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國產(chǎn)新生牛血清和進口新生牛血清存在什么差異？2021/07/12

新生牛血清。取自出生14h內(nèi)的小牛的血制成的血清。新生牛血清中營養(yǎng)豐富，蛋白含量和各種生長因子較高，價格較胎牛血清低得多，是目前動物細胞培養(yǎng)中常用的血清。國產(chǎn)新生牛血清和進口新生牛血清的差異：1.質(zhì)量標準不健全：國外不僅對胎牛、新生小牛等不同種類的牛血清有相應的質(zhì)量標準，而且通過質(zhì)量評價，對同一種類的牛血清劃分出“標準”、“特級”等不同等級，以滿足生產(chǎn)、研究等不同用途的需要。而國內(nèi)在這方面尚存在一定的不足。2.質(zhì)量標準不完善：國外要求對牛血清至少進行9種外源病毒的檢測。而我國在2009年的《小牛

血清和血漿的區(qū)別及作用有哪些?2021/07/09

血清：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血k收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應的物質(zhì)則

移液器的的分類與使用方法2021/07/08

移液器又稱移液槍，是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具。在進行分析測試方面的研究時，一般采用移液器(pipette)移取少量或微量的液體。移液器的分類根據(jù)原理可分為氣體活塞式移液器(Air-displacementpipette)和外置活塞式移液器(Positive-displacementpipette)。氣體活塞式移液器主要用于標準移液，外置活塞式移液器主要用于處理易揮發(fā)、易腐蝕及粘稠等特殊液體。移液器的使用方法1.量程的調(diào)節(jié)在調(diào)節(jié)量程時，如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié)方法，逆時針旋轉(zhuǎn)旋

ELISA實驗技巧：酶標板分類與性能判斷2021/07/07

酶標板作為ELISA檢測實驗中的輔材，起著舉足輕重的作用并直接影響最終實驗結(jié)果，酶標板的好壞主要取決于其對蛋白吸附的靈敏度、板孔間蛋白吸附能力差異以及所采購酶標板批次間的差異。因此，選擇一款蛋白吸附靈敏度高、對蛋白吸附能力孔間差異小、批次間差異小的酶標板產(chǎn)品，是實驗者獲得可靠、穩(wěn)定實驗結(jié)果的保障。酶標板分類：根據(jù)不同的分類標準，酶標板有著不同的分類。一、根據(jù)孔數(shù)，可分為96孔、48孔等，由于酶標板主要是配合酶標儀用，目前市面上的酶標儀最多為96孔，因此酶標板最為常用的也是96孔。二、根據(jù)其底部的

胰蛋白酶有什么物化性質(zhì)？用途是什么？2021/07/06

胰蛋白酶為蛋白酶的一種，EC3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。其英文名稱為Trypsin，化學式是C6H15O12P3。胰蛋白酶的物化性質(zhì)：胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，純化獲得的結(jié)晶，再制成的凍干制劑。呈白色或米黃色結(jié)晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿。分子量24000，pI10.5，最適pH值7.8~8.5左右。pH9.0不可逆失活。Ca2+對酶活性有穩(wěn)定作用；重金屬離子、有機磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制劑對其活性有強烈抑制。胰蛋白酶的用途：胰蛋

ELISA實驗方法：ELISA中必要的三個試劑2021/07/05

在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定，ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中);(5)酶聯(lián)物(結(jié)合物)及標本的稀釋液;(6)洗滌液;(7)酶反應終止液。免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月以上。有些不完整的試盒，僅

乙酸的物化性質(zhì)是什么？如何制備？2021/07/01

乙酸，也叫醋酸、冰醋酸，英文名稱為AceticAcid，化學式CH?COOH，是一種有機一元酸，為食醋內(nèi)酸味及刺激性氣味的來源。乙酸的物理性質(zhì)：在常溫下是一種有強烈刺激性酸味的無色液體。乙酸的熔點為16.6℃（289.6K），沸點117.9℃(391.2K），相對密度1.05，閃點39℃，爆炸極限4%～17%（體積）。純的乙酸在低于熔點時會凍結(jié)成冰狀晶體，所以無水乙酸又稱為冰醋酸。乙酸易溶于水和乙醇，其水溶液呈弱酸性。乙酸鹽也易溶于水，水溶液呈堿性。乙酸的化學性質(zhì)：1.酸性：乙酸在水溶液中是一元

