNA結(jié)合的熒光染料激發(fā)的熒光，普通PCR通過(guò)檢測(cè)插入DNA中核酸染料

ELISA實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)“花板”怎么解決？2022/09/19: 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(EnzymeLinkedImmunoSorbentAssay，ELISA)于1971年分別由瑞典學(xué)者和荷蘭學(xué)者報(bào)道，開(kāi)創(chuàng)了運(yùn)用酶標(biāo)記免疫技術(shù)進(jìn)行液體標(biāo)本中微量物質(zhì)測(cè)定的實(shí)驗(yàn)方法。其原理是抗原或抗體的固相化及抗原抗體的酶標(biāo)記。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，由此進(jìn)行定性或定量分析。該實(shí)驗(yàn)因其靈敏度較高，特異性較好，操作較簡(jiǎn)單，可大批量操作而廣泛應(yīng)用于多種傳染性疾病的篩查工作中。然而，“花板"現(xiàn)象的出現(xiàn)，往往會(huì)給實(shí)驗(yàn)者判讀結(jié)果帶來(lái)

PCR引物設(shè)計(jì)的幾個(gè)原則了解一下2022/09/19: PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段，使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列。如前述，引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬(wàn)象的規(guī)則確保PCR的成功，但遵循某些原則，則有助于引物的設(shè)計(jì)。1.引物的特異性引物與非特異擴(kuò)增序列的同源性不要超過(guò)70%或有連續(xù)8個(gè)互補(bǔ)堿基同源。2.避開(kāi)產(chǎn)物的二級(jí)結(jié)構(gòu)區(qū)某些引物無(wú)效的主要原因是引物重復(fù)區(qū)DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的影響，選擇擴(kuò)增片段時(shí)最好避開(kāi)二級(jí)結(jié)構(gòu)區(qū)域。用有關(guān)計(jì)算機(jī)軟件可以預(yù)測(cè)估計(jì)mRNA的穩(wěn)定二級(jí)結(jié)構(gòu)，有助于選擇模板。實(shí)驗(yàn)表

細(xì)胞培養(yǎng)瓶的正確使用方法2022/09/19: 細(xì)胞培養(yǎng)瓶應(yīng)該怎么使用，遠(yuǎn)慕生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器等。細(xì)胞培養(yǎng)瓶使用方法：1.擰開(kāi)蓋子，用傾斜或者泵打的方式將培養(yǎng)基注入細(xì)胞工廠內(nèi)，細(xì)胞懸液緩慢流入細(xì)胞工廠各層中。蓋上蓋子，靜止。2.緩慢將細(xì)胞工廠測(cè)立，有加液口的一側(cè)背向自己，靜置使細(xì)胞懸液緩慢均勻流入各層中。3.側(cè)向旋轉(zhuǎn)90度，保持進(jìn)液口朝上，靜置使細(xì)胞懸液緩慢均勻流入各層中。4.雙手握住進(jìn)液口的一

檢測(cè)報(bào)告數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確？來(lái)看看原因吧！2022/09/19: 檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)無(wú)誤，是開(kāi)展進(jìn)一步分析論證的基石。近年來(lái)，檢測(cè)報(bào)告數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生，問(wèn)題主要出在哪里呢？檢驗(yàn)和計(jì)算粗心大意檢驗(yàn)是一個(gè)需要專注的過(guò)程，稍有疏忽，就容易出現(xiàn)差錯(cuò)。檢驗(yàn)人員在檢驗(yàn)及數(shù)據(jù)計(jì)算過(guò)程中接聽(tīng)手機(jī)的現(xiàn)象非常普遍，加之其他的粗心造成檢驗(yàn)失誤的案例也時(shí)有發(fā)生。一旦出現(xiàn)這種情況，將直接導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)差錯(cuò)。臨界值的處理有偏差在檢驗(yàn)過(guò)程中，由于測(cè)量不確定度的存在，可能會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)項(xiàng)目在臨界值的判斷時(shí)有偏差。對(duì)于有臨界值的檢驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)組織由不同檢驗(yàn)人員或者儀器設(shè)備進(jìn)行多次的比對(duì)試驗(yàn)，確

