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細胞培養(yǎng)重要名詞解析2021/10/11

飽和密度(Saturationdensity)：在特殊培養(yǎng)條件下，每平方厘米(單層培養(yǎng))或每毫升細胞懸液內(nèi)可達到的最大細胞數(shù)。匯合(Confluent)：指細胞增殖生長相互連接成片占據(jù)所有底物面積現(xiàn)象。超匯合(Superconfluent)：單層細胞培養(yǎng)附在底物上生長，匯合后發(fā)展成多層狀態(tài)。傳代(Passage)，也稱再培養(yǎng)(Subculture)，把一瓶培養(yǎng)細胞全部或分成幾份再培養(yǎng)的過程。單層細胞培養(yǎng)(Monolayerculture)：培養(yǎng)細胞在底物上生長成單層的培養(yǎng)法,即二維培養(yǎng)方法。代或

?PCR實驗過程中需要注意的問題2021/10/08

1、如何確定引物的濃度？前面我們說到，引物一般交由試劑公司合成，有時候具體的濃度我們也不能確定。有些人喜歡稀釋十倍，有些人喜歡稀釋二十倍。我個人認為比較穩(wěn)妥的做法是在每次拿到反轉(zhuǎn)的cDNA后，先會稀釋3倍左右，然后利用管家基因做一次RT-PCR，循環(huán)數(shù)一般為25循環(huán)，鑒定一下具體濃度，再決定最后的稀釋倍數(shù)。2、合成的引物是我們想要的引物嗎？一般來說在拿到很多引物的時候，可以通過普通的PCR看看是否是單一條帶，鑒定一下引物的特異性。如果實驗室不差錢，則可以通過溶解曲線對所有的引物的特異性做一次鑒定

常見的菌株功能作用2021/09/27

不同的菌種有不同的作用，以下是幾種常見的菌株功能作用1、動物雙歧桿菌調(diào)節(jié)腸道菌群，改善慢性腹瀉。2、乳雙歧桿菌減輕腹瀉，均衡胃腸道菌群。3、鼠李糖乳桿菌增強寶寶對過敏原的耐受力，預(yù)防過敏（哮喘、濕疹等），緩解牛奶過敏引起的濕疹。4、鼠李糖乳桿菌分解酪蛋白，提升對牛奶、花生的耐受力。5、乳雙歧桿菌對治療腹瀉的臨床實驗研究最多，可有效調(diào)節(jié)腸道，提高免疫力。6、瑞士乳桿菌具有較強的蛋白水解能力，調(diào)節(jié)腸道菌群能力，調(diào)節(jié)免疫力的功效，還具有產(chǎn)生細菌素或生物活性肽的潛能。7、嬰兒雙歧桿菌具有抗過敏、抗腫瘤、

ELISA試劑盒?包被如何選取用抗原還是抗體2021/09/24

ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)包被用抗體或抗原選?。海ㄒ唬┌挥每乖篍LISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養(yǎng)物等，須經(jīng)提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取，一般的細菌和病毒抗原可以從其培養(yǎng)物中提取，蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中提取等（例如AFP從臍帶血或胎肝中提?。?。重組抗原是抗原基因在質(zhì)粒體中表達的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或酵母菌為質(zhì)粒體。重組抗

一步染料法（YBR No-ROX One Step Kit）特點2021/09/15

BIOG產(chǎn)品特點1.逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個反應(yīng)管內(nèi)一步完成，操作簡便快速；2.使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，有效避免了非特異擴增；3.反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，靈敏度高，最di可檢測1pg總RNA中的目標片段,特別適合低拷貝RNA的檢測。BIOG產(chǎn)品介紹BIOGHCElitefastSYBRNo-ROXOneStepKit專為以RNA為模板的定量PCR檢測而設(shè)計。使用BIOGHCElitefastSYBRNo-ROXOneStepKit，逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個反應(yīng)管內(nèi)一步完成，中間無

有關(guān)PCR實驗操作步驟2021/09/07

PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡稱。是一種分子生物學技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達納米級別。PCR實驗樣本采集、存放及運輸：1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。PCR實

三種常見抗體保存方法2021/09/02

抗體由于性質(zhì)和所使用的儲存條件等各有不同，其保質(zhì)期可能從幾周到幾年?？贵w能否正確保存，直接決定了抗體的活性和使用效果。每個抗體有其*的保存最佳條件，但我們依然可以總結(jié)抗體保存的一般準則以及一些注意事項?？贵w必須存放在適當?shù)臏囟群蚿H值范圍。為了維持蛋白質(zhì)的活性，以及防止其聚集，經(jīng)常保存在一定濃度的甘油，蔗糖，或類似的物質(zhì)里面。如果抗體保存得當，大部分抗體活性都可以維持數(shù)月甚至數(shù)年。(1)多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而，一旦抗體被純化后，儲存在50%的甘油中于-