ELISA實驗操作要點：ELISA檢測做好這7步，得出結(jié)果2021/06/30

ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研生產(chǎn)中為廣泛的是靈敏的技術(shù)手段?？墒窃谛吕鲜植僮鬟^程中總是會出現(xiàn)或大或小的問題，比如說花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空白還低.....。聯(lián)碩生物為您總結(jié)7步ELISA檢測實驗經(jīng)驗，做好這7步您就能得出實驗結(jié)果。1、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事

什么是無水乙醇？它的理化性質(zhì)以及基本用途有哪些？2021/06/29

無水乙醇(Ethanolabsolute)，是指純度較高的乙醇水溶液。一般情況下，一般稱濃度為99.5%的乙醇溶液為無水乙醇，無水乙醇是乙醇和水的混合物。無水乙醇的物理性質(zhì)：外觀與性狀：無色液體，具有特殊香味熔點(℃):-114.1相對密度(水=1):0.79沸點(℃):78.3揮發(fā)性:易揮發(fā)性質(zhì):純度高達99.5%的乙醇(純度達99.99%的乙醇稱為絕對乙醇)溶解性:與水以任意比互溶，可混溶于醚、氯仿、甘油等多數(shù)有機溶劑無水乙醇的化學性質(zhì)：1.消去反應無水乙醇在濃硫酸條件下迅速加熱升至170℃

免疫熒光染色原理及步驟2021/06/28

免疫熒光又稱免疫熒光抗體。免疫熒光實驗原理是將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優(yōu)點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少，相對使用標記抗體用量偏大。利用抗原抗體反應進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。下面詳細介紹免疫熒光染色步驟：1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，10min后棄去，使標本保持一定濕度。2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間(參考：30min)。3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，

PBS緩沖液的作用和保存方法2021/06/25

PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphatebuffersaline)的簡稱，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。（注意：PBS不是磷酸緩沖液(phosphatebuffersolution，PB)）PBS緩沖液的作用：不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原

移液器的分類，用途以及維護保養(yǎng)2021/06/22

移液器又稱移液槍，其外文名稱為pipette，是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具。在進行分析測試方面的研究時，一般采用移液器移取少量或微量的液體。移液器的分類：1.根據(jù)工作原理可分為空氣置換移液器與正向置換移液器；2.根據(jù)能夠同時安裝吸頭的數(shù)量可將其分為單通道移液器和多通道移液器；3.根據(jù)刻度是否可調(diào)節(jié)可將其分為固定移液器和可調(diào)節(jié)式移液器；4.根據(jù)調(diào)節(jié)刻度方式可將其分為手動式移液器和電動式移液器；5.根據(jù)特殊用途可將其分為全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、連續(xù)注射移液器等。移液器的用途：用于臨床

細胞爬片的特點，操作注意事項及其保存方式2021/06/21

在醫(yī)學生物研究中，免疫熒光檢測等需用到細胞爬片。細胞爬片是什么？其名為爬片，外文名稱為RoundCoverslip，用于各類細胞培養(yǎng)板中，讓細胞在爬片上生長，后續(xù)實驗可直接使用，避免了細胞從培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移到載玻片上的損傷。細胞爬片采用玻璃片，經(jīng)滅菌，TC等處理后制作而成，可促進細胞在玻片上貼壁生長與形態(tài)伸展，在后期免疫組化、免疫熒光、原位雜交等處理過中也不易脫片。細胞爬片特點以及規(guī)格：-無污染，免清洗，節(jié)省實驗員的時間。-γ射線滅菌，無熱源、無DNA酶、無RNA酶。-化學穩(wěn)定性好，耐受實驗室常用溶劑