關(guān)于基因重組的自然重組的介紹2022/09/16: 自然界不同物種或個(gè)體之間的基因轉(zhuǎn)移和重組是經(jīng)常發(fā)生的,它是基因變異和物種進(jìn)化的基礎(chǔ)。自然界的基因轉(zhuǎn)移的方式有：接合作用：當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞、或細(xì)菌通過(guò)菌毛相互接觸時(shí),質(zhì)粒DNA就可從一個(gè)細(xì)胞（細(xì)菌）轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞(細(xì)菌）,這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為接合作用（conjugation）。轉(zhuǎn)化作用（transformation)通過(guò)自動(dòng)獲取或人為地供給外源DNA,使細(xì)胞或培養(yǎng)的受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型。轉(zhuǎn)導(dǎo)作用：當(dāng)病毒從被感染的（供體）細(xì)胞釋放出來(lái)、再次感染另一（受體）細(xì)胞時(shí),發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的D

使目的基因穩(wěn)定表達(dá)為啥要借助質(zhì)粒？2022/09/16: （1）轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)人受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程（2）①啟動(dòng)子是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)．②tms基因能夠編碼生長(zhǎng)素，tmr基因能夠編碼細(xì)胞分裂素，這兩種激素能夠促進(jìn)植物的生長(zhǎng)．因此人工改造時(shí)用限制酶Ⅰ處理，其目的之一是除去或破壞質(zhì)粒上的tmr、tms，保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無(wú)限分裂和生長(zhǎng)；另外只有一個(gè)插入位點(diǎn)，也有利于目的基因（或外源DNA）準(zhǔn)

PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶（雜帶）解決方法2022/09/16: 擴(kuò)增產(chǎn)物出現(xiàn)多條帶(雜帶)1)引物用量偏大，引物的特異性不高。應(yīng)調(diào)換引物或降低引物的使用量。2)循環(huán)的次數(shù)過(guò)多。適當(dāng)增加模板的量，減少循環(huán)次數(shù)。3)酶的用量偏高或酶的質(zhì)量不好。應(yīng)降低酶量或調(diào)換另一來(lái)源的酶。4)退火溫度偏低，退火及延伸時(shí)間偏長(zhǎng)。應(yīng)提高退火溫度，減少變性與延伸時(shí)間，也可采用二種溫度的PCR擴(kuò)增。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。5)樣品處理不當(dāng)。6)Mg2+濃度偏高。因適當(dāng)調(diào)整Mg2+使用濃度。7)若為PCR試劑盒。也可能時(shí)試劑盒本身質(zhì)量有問(wèn)題。8)復(fù)制提前終止。使用非熱

質(zhì)粒中的內(nèi)毒素可能會(huì)影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率！2022/09/16: 轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過(guò)物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介導(dǎo)方法中脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法較為常用；生物介導(dǎo)方法現(xiàn)在比較多見(jiàn)的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。什么是內(nèi)毒素？細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁上的一種脂多糖（LipopolySaccharide,LPS）和蛋白的復(fù)合物，當(dāng)細(xì)菌裂解時(shí)便會(huì)大量釋放出來(lái)。內(nèi)毒素單位為EU。內(nèi)毒素對(duì)試驗(yàn)的影響內(nèi)毒素存在極大程度地影響轉(zhuǎn)染效率。同時(shí)內(nèi)毒素還可能激活免疫細(xì)胞的

