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抗原抗體的不同與抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)2022/08/01: 抗原，是指可以誘發(fā)免疫反應(yīng)的物質(zhì)，是可以誘導(dǎo)人體形成抗體的一個(gè)物質(zhì)。是指能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生（特異性）免疫應(yīng)答，并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)外結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)（特異性反應(yīng)）的物質(zhì)?？乖幕咎匦杂袃煞N，一是誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的能力，也就是免疫原性，二是與免疫應(yīng)答的產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)，也就是抗原性?？贵w，是指機(jī)體由于抗原的刺激，而產(chǎn)生的具有保護(hù)性作用的一個(gè)蛋白質(zhì)。一般抗體都是由漿細(xì)胞分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別、中和外來物質(zhì)。也可以這么理解，抗原和抗體是一對(duì)的?？乖峭鈦砦镔|(zhì)，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，而這個(gè)

ELISA標(biāo)準(zhǔn)?加樣方法2022/07/25: 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）因其具有敏感性高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于臨床檢測(cè)中的各種抗原和抗體的測(cè)定。盡管ELISA操作簡(jiǎn)單，但是小實(shí)驗(yàn)里也蘊(yùn)含著大文章，ELISA操作各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，稍不注意就會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果。因ELISA的靈敏度較高，則應(yīng)該按規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù)，以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。加樣品時(shí)，單孔用量要求：≥20ul/指標(biāo)，如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥60ul/指標(biāo)。如果用量充足，最好提供50ul/孔/指標(biāo)。具體用量也

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線注意事項(xiàng)2022/07/18: ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線注意事項(xiàng)：1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從談起。2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度最陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。3、最好采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)

PCR引物設(shè)計(jì)的幾個(gè)原則2022/07/12: 引物設(shè)計(jì)的原則：1、引物長(zhǎng)度：一般為15-30bp，常用的是18-27bp，但不能大于38，因?yàn)檫^長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致其延伸溫度大于74℃，即Taq酶的最適溫度。2、引物的特異性：引物與非特異擴(kuò)增序列的同源性不要超過70%或有連續(xù)8個(gè)互補(bǔ)堿基同源。3、序列Tm值：引物的Tm值一般控制在55-60度,盡可能保證上下游引物的Tm值一致,一般不超過2度。退火溫度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5～8)4、G+C含量：有效引物中(G+C)的比例為40-60%，過高或過低都不利于引發(fā)反應(yīng)。上下游引物的GC含量不能

預(yù)防化學(xué)試劑變質(zhì)有效辦法2022/07/05: 化學(xué)試劑在貯存、運(yùn)輸和銷售過程中會(huì)受到溫度、光輻照、空氣和水份等外在因素的影響，容易發(fā)生潮解、霉素、變色、聚合、氧化、揮發(fā)、升華和分解等物理化學(xué)變化，使其失效而無法使用。因此要采用合理的包裝，適當(dāng)?shù)馁A存條件和運(yùn)輸方式，保證化學(xué)試劑在貯存、運(yùn)輸和銷售過程中不變質(zhì)。對(duì)一些對(duì)貯存和運(yùn)輸有特殊要求的應(yīng)按特殊要求辦理。有些化學(xué)試劑有一定的保質(zhì)期，使用時(shí)一定要注意。下面總結(jié)預(yù)防化學(xué)試劑變質(zhì)有效辦法：1、密封這是*普遍通用的方法。試劑瓶的材料和密封程度應(yīng)根據(jù)試劑性質(zhì)而定。如：強(qiáng)腐蝕的“三酸”和液溴，可用帶磨口

一抗的選擇需要考慮方面2022/06/28: 一抗選擇的好壞對(duì)免疫組化實(shí)驗(yàn)的至關(guān)重要，一抗盡量選擇單克隆抗體，還要注意其抗體來源（兔抗、鼠抗或者其他）要與二抗匹配。一抗的選擇要點(diǎn)和技巧1、單克隆和多克隆抗體的選擇由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合，就像導(dǎo)dan精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面，即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中，一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對(duì)小，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低；而多克隆抗體

細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢具體的原因總結(jié)2022/06/21: 細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的常見原因:1、培養(yǎng)基可能缺乏細(xì)胞生長(zhǎng)所需的某種因子。通常情況下，當(dāng)小伙伴購(gòu)買細(xì)胞，并沒有按照ATCC或國(guó)內(nèi)細(xì)胞庫(kù)推薦的方法制備培養(yǎng)基，使用實(shí)驗(yàn)室兄弟姐妹使用的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。解決方法一般是按照推薦的方法制備培養(yǎng)基，或直接購(gòu)買培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基。2、細(xì)菌、支原體、真菌等污染:雖然培養(yǎng)基中通常添加雙抗體(青霉素和鏈霉素)，但如果無菌操作觀念不強(qiáng)，仍有可能造成污染。處理方法:如果有冷凍細(xì)胞，可以丟棄污染細(xì)胞。當(dāng)然，丟棄并不是隨意的，扔進(jìn)垃圾桶。應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)定進(jìn)行。然后復(fù)蘇培養(yǎng)物