ELISA實驗操作要點：降低ELISA背景的四點tips2021/06/16

在ELISA試劑盒操作中，我們都認為ELISA實驗的原理似乎很簡單，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封閉。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果做得不太好，也有可能毀了整個實驗。在實驗結(jié)束時，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。背景噪音會影響您對結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景，下面有一些tips。一、洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊，其實很重要，因為如果未結(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，那么它會增加背景噪音。如有必要，可

如何把細胞鋪均勻？2021/06/09

做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是最常見的一個實驗了。但是有很多人不是很得要領，鋪得不是均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。一般96孔板每孔是加100微升細胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入。加完半邊板后，將未加的細胞懸液混一下，再繼續(xù)加剩余的半邊板子。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣。注意把握力度（一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，

重組抗體的產(chǎn)生及有哪些優(yōu)勢？2021/06/07

1890年馮˙貝林（vonBehring）發(fā)現(xiàn)了抗白喉毒素血清，發(fā)明了人工被動免疫，并提出了抗原和抗體的概念，在后續(xù)漫長的抗體研究中，人類相繼發(fā)展出三代抗體制備技術(shù)：①第一代抗體：以抗原免疫高等脊椎動物制備的多克隆抗體；②第二代抗體：由雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的只針對某一種特定抗原決定簇的單克隆抗體；③第三代抗體：應用分子克隆技術(shù)、基因突變技術(shù)改造某種抗體的基因編碼序列，生產(chǎn)出的性能更*的抗體，也稱為基因工程抗體或重組抗體。單抗的出現(xiàn)及其顯著的*性（特異性高、蛋白類天然產(chǎn)物等特性）使其在疾病的研究、診斷和

ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種2021/06/04

血清是常用的標本，血漿一般可視為與血清同等的標本，標本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：1．內(nèi)源性物質(zhì)普遍認為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig（s）抗體、交叉反應物質(zhì)和其它物質(zhì)等。（1）類風濕因子人血清中IgM、IgG型類風濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導致假陽性

菌種保存的幾種常用方法2021/06/02

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態(tài)，才能在一定的時間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據(jù)這三個因素而設計的。保藏方法大致可分為以下幾種：1.傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅

二甲基亞砜的基本用途有哪些？2021/05/31

二甲基亞砜（DMSO）是一種含硫有機化合物，分子式為C2H6OS，常溫下為無色無臭的透明液體，是一種吸濕性的可燃液體。具有高極性、高沸點、熱穩(wěn)定性好、非質(zhì)子、與水混溶的特性，能溶于乙醇、丙醇、苯和l仿等大多數(shù)有機物，被譽為“萬/能溶劑”。在酸存在時加熱會產(chǎn)生少量甲基硫醇、甲醛、二甲基硫、甲磺酸等化合物。在高溫下有分解現(xiàn)象，遇氯能發(fā)生劇烈反應,在空氣中燃燒發(fā)出淡藍色火焰。可作有機溶劑、反應介質(zhì)和有機合成中間體。也可用作合成纖維的染色溶劑、去染劑、染色載體以及回收乙q、二氧化l的吸收劑。一、基本用途

淺談酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試驗辦法2021/05/28

酶聯(lián)免疫測定是將抗原抗體反響的高度特異性和酶的催化作用相結(jié)合，開展建立一種非放射性符號免疫分析辦法。因為ELISA具有靈敏度高、特異性強，酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定，操作辦法簡潔快速、無放射性污染以及應用范圍廣等很多優(yōu)點，在醫(yī)學根底理論研究，病毒學和生物化學查驗等工作中應用十分廣泛。該法需將純化的抗原包被在固相載體，與必定稀釋度的待側(cè)血清反響，然后與酶符號的第二抗體（抗人IgG,IgA,IgM或抗人IgG.A.M的混合物）反響，酶可催化色原反響，在酶標測定儀必定波長下進行比色，測定吸光度。ELIS