遠(yuǎn)慕分享：誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法2022/09/15: 在體外培養(yǎng)條件下，動(dòng)物細(xì)胞會(huì)自發(fā)融合，但是頻率極低。因此，一般都需要添加具有誘導(dǎo)細(xì)胞融合效應(yīng)的生物或化學(xué)藥劑，或者采用電融合技術(shù)，人為地促進(jìn)細(xì)胞融合。病毒誘導(dǎo)融合病毒是最早采用的融合劑。常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的病毒有仙臺(tái)病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等，其中仙臺(tái)病毒*常用。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內(nèi)酯滅活，使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性。用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的優(yōu)點(diǎn)：融合率較高，對(duì)各種動(dòng)物細(xì)胞都適宜，且仙臺(tái)病毒能在雞胚中大量繁殖，容易培養(yǎng)；缺點(diǎn)：仙臺(tái)病毒不穩(wěn)定，在保

固液萃取和液液萃取的特點(diǎn)分析2022/09/15: 1、固液萃?。豪萌軇┦构腆w物料中地可溶性物質(zhì)溶解于其中而加以分離地操稱為固液萃取,又稱浸取.水是常用地一種溶劑,如泡茶、煎中藥和從甜菜中提取糖等.隨著工業(yè)地發(fā)展和人民生活水平地提高,固液萃取地應(yīng)用領(lǐng)域越來(lái)越廣泛,如從植物種子中提取食油,從各種植物中提取中草藥制劑以及生產(chǎn)速溶咖啡、食品調(diào)味料和食品添加劑等.幾乎所有的固液萃取都要現(xiàn)對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理,一般是將原料粉碎,制成細(xì)粒狀或薄片狀.物料中的有用成分（溶質(zhì)）分散在不溶性固體（擔(dān)體）中,溶劑和溶質(zhì)必須通過(guò)擔(dān)體的細(xì)孔才能將溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到固體外的溶液中,

熒光染料標(biāo)記實(shí)驗(yàn)串色了怎么辦？2022/09/15: 在兩種或兩種以上熒光素之間，如果熒光發(fā)射峰很近，那么熒光光譜彼此會(huì)有部分重疊，檢測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)一種熒光素的信號(hào)擴(kuò)散到另一熒光通道的情況。這種現(xiàn)象稱為串色或熒光光譜交叉(crosstalk)。避免或排除光譜交叉干擾的方法通常有以下幾種：1.使用幾種熒光素時(shí)，盡量選擇相互之間無(wú)光譜交叉的熒光素。2.降低標(biāo)記熒光強(qiáng)度：樣品的一種或幾種熒光強(qiáng)度太高，有時(shí)會(huì)導(dǎo)致光譜交叉出現(xiàn)。采用降低標(biāo)記物濃度、縮短標(biāo)記時(shí)間及調(diào)整熒光素介質(zhì)等方法可降低樣品熒光強(qiáng)度。3.采用序列掃描方法：主要是指用不同波長(zhǎng)激光輪流照射樣品，同

溶液的顏色與澄清度介紹說(shuō)明2022/09/15: 溶液顏色顏色是通過(guò)眼、腦和我們的生活經(jīng)驗(yàn)所產(chǎn)生的一種對(duì)光的視覺(jué)效應(yīng)。人對(duì)顏色的感覺(jué)不僅僅由光的物理性質(zhì)所決定，比如人類對(duì)顏色的感覺(jué)往往受到周圍顏色的影響。有時(shí)人們也將物質(zhì)產(chǎn)生不同顏色的物理特性直接稱為顏色。濁度是指溶液對(duì)光線通過(guò)時(shí)所產(chǎn)生的阻礙程度，它包括懸浮物對(duì)光的散射和溶質(zhì)分子對(duì)光的吸收。水的濁度不僅與水中懸浮物質(zhì)的含量有關(guān)，而且與它們的大小、形狀及折射系數(shù)等有關(guān)。個(gè)人的理解是濁度是顏色的一種特殊表現(xiàn)形式。顏色：定性分析,檢測(cè)場(chǎng)景應(yīng)在均勻的自然光下，標(biāo)準(zhǔn)的白平衡為背景，（標(biāo)準(zhǔn)白平衡背景的面積應(yīng)