配制培養(yǎng)基過程步驟2021/08/25

培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）以及生長素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素、色素、激素和血清。1、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)總體而言，所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源，但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的元機物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的

一起了解抗體與免疫球蛋白2021/08/19

抗體就是具有特異性的免疫球蛋白。特異性是指針對特定微生物或異體蛋白具有的抗性，也叫中和性。一抗和二坑的區(qū)別：*抗體就是平常所說的抗體，即能和抗原特異性結(jié)合。第二抗體是能和抗體結(jié)合的，即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。一抗是針對抗原的抗體，二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產(chǎn)生抗體。也就是說，抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，由B細胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團，而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團（底物和二抗）。

ELISA實驗過程中的常見問題解答2021/08/11

ELISA實驗中會遇到很多問題，不是這有點小問題，就是那有點小問題，那該怎么辦呢？以下七點是我們在多年的實驗過程中遇到問題的總結(jié)：Q1.標曲不顯色或顯色很弱，樣本顯色溶解標準品以及倍比稀釋時，未渦旋震蕩或不夠充分。標準品溶解、倍比稀釋時均需要渦旋震蕩以保證充分混勻。單純依靠移液器反復(fù)吹打，效率較低、效果也不一定最佳。Q2.標曲和樣本均不顯色在孵育階段靜置在桌面上，這樣非常不利于抗原抗體之間的充分接觸，導(dǎo)致顯色偏弱，推薦孵育階段，使用ELISA專用的微孔板振蕩器，調(diào)至合適的頻率，使抗原抗體充分接觸

有關(guān)細胞類型講解2021/08/03

按培養(yǎng)時的性質(zhì)分的，貼壁生長的叫貼附性細胞。有些細胞不貼壁，只能懸浮培養(yǎng)，如血細胞。細胞類型根據(jù)是否附于支持物上生長的特性，分為貼附型、懸浮型。貼附型：細胞貼附在支持物表面生長，只依賴貼附才能生長的細胞叫做貼附型細胞(Anchorrage-dependentcells)這種現(xiàn)象與細胞分化有關(guān)。貼附型細胞的分型：1.成纖維型細胞:(fibroblast)來自中胚層特點:與體內(nèi)成纖維細胞形態(tài)相似,胞體梭型或不規(guī)則三角形,中央有圓形核,胞質(zhì)向外伸出2~3個長短不同的突起。細胞在生長時呈放射狀,漩渦或火

實驗數(shù)據(jù)結(jié)果有差異原因分析2021/07/28

一、數(shù)據(jù)變化趨勢不符合預(yù)期？通?？蛻粼趯嶒炃?，會根據(jù)參考文獻或此前實驗室的相關(guān)測定結(jié)果，對實驗結(jié)果有一個預(yù)估變化趨勢。但是，實際測定的數(shù)據(jù)變化有時卻并不符合預(yù)期。1.先查找實驗技術(shù)問題，以及計算公式和單位有沒有問題；2.再找樣本質(zhì)量有沒有問題；3.若兩者都沒有問題，我們就要思考實驗方案，有時不符合預(yù)期的結(jié)果反而意味著研究的新意，甚至是新發(fā)現(xiàn)。4.如果選擇了測定系列指標，就可以通過相關(guān)指標的變化趨勢是否一致，來判斷該指標的變化是否正常，因為同時幾個相關(guān)指標變化都不正常的可能性比較小。二、為什么檢測

免疫熒光實驗操作指南2021/07/21

免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術(shù)，是標記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù)。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合，利用抗原抗體反應(yīng)進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。免疫熒光實驗操作步驟：一、固定和透化1.在培養(yǎng)板中將已爬好細胞的蓋玻片用1×PBS浸洗3次，每次3min。2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min，1×PBS浸洗玻片3次，每次3min。3.0.5%TritonX-10

生化試劑盒的購買和使用注意事項2021/07/14

生化試劑盒的購買和使用注意事項：1、、購買試劑盒前請弄清以下問題：①根據(jù)取樣記錄，確認樣品情況。主要包括樣品的種類、數(shù)量和樣品保存狀況。②根據(jù)實驗設(shè)計或文獻報道，確認測定哪些指標。測定指標最好是成系列的，這樣便于得出明確結(jié)論，也好發(fā)表文章。③提前了解所在實驗室的儀器設(shè)備情況，避免因為儀器設(shè)備不能滿足，造成試劑盒購買后無法使用。2、購買咨詢：①客戶提供檢測樣本對象、研究目的和測定指標，我們提供相關(guān)試劑盒的情況和所需儀器設(shè)備以及自備用品清單，確認哪些指標客戶能夠通過購買我們的試劑盒進行測定。②客戶提