胎牛血清和新生牛血清三方面差異2022/06/14: 血清是一種純天ran培養(yǎng)基，含有細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的多種營(yíng)養(yǎng)成分，如蛋白質(zhì)、多肽等，多用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物制品及診斷試劑的。血清的主要成分是蛋白質(zhì)，血清的組成成分與含量常常與供血?jiǎng)游镄詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件有關(guān)。那常見胎牛血清和新生牛血清差異：一、取血年齡：牛血清按照牛取血時(shí)間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡(jiǎn)稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來的胎牛。國(guó)產(chǎn)胎牛血清（并無明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時(shí)，且未進(jìn)行哺乳（unsuckled）進(jìn)食的

保證校準(zhǔn)的緩沖液準(zhǔn)確性注意事項(xiàng)2022/06/07: 用于校準(zhǔn)的緩沖液是非常精確的溶液，擁有固定的數(shù)值和精度。緩沖液瓶開封后，為了保證校準(zhǔn)的準(zhǔn)確性，要注意下面事項(xiàng)：1.第一次使用緩沖液時(shí)，在包裝上標(biāo)明日期，保證緩沖液包裝的密封性。2.不要把使用過的緩沖液倒回原瓶，或把不同的緩沖液混合在一起。3.常溫下儲(chǔ)存緩沖液，儲(chǔ)存時(shí)避免陽(yáng)光直射4.校準(zhǔn)前請(qǐng)清洗電極，不要在原瓶中直接校準(zhǔn)5.絕對(duì)不要使用過期的或污染的緩沖液6.緩沖液到期應(yīng)及時(shí)更換新的緩沖液

分析鑒定單克隆抗體的性質(zhì)常見的方法2022/05/31: 當(dāng)獲得多個(gè)雜交瘤細(xì)胞株時(shí)，要了解哪一株是*適用的，則一定要通過各種鑒定，分析常見的方法有：一、特異性測(cè)定把與相應(yīng)抗原有關(guān)的物質(zhì)同McAb進(jìn)行多種免疫學(xué)檢測(cè)，鑒定McAb的特異性。這直接關(guān)系到McAb應(yīng)用的可靠性。二、抗體效價(jià)測(cè)定效價(jià)以腹腔積液或培養(yǎng)液的稀釋度表示，稀釋度越高，則抗體效價(jià)也越高。在凝集反應(yīng)中，腹腔積液效價(jià)可達(dá)5萬(wàn)以上；在ELISA中，腹腔積液效價(jià)可達(dá)100萬(wàn)以上。如ELISA效價(jià)低于10萬(wàn)，用于診斷測(cè)定將不會(huì)達(dá)到很高的敏感度，應(yīng)重新制備。三、Ig類型測(cè)定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗

單克隆抗體技術(shù)具體過程2022/05/23: 單克隆抗體技術(shù)B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下，能夠分化、增殖形成具有針對(duì)這種抗原分泌特異性抗體的能力。B細(xì)胞的這種能力和量是有限的，不可能持續(xù)分化增殖下去，因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的。將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)一步克隆化，這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤細(xì)胞的無限分裂的能力，又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力。將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠腹水內(nèi)即可獲得大量的高效、單一的特異性抗體。這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù)。單克隆抗體技術(shù)具體過程：1、免

分析細(xì)胞狀態(tài)不好原因2022/05/18: 分析細(xì)胞狀態(tài)不好原因：一、胰酶消化過度在用胰酶消化細(xì)胞使其不貼壁的時(shí)候，如果消化時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜表面蛋白也被破話，嚴(yán)重者可致細(xì)胞破碎、死亡。所以胰酶消化不宜過久。如果消化了好久（具體消化時(shí)間視細(xì)胞而定）在鏡下看還有很多細(xì)胞貼壁，可能是胰酶消化力弱。增強(qiáng)胰酶消化能力的方法：消化前用PBS洗以去除血清中的各種蛋白；在胰酶中加入EDTA；在消化前胰酶37攝氏度預(yù)熱。二、傳代比例太低細(xì)胞在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的時(shí)候，除了外源營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其自身也會(huì)分泌促進(jìn)生長(zhǎng)的物質(zhì)。如果一個(gè)皿中細(xì)胞數(shù)量太少，細(xì)胞分泌的營(yíng)養(yǎng)物