你知道什么樣的試劑才能做基準(zhǔn)試劑？2022/09/14: 【條件】基準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)該符合以下要求：①組成與它的化學(xué)式嚴(yán)格相符。②純度足夠高，級(jí)別一般在優(yōu)級(jí)純以上。③應(yīng)該很穩(wěn)定，可以長(zhǎng)期保存。④參加反應(yīng)時(shí)，按反應(yīng)式定量地進(jìn)行，不發(fā)生副反應(yīng)。⑤有較大的分子量，在配制標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)可以減少稱量誤差。【常見(jiàn)物質(zhì)】一般常用的基準(zhǔn)試劑有：三氧/化二砷、金屬銅、氨基磺酸、重鉻酸鉀、鄰苯二甲酸氫鉀、碘/酸鉀、氯化鈉、碳酸鈉、草酸鈉、氟化鈉、金屬鋅、草酸、硝/酸銀等。遠(yuǎn)慕試劑處理提示：1、購(gòu)買后，請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)。2、做好預(yù)防顛倒，摔壞的措施和管理體制。3、在使用前再次

干貨！化學(xué)試劑的規(guī)格和標(biāo)準(zhǔn)2022/09/14: 一、化學(xué)試劑規(guī)格試劑規(guī)格又稱試劑級(jí)別或類別。一般按實(shí)際的用途或純度、雜質(zhì)含量來(lái)劃分規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)。目前，國(guó)外試劑廠生產(chǎn)的化學(xué)試劑的規(guī)格趨向于按用途劃分。試劑規(guī)格按用途劃分的優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)單明了，從規(guī)格即可知此試劑的用途，用戶不必在使用哪一種純度級(jí)和試劑上反復(fù)考慮。我國(guó)的試劑規(guī)格基本上按純度劃分，共有高純、光譜純、基準(zhǔn)、分光純、優(yōu)級(jí)純、分析和化學(xué)純等7種。國(guó)家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級(jí)純、分級(jí)純和化學(xué)純3種：（1）優(yōu)級(jí)純又稱一級(jí)品，這種試劑純度最高，雜質(zhì)含量最/低，適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作用

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一定要在有效期內(nèi)使用嗎2022/09/14: 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的有效期是研制單位根據(jù)穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)，為了確保標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量值及不確定度的可靠性而確定的，因此務(wù)必在有效期內(nèi)使用。到期后未使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)也許仍舊穩(wěn)定，對(duì)于一些批量較大、穩(wěn)定性周期較長(zhǎng)（如五年以上）的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，研制單位有時(shí)會(huì)提供延長(zhǎng)有效期的服務(wù)，但是在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的穩(wěn)定性無(wú)法得到研制單位保證的情況下，用戶如果繼續(xù)使用該標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，需自行承擔(dān)責(zé)任。優(yōu)勢(shì)：1，全：公司提供上萬(wàn)種產(chǎn)品，涵蓋了生物試劑，elisa試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基，原裝耗材等，基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。2，新：產(chǎn)品更新速度較

常見(jiàn)的輔酶你知道哪些？2022/09/14: 硫胺素即維生素B1。它在生物體內(nèi)的輔酶形式是硫胺素焦磷酸(TPP)。硫胺素焦磷酸過(guò)去也稱為輔羧酶。它在動(dòng)物糖代謝中起著重要作用，例如丙酮酸在脫羧作用時(shí)需要它。在TPP缺少的情況下，代謝中間物丙酮酸不能順利脫羧會(huì)積聚于血液和組織中而出現(xiàn)神經(jīng)炎癥狀。TPP還是其他酶例如-酮酸氧化酶、轉(zhuǎn)酮醇酶的輔酶。TPP催化的酶反應(yīng)還需要有鎂離子的存在。煙酰胺是一系列酶類的輔酶的前體。很早就知道煙酰胺可以防止糙皮病。1904年已知酒精發(fā)酵時(shí)不能缺少一種叫輔酶Ⅰ的物質(zhì)，1933年這種輔酶Ⅰ被分離出來(lái)。1934年德國(guó)生

