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國產新生牛血清和進口新生牛血清存在什么差異？2021/07/12

新生牛血清。取自出生14h內的小牛的血制成的血清。新生牛血清中營養(yǎng)豐富，蛋白含量和各種生長因子較高，價格較胎牛血清低得多，是目前動物細胞培養(yǎng)中常用的血清。國產新生牛血清和進口新生牛血清的差異：1.質量標準不健全：國外不僅對胎牛、新生小牛等不同種類的牛血清有相應的質量標準，而且通過質量評價，對同一種類的牛血清劃分出“標準”、“特級”等不同等級，以滿足生產、研究等不同用途的需要。而國內在這方面尚存在一定的不足。2.質量標準不完善：國外要求對牛血清至少進行9種外源病毒的檢測。而我國在2009年的《小牛

血清和血漿的區(qū)別及作用有哪些?2021/07/09

血清：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血k收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應中，血小板釋放出許多物質，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應的物質則

移液器的的分類與使用方法2021/07/08

移液器又稱移液槍，是一種用于定量轉移液體的器具。在進行分析測試方面的研究時，一般采用移液器(pipette)移取少量或微量的液體。移液器的分類根據原理可分為氣體活塞式移液器(Air-displacementpipette)和外置活塞式移液器(Positive-displacementpipette)。氣體活塞式移液器主要用于標準移液，外置活塞式移液器主要用于處理易揮發(fā)、易腐蝕及粘稠等特殊液體。移液器的使用方法1.量程的調節(jié)在調節(jié)量程時，如果要從大體積調為小體積，則按照正常的調節(jié)方法，逆時針旋轉旋

ELISA實驗技巧：酶標板分類與性能判斷2021/07/07

酶標板作為ELISA檢測實驗中的輔材，起著舉足輕重的作用并直接影響最終實驗結果，酶標板的好壞主要取決于其對蛋白吸附的靈敏度、板孔間蛋白吸附能力差異以及所采購酶標板批次間的差異。因此，選擇一款蛋白吸附靈敏度高、對蛋白吸附能力孔間差異小、批次間差異小的酶標板產品，是實驗者獲得可靠、穩(wěn)定實驗結果的保障。酶標板分類：根據不同的分類標準，酶標板有著不同的分類。一、根據孔數，可分為96孔、48孔等，由于酶標板主要是配合酶標儀用，目前市面上的酶標儀最多為96孔，因此酶標板最為常用的也是96孔。二、根據其底部的

胰蛋白酶有什么物化性質？用途是什么？2021/07/06

胰蛋白酶為蛋白酶的一種，EC3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。其英文名稱為Trypsin，化學式是C6H15O12P3。胰蛋白酶的物化性質：胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，純化獲得的結晶，再制成的凍干制劑。呈白色或米黃色結晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿。分子量24000，pI10.5，最適pH值7.8~8.5左右。pH9.0不可逆失活。Ca2+對酶活性有穩(wěn)定作用；重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對其活性有強烈抑制。胰蛋白酶的用途：胰蛋

ELISA實驗方法：ELISA中必要的三個試劑2021/07/05

在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定，ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中);(5)酶聯物(結合物)及標本的稀釋液;(6)洗滌液;(7)酶反應終止液。免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月以上。有些不完整的試盒，僅

乙酸的物化性質是什么？如何制備？2021/07/01

乙酸，也叫醋酸、冰醋酸，英文名稱為AceticAcid，化學式CH?COOH，是一種有機一元酸，為食醋內酸味及刺激性氣味的來源。乙酸的物理性質：在常溫下是一種有強烈刺激性酸味的無色液體。乙酸的熔點為16.6℃（289.6K），沸點117.9℃(391.2K），相對密度1.05，閃點39℃，爆炸極限4%～17%（體積）。純的乙酸在低于熔點時會凍結成冰狀晶體，所以無水乙酸又稱為冰醋酸。乙酸易溶于水和乙醇，其水溶液呈弱酸性。乙酸鹽也易溶于水，水溶液呈堿性。乙酸的化學性質：1.酸性：乙酸在水溶液中是一元

ELISA實驗操作要點：ELISA檢測做好這7步，得出結果2021/06/30

ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研生產中為廣泛的是靈敏的技術手段?？墒窃谛吕鲜植僮鬟^程中總是會出現或大或小的問題，比如說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空白還低.....。聯碩生物為您總結7步ELISA檢測實驗經驗，做好這7步您就能得出實驗結果。1、包被原的性質很重要，蛋白濃度，是否降解，這關系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對于生物素和脂類物質或小分子物質我們要事

什么是無水乙醇？它的理化性質以及基本用途有哪些？2021/06/29

無水乙醇(Ethanolabsolute)，是指純度較高的乙醇水溶液。一般情況下，一般稱濃度為99.5%的乙醇溶液為無水乙醇，無水乙醇是乙醇和水的混合物。無水乙醇的物理性質：外觀與性狀：無色液體，具有特殊香味熔點(℃):-114.1相對密度(水=1):0.79沸點(℃):78.3揮發(fā)性:易揮發(fā)性質:純度高達99.5%的乙醇(純度達99.99%的乙醇稱為絕對乙醇)溶解性:與水以任意比互溶，可混溶于醚、氯仿、甘油等多數有機溶劑無水乙醇的化學性質：1.消去反應無水乙醇在濃硫酸條件下迅速加熱升至170℃

免疫熒光染色原理及步驟2021/06/28

免疫熒光又稱免疫熒光抗體。免疫熒光實驗原理是將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優(yōu)點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少，相對使用標記抗體用量偏大。利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。下面詳細介紹免疫熒光染色步驟：1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，10min后棄去，使標本保持一定濕度。2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間(參考：30min)。3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，