詳解細菌的轉(zhuǎn)化關(guān)鍵過程2021/07/07

染色體轉(zhuǎn)化過程包括有轉(zhuǎn)化能力的染色體DNA片段的吸附、吸收和整合3個階段。外源DNA首先吸附在細菌細胞表面的一些接受位點上。肺炎雙球菌和枯草桿菌等細胞的接受位點沒有專一性，它們能吸附同種的DNA，也能吸附大腸桿菌的DNA。流感嗜血桿菌的接受位點則只能吸附近緣細菌的DNA。DNA在和細菌剛接觸時可以被洗去，在穩(wěn)定吸附以后便不能洗去，但還能被核酸酶水解。DNA被細胞吸收以后便不能被外源的核酸酶水解。能吸附的DNA主要是雙鏈狀態(tài)的，在通過細胞膜進入細胞的吸收過程中DNA分子轉(zhuǎn)變?yōu)閱捂?，并以這種形式整合

牛棒桿菌PCR試劑盒實驗說明2021/07/01

樣本采集、存放及運輸：1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。組成及試劑配制:1、酶標板：一塊（96孔）2、標準品（凍干品）：2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200U/L，1

分享大鼠小鼠五種采血方式2021/06/23

大鼠小鼠五種采血方式：1.剪尾采血小鼠每次采血量0.1ml，大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指從背部捉住鼠頸部皮膚，將鼠頭朝下，鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。擦干尾部，再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm，用試管接流出的血液，同時自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球壓榨止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠頸部皮膚，輕壓在實驗臺上，取側(cè)臥位，左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓，使眼球杰出。用眼科彎鑷迅速夾去眼

抗體知識小課堂2021/06/17

抗體是一種蛋白質(zhì)，是由漿細胞產(chǎn)生的。漿細胞又叫效應(yīng)B細胞。B細胞就是B淋巴細胞，淋巴細胞屬于白細胞。比如體內(nèi)的B淋巴細胞，在受到外來的物質(zhì)，如注射的乙肝疫苗刺激后會轉(zhuǎn)變分化成為漿細胞，產(chǎn)生專門針對乙肝病毒的蛋白質(zhì)。這個起刺激作用的乙肝病毒就作為抗原，漿細胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)就叫抗體。當乙肝病毒再次進入機體后或者被別人傳染后，抗體就會馬上識別出，就會做出反應(yīng)，消滅外來的乙肝病毒，保護人體不得乙肝?？贵w不都是對人體有保護作用的，有時候還會危及人的生命。比如對青霉素嚴重過敏的病人，第一次接觸青霉素后不會過敏

植物蛋白提取試劑操作說明2021/06/09

植物蛋白提取試劑適用于多種植物根，莖，葉及果實等的新鮮或凍存組織。植物組織成分復(fù)雜，含有較多酚類物質(zhì)、多糖、色素、次生代謝物質(zhì)等，致使植物蛋白質(zhì)的分離提取變得困難和復(fù)雜。本試劑采用優(yōu)化的試劑和程序，能有效提取多種植物中的可溶性和疏水性蛋白成分，有效去除植物組織所含的多酚、多糖、醌、色素、脂質(zhì)、次生代謝物質(zhì)等干擾蛋白質(zhì)研究的成分，使提取的蛋白質(zhì)處于最-佳的活性狀態(tài)和檢測狀態(tài)，適應(yīng)于酶學活性測定，單向及雙向蛋白電泳，WesternBlot和免疫共沉淀分析等蛋白質(zhì)研究實驗。組成和規(guī)格：無色透明的提取試

生化試劑質(zhì)量的好壞辨別總結(jié)2021/05/26

生化試劑質(zhì)量的好壞辨別總結(jié)：1、實驗純（LR，黃標簽）：主成分含量高，純度較差，雜質(zhì)含量不做選擇，只適用于一般化學實驗和合成制備。2、當量試劑（3N、4N、5N）：主成分含量分別為99.9%、99.99%、99.999%以上。3、指示劑和染色劑（ID或SR，紫標簽）：要求有*的靈敏度。4、光譜純：主要成分純度為99.99%5、質(zhì)量級別：優(yōu)級純（GR，綠標簽）：主成分含量很高、純度很高，適用于分析和研究工作，有的可作為基準物質(zhì)。6、分析純（AR，紅標簽）：主成分含量很高、純度較高，干擾雜質(zhì)很低，適