你知道為什么你的化學(xué)試劑變質(zhì)那么快？2022/09/13: 化學(xué)試劑變質(zhì)的原因和措施試劑變質(zhì)的原因引發(fā)和促使化學(xué)試劑發(fā)生變化的原因，大致可歸納如下。1、揮發(fā)2、升華3、潮解4、風(fēng)化5、濃縮和析晶6、水解7、分解8、氧化和還原9、非氧化——還原反應(yīng)10、聚合和縮合11、光化學(xué)反應(yīng)12、霉變?nèi)绾晤A(yù)防化學(xué)試劑變質(zhì)a.密封這是最/普遍通用的方法。試劑瓶的材料和密封程度應(yīng)根據(jù)試劑性質(zhì)而定。如：強(qiáng)腐蝕的“三酸”和液溴，可用帶磨口玻璃的試劑瓶，或是有塑料襯墊的螺旋蓋的玻璃瓶，氫氟酸則應(yīng)密封貯藏在銀制或塑料制容器內(nèi)，等等。密封適用于易揮發(fā)、升華、潮解、稀釋、風(fēng)化、水解和

霉菌培養(yǎng)太容易污染了，遠(yuǎn)慕教你解決方法！2022/09/13: 自霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)正式開(kāi)始實(shí)施以來(lái),正置培養(yǎng)容易造成環(huán)境污染，一直比較困擾大家，很多小伙伴們反應(yīng)國(guó)標(biāo)霉菌正置培養(yǎng)容易污染，今天遠(yuǎn)慕生物小編就來(lái)為大家分析一下這個(gè)問(wèn)題。GB4789.15-2016相比GB4789.15-2010，最大的區(qū)別可能就在于對(duì)平皿的培養(yǎng)方式。2016版的國(guó)標(biāo)在5.2中要求：瓊脂凝固后，正置平板，置28℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察并記錄培養(yǎng)至第5d的結(jié)果。其實(shí)針對(duì)這一條，需要注意兩點(diǎn)：第一，是需要對(duì)平板進(jìn)行觀察的，不能直接培養(yǎng)至第5天計(jì)數(shù)，因?yàn)槊咕奶厥庑裕谂囵B(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生

霉菌和酵母檢測(cè)怎么鑒定？那種檢測(cè)方便？2022/09/13: 霉菌和酵母的檢測(cè)是我們食品微生物檢測(cè)的一個(gè)重要項(xiàng)目。霉菌是絲狀真菌的俗稱，絨毛狀、絮狀或蛛網(wǎng)狀的真菌菌落；沒(méi)有菌絲的稱之為酵母。這并非分類學(xué)名詞。相對(duì)于細(xì)菌來(lái)說(shuō)，霉菌和酵母生長(zhǎng)緩慢，競(jìng)爭(zhēng)能力較弱，故培養(yǎng)霉菌和酵母時(shí)要注意形成抑制細(xì)菌的環(huán)境。下面是我們?cè)跈z測(cè)霉菌酵母時(shí)遇到的幾個(gè)問(wèn)題：1、計(jì)數(shù)前的鑒定計(jì)數(shù)霉菌酵母結(jié)果前是需要鑒定菌落是否是真菌的。霉菌的形態(tài)相對(duì)比較明顯，不容易被混淆。但是對(duì)于酵母來(lái)說(shuō)，培養(yǎng)基里抑制細(xì)菌的成分，例如氯霉素在此的劑量不足以抑制所有的細(xì)菌種類。部分細(xì)菌會(huì)在孟加拉紅培養(yǎng)基上生

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