豬特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒操作說明2022/05/17: 豬特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒操作說明石榴樹在淡淡的晨霧中，顯得特別精神，石榴果仿佛知道了秋天的到來，它笑了，笑得那樣地欣慰、可愛，紅里透亮的牙齒也露了出來!接下來介紹豬特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒操作說明特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：1.特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到*。2.重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為*。3.靈敏性：該

分享實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑保存辦法2022/05/09: 化學(xué)試劑既要保管好試劑不使蛻變或損耗，又要留意危險(xiǎn)性試劑的du害效果，防止火警、損害以及放射性污染等事端的發(fā)作。想要試驗(yàn)做的好，那么化學(xué)試劑一定要保存的好，萬(wàn)一出現(xiàn)個(gè)什么不小心，那不便是浪費(fèi)了化學(xué)試劑，有耽誤了自己做試驗(yàn)的時(shí)刻，那么以下便是今日為大家總結(jié)的試驗(yàn)室中化學(xué)試劑怎么正確保存的辦法。一、避光其實(shí)在試驗(yàn)室中許多化學(xué)試劑見強(qiáng)光都極易揮發(fā)蛻變，所以為避免試劑遭到光的輻射，應(yīng)選用棕色玻璃瓶，外用黑紙包裹，并儲(chǔ)藏于暗室或遮光的試劑柜中。避光保存適用于能進(jìn)行光化學(xué)反響的試劑，如胺類、酚類、醛類等。二

小鼠腦腸肽elisa檢測(cè)試劑盒操作要點(diǎn)2022/05/05: 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)elisa檢測(cè)試劑盒操作要點(diǎn):1）標(biāo)本的采取和保存：可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本；2）試劑的準(zhǔn)備：所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液；3）加樣：一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。4）保溫：ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)

免疫熒光方法背景染色較深的原因2022/04/24: 免疫熒光方法是最早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理先將已知抗體標(biāo)上英光素以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光從而可確定組織中某種抗原的定位進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣。那實(shí)驗(yàn)背景染色較深的原因有哪些?1、抗體濃度過高一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一。解決辦法是每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試，使每一抗體個(gè)體化找到適

常見ELISA試劑盒有哪些2022/04/19: Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。下面是常見ELISA試劑盒如下：1、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒：如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子，趨化因子，細(xì)胞因子受體，粘附分子，生長(zhǎng)因子，凋亡因子等等。2、自身免疫檢測(cè)elisa試劑盒：如甲狀腺,鹽水可提取核抗原抗體（ENA）,抗核抗體,DNA,抗心磷脂抗體,類風(fēng)濕因子,循環(huán)免疫復(fù)合物,抗胰島細(xì)胞抗體,胰蛋白酶原,

預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的辦法2022/04/13: 預(yù)防是防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的最好辦法。只有預(yù)防工作做在前，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。1、添加抗生素2、從物品、用品消毒滅菌著手細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在無菌試驗(yàn)陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔消毒滅菌。3、從操作者做起a.進(jìn)無菌室前要用肥皂洗手，按規(guī)定穿隔離衣。工作開始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。b.操作者動(dòng)作要輕，必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口，并將瓶口轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼。操作時(shí)盡量不要談話，若打噴嚏或咳嗽應(yīng)轉(zhuǎn)向背面。c.

淺析ELISA四種常見檢測(cè)方法2022/04/07: 1、直接ELISA將抗原固定于ELISA板上，然后用酶標(biāo)抗體直檢測(cè)抗原。相較于其它類型的ELISA實(shí)驗(yàn)，直接ELISA實(shí)驗(yàn)步驟少，檢測(cè)速度快，不需要用到二抗，避免了交叉反應(yīng)，測(cè)定結(jié)果不容易出錯(cuò)。但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定的，樣本中的靶蛋白及其他雜質(zhì)蛋白都會(huì)與ELISA板結(jié)合，實(shí)驗(yàn)背景會(huì)比較高。而且直接ELISA每種靶蛋白都需要準(zhǔn)備能夠與其特異性結(jié)合的一抗，實(shí)驗(yàn)不太靈活。另外由于沒有使用二抗，信號(hào)沒有被放大，降低了測(cè)定的靈敏度。2、間接ELISA先將抗原結(jié)合到ELISA板上，隨后分

淡天藍(lán)鏈霉菌Streptomyces培養(yǎng)2022/03/23: 淡天藍(lán)鏈霉菌Streptomyces的培養(yǎng)：1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備（見圖）菌種制備，其中(1)～(4)為孢子制備過程。4、保存在沙土管或冷凍管中的

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