PBS緩沖液的作用和保存方法2021/06/25

PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphatebuffersaline)的簡稱，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。（注意：PBS不是磷酸緩沖液(phosphatebuffersolution，PB)）PBS緩沖液的作用：不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原

移液器的分類，用途以及維護保養(yǎng)2021/06/22

移液器又稱移液槍，其外文名稱為pipette，是一種用于定量轉移液體的器具。在進行分析測試方面的研究時，一般采用移液器移取少量或微量的液體。移液器的分類：1.根據工作原理可分為空氣置換移液器與正向置換移液器；2.根據能夠同時安裝吸頭的數量可將其分為單通道移液器和多通道移液器；3.根據刻度是否可調節(jié)可將其分為固定移液器和可調節(jié)式移液器；4.根據調節(jié)刻度方式可將其分為手動式移液器和電動式移液器；5.根據特殊用途可將其分為全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、連續(xù)注射移液器等。移液器的用途：用于臨床

細胞爬片的特點，操作注意事項及其保存方式2021/06/21

在醫(yī)學生物研究中，免疫熒光檢測等需用到細胞爬片。細胞爬片是什么？其名為爬片，外文名稱為RoundCoverslip，用于各類細胞培養(yǎng)板中，讓細胞在爬片上生長，后續(xù)實驗可直接使用，避免了細胞從培養(yǎng)板轉移到載玻片上的損傷。細胞爬片采用玻璃片，經滅菌，TC等處理后制作而成，可促進細胞在玻片上貼壁生長與形態(tài)伸展，在后期免疫組化、免疫熒光、原位雜交等處理過中也不易脫片。細胞爬片特點以及規(guī)格：-無污染，免清洗，節(jié)省實驗員的時間。-γ射線滅菌，無熱源、無DNA酶、無RNA酶。-化學穩(wěn)定性好，耐受實驗室常用溶劑

ELISA實驗操作要點：降低ELISA背景的四點tips2021/06/16

在ELISA試劑盒操作中，我們都認為ELISA實驗的原理似乎很簡單，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封閉。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果做得不太好，也有可能毀了整個實驗。在實驗結束時，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結果的信噪比。背景噪音會影響您對結果的判斷。如何降低ELISA的背景，下面有一些tips。一、洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊，其實很重要，因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可

如何把細胞鋪均勻？2021/06/09

做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是最常見的一個實驗了。但是有很多人不是很得要領，鋪得不是均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。一般96孔板每孔是加100微升細胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入。加完半邊板后，將未加的細胞懸液混一下，再繼續(xù)加剩余的半邊板子。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣。注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強或次數太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，

重組抗體的產生及有哪些優(yōu)勢？2021/06/07

1890年馮˙貝林（vonBehring）發(fā)現了抗白喉毒素血清，發(fā)明了人工被動免疫，并提出了抗原和抗體的概念，在后續(xù)漫長的抗體研究中，人類相繼發(fā)展出三代抗體制備技術：①第一代抗體：以抗原免疫高等脊椎動物制備的多克隆抗體；②第二代抗體：由雜交瘤技術產生的只針對某一種特定抗原決定簇的單克隆抗體；③第三代抗體：應用分子克隆技術、基因突變技術改造某種抗體的基因編碼序列，生產出的性能更*的抗體，也稱為基因工程抗體或重組抗體。單抗的出現及其顯著的*性（特異性高、蛋白類天然產物等特性）使其在疾病的研究、診斷和

ELISA試劑盒分為內源性物質和外源性物質兩種2021/06/04

血清是常用的標本，血漿一般可視為與血清同等的標本，標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致，ELISA試劑盒分為內源性物質和外源性物質兩種：1．內源性物質普遍認為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質，可以不同程度影響檢測結果。常見的干擾物質有：類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig（s）抗體、交叉反應物質和其它物質等。（1）類風濕因子人血清中IgM、IgG型類風濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結合，從而導致假陽性

菌種保存的幾種常用方法2021/06/02

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態(tài)，才能在一定的時間內使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據這三個因素而設計的。保藏方法大致可分為以下幾種：1.傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅

二甲基亞砜的基本用途有哪些？2021/05/31

二甲基亞砜（DMSO）是一種含硫有機化合物，分子式為C2H6OS，常溫下為無色無臭的透明液體，是一種吸濕性的可燃液體。具有高極性、高沸點、熱穩(wěn)定性好、非質子、與水混溶的特性，能溶于乙醇、丙醇、苯和l仿等大多數有機物，被譽為“萬/能溶劑”。在酸存在時加熱會產生少量甲基硫醇、甲醛、二甲基硫、甲磺酸等化合物。在高溫下有分解現象，遇氯能發(fā)生劇烈反應,在空氣中燃燒發(fā)出淡藍色火焰。可作有機溶劑、反應介質和有機合成中間體。也可用作合成纖維的染色溶劑、去染劑、染色載體以及回收乙q、二氧化l的吸收劑。一、基本用途

淺談酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試驗辦法2021/05/28

酶聯免疫測定是將抗原抗體反響的高度特異性和酶的催化作用相結合，開展建立一種非放射性符號免疫分析辦法。因為ELISA具有靈敏度高、特異性強，酶免疫試劑的性質比較穩(wěn)定，操作辦法簡潔快速、無放射性污染以及應用范圍廣等很多優(yōu)點，在醫(yī)學根底理論研究，病毒學和生物化學查驗等工作中應用十分廣泛。該法需將純化的抗原包被在固相載體，與必定稀釋度的待側血清反響，然后與酶符號的第二抗體（抗人IgG,IgA,IgM或抗人IgG.A.M的混合物）反響，酶可催化色原反響，在酶標測定儀必定波長下進行比色，測定吸光度。